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范琦: 作品数：57 被引量：79H指数：6; 供职机构：辽宁省农业科学院更多>>; 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省科技厅科技攻关项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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利用荧光定量PCR检测方法对柞蚕不同生产阶段柞蚕微孢子虫发生情况的初步调查: 2019年; 柞蚕微粒子病是柞蚕生产中重点检测的病害,目前主要采用镜检淘汰带毒母蛾及子代卵的方法进行病害防控,而荧光定量PCR检测方法具有较高的灵敏度,能够有效提高柞蚕生产中对微孢子虫的阳性检出率。应用荧光定量PCR检测方法对来自2个蚕区柞蚕蛹、蛾的微孢子虫发生情况进行初步调查,同时考察蛹期不同积温发育时期微孢子虫的发生情况以及蛾期亲本带毒对子代卵带毒的影响。结果表明,在蛹期积温中后期(150℃以后)柞蚕微孢子虫的阳性检出率提高,可以考虑在这一发育阶段利用荧光定量PCR方法进行蛹期提前预检;在检验柞蚕微孢子虫垂直传播过程中,发现亲本蛾带毒情况对子代卵带毒存在不同程度的影响,有必要用荧光定量PCR检测方法在卵期对柞蚕微孢子虫进行辅助检测,可以弥补常规蛾期检测的漏检问题。研究结果为应用荧光定量PCR检测技术,在蛹期提前预检以提高种茧品质,在蛾期检测以及卵期辅助检测以减少柞蚕微孢子虫的垂直传播,最终有效控制柞蚕微粒子病的发生提供了参考依据。; 米锐米锐李青峰马淑慧李佩佩赵振军马淑慧李亚洁叶博孟楠赵振军朱有敏孙永欣范琦; 关键词：柞蚕柞蚕微孢子虫荧光定量PCR 发育时期

一组用于快速诊断柞蚕微孢子虫的荧光定量PCR引物及其应用: 本发明公开一组用于诊断柞蚕微孢子虫的特异性引物及其应用，通过SYBR Green荧光定量PCR方法实现了对柞蚕微孢子虫的高灵敏特异性检测，最优反应条件为:95℃30s；以95℃5s，62.5℃30s循环40次；熔解曲线条...; 米锐李佩佩范琦李亚洁赵振军李树英都兴范; 文献传递

一种柞蚕卵巢细胞培养基及其应用: 本发明公开一种柞蚕卵巢细胞培养基的组成成分、配制方法及其在柞蚕卵巢细胞培养中的应用。将配制好的氨基酸和糖混合贮藏液(MLM-AAS)、无机盐贮藏液(MLM-Salt)、维生素贮藏液(MLM-Vit)和牛血清白蛋白、胎球蛋...; 王林美李树英岳冬梅范琦; 文献传递

以柞蚕NPV为载体在柞蚕蛹体内表达外源基因获得成功: 1992年; 辽宁省农科院大连生物技术研究所张春发等人利用柞蚕核型多角体病毒(ApNpV)组建成转移载体,并以此载体携带外源基因(人白细胞介素-4、DE糖蛋白)在草地贪夜蛾Sf9昆虫细胞、柞蚕卵巢细胞以及柞蚕蛹活体中表达成功。实验表明,表达产物的确以非融合蛋白形式出现,从而建立了柞蚕NpV载体—柞蚕蛹活体宿主表达系统。这是继菌苜蓿纹夜蛾核多角体病毒(AcNpV)—Sf9细胞载体表达系统和家蚕核多角体病毒(BmNpV)——家蚕幼虫载体表达系统以后又一个昆虫杆状病毒载体达表系统。; 范琦; 关键词：柞蚕蛹外源基因 NPV 昆虫细胞杆状病毒卵巢细胞

昆虫抗菌肽基因的合成及克隆被引量：2: 1999年; 设计并合成了昆虫抗菌肽（ｃｅｃｒｏｐｉｎ）Ｂ基因，合成的抗菌肽Ｂ基因全长１３２个碱基对，克隆到ＰＵＣ１９载体上，经过ＤＮＡ序列分析证实，合成的基因序列与设计的序列完全一致。; 范琦李文利王林美刘淑珊; 关键词：抗菌肽基因

柞蚕蛹卵巢原代细胞培养方法及培养基的选择试验被引量：4: 2010年; 采用机械分散法和胰酶消化法,分别选取MGM-448、Grace、TC-100等3种培养基进行柞蚕蛹卵巢组织细胞的体外培养。在2个月的原代细胞培养期间,机械分散法获得的培养物在MGM-448培养基中贴壁效果好,细胞健康且生长旺盛;而在Grace和TC-100培养基中,细胞虽能贴壁,但生长较缓慢。胰酶消化法分散细胞的效果好,但在3种培养基中的细胞会出现轻微损伤而影响活力。综上认为,柞蚕蛹卵巢原代细胞的最佳培养方法为机械分散法,最佳培养基为MGM-448。; 王林美范琦张波叶博赵振军李树英; 关键词：柞蚕卵巢细胞原代培养

一种柞蚕微孢子虫模板DNA的提取方法及其在分子诊断方面的应用: 本发明公开一种快速提取柞蚕微孢子虫模板DNA的方法及其应用，具体的所述模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该方法操作简单快速、成本低、通量高、能活蛹取样、抗干扰能力强、污染风险低，提取...; 李佩佩范琦米锐岳冬梅赵振军叶博王林美张波

一种蛋白酶、该蛋白酶的制备方法及其应用和药用剂型: 本发明涉及一种蛋白酶、该蛋白酶的制备方法及其应用和药用剂型，从具有吐丝结茧能力的昆虫在羽化前分泌的吐出液中分离、提取出一种蛋白酶。这种具有纤溶活性的蛋白酶，具备生物活性高、稳定性良好等特点。该蛋白具有强烈的精氨酸酯酶活力...; 李树英李文利范琦耿鹏李亚洁赵振军张波

锌指蛋白基因ZAT12提高转基因高油酸花生抗寒性被引量：3: 2020年; 低温和冻害严重影响高油酸花生的产量和品质。为了提高高油酸花生的抗寒性,本研究利用农杆菌介导的转化方式将可以激活低温响应基因的锌指蛋白基因ZAT12导入高油酸花生。同时对影响高油酸花生转化的几种因素(植物生长素ZT和6-BA的使用浓度,侵染时间,烟草提取物添加量)进行改良优化。通过PCR和实时荧光定量PCR检测证明PnZAT12已经整合到高油酸花生基因组中。对转基因植株进行低温胁迫处理,分别测定其相对电导率(relative electrolytic leakage, REL)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)活性。结果表明,转基因花生的MDA含量和REL显著低于非转基因花生,而SOD活性明显高于非转基因花生。在表型比对方面,转基因花生的叶片黄化程度和植株枯萎程度远低于非转基因花生。结果证实,转基因花生比非转基因花生有更高的抗寒性。研究结果对抗逆基因的改良研究及高油酸花生的分子育种工作都具有重要的参考价值。; 王旭达张高华王鹤于树涛李怀梅王晓燕范琦; 关键词：农杆菌转化抗寒性