赵振军
- 作品数：37 被引量：48H指数：5
- 供职机构：辽宁省农业科学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅科技攻关项目辽宁省科技厅农业攻关重大项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 柞蚕溶菌酶基因的克隆和序列分析被引量：9
- 2009年
- 采用cDNA末端扩增(RACE)方法及简并引物克隆了柞蚕溶菌酶(Antheraea pernyilysozyme)基因(Gen-Bank登录号:DQ353869)。该基因cDNA序列全长675 bp,由3个外显子和2个内含子组成,其开放读码框(ORF)长420 bp,编码140个氨基酸。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白的1-20位氨基酸为信号肽序列,21-140位氨基酸为柞蚕溶菌酶成熟蛋白(分子质量14 kD,等电点8.46)。柞蚕溶菌酶氨基酸序列中含有c型溶菌酶分子所特有的活性中心Glu32、Asp50以及8个半胱氨酸残基,与鳞翅目昆虫溶菌酶的氨基酸序列同源性较高,属非钙结合型c型溶菌酶。柞蚕溶菌酶的模拟三级结构与印度柞蚕(Antheraea mylitta)溶菌酶的三级结构十分相似。
- 张波王林美叶博赵振军范琦李树英
- 关键词：生物信息学分析
- 一种柞蚕微孢子虫株（系）的分离、培养及保存的方法
- 本发明公开了一种柞蚕微孢子虫株(系)分离、培养及保存的方法。利用柞蚕精巢或卵巢组织制备原代细胞，分离、培养柞蚕微孢子虫；利用柞蚕蛹期滞育可以长期储存的特点，将柞蚕原代细胞分离、培养的柞蚕微孢子虫经发芽后注射入健康柞蚕蛹体...
- 岳冬梅范琦王林美李佩佩叶博赵振军张波
- 文献传递
- 利用荧光定量PCR检测方法对柞蚕不同生产阶段柞蚕微孢子虫发生情况的初步调查
- 2019年
- 柞蚕微粒子病是柞蚕生产中重点检测的病害,目前主要采用镜检淘汰带毒母蛾及子代卵的方法进行病害防控,而荧光定量PCR检测方法具有较高的灵敏度,能够有效提高柞蚕生产中对微孢子虫的阳性检出率。应用荧光定量PCR检测方法对来自2个蚕区柞蚕蛹、蛾的微孢子虫发生情况进行初步调查,同时考察蛹期不同积温发育时期微孢子虫的发生情况以及蛾期亲本带毒对子代卵带毒的影响。结果表明,在蛹期积温中后期(150℃以后)柞蚕微孢子虫的阳性检出率提高,可以考虑在这一发育阶段利用荧光定量PCR方法进行蛹期提前预检;在检验柞蚕微孢子虫垂直传播过程中,发现亲本蛾带毒情况对子代卵带毒存在不同程度的影响,有必要用荧光定量PCR检测方法在卵期对柞蚕微孢子虫进行辅助检测,可以弥补常规蛾期检测的漏检问题。研究结果为应用荧光定量PCR检测技术,在蛹期提前预检以提高种茧品质,在蛾期检测以及卵期辅助检测以减少柞蚕微孢子虫的垂直传播,最终有效控制柞蚕微粒子病的发生提供了参考依据。
- 米锐米锐李青峰马淑慧李佩佩赵振军马淑慧李亚洁叶博孟楠赵振军朱有敏孙永欣范琦
- 关键词：柞蚕柞蚕微孢子虫荧光定量PCR发育时期
- 一组用于快速诊断柞蚕微孢子虫的荧光定量PCR引物及其应用
- 本发明公开一组用于诊断柞蚕微孢子虫的特异性引物及其应用，通过SYBR Green荧光定量PCR方法实现了对柞蚕微孢子虫的高灵敏特异性检测，最优反应条件为:95℃30s；以95℃5s，62.5℃30s循环40次；熔解曲线条...
- 米锐李佩佩范琦李亚洁赵振军李树英都兴范
- 文献传递
- 一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用
- 本发明公开一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用，具体的所述引物碱基序列如SEQ ID NO.1～3所示，其模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该引物特异性好，灵敏度高，利用该引物建立的柞蚕...
- 李佩佩范琦叶博赵振军王晓燕都兴范
- 柞蚕蛹卵巢原代细胞培养方法的研究
- 研究柞蚕蛹卵巢原代细胞制作、培养。以卵巢组织为材料,采用机械分散法、胰酶消化法及螯合剂分散法,选取Grace、TC-100、MGM-448三种培养基体外培养2个月观察细胞生长变化。机械分散法对细胞无损伤;胰酶消化法有轻微...
- 王林美范琦张波叶博赵振军李树英
- 关键词：柞蚕卵巢原代培养
- 文献传递
- 柞蚕核型多角体病毒对柞蚕蛹卵巢细胞感染性研究被引量：1
- 2013年
- 研究柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)与宿主细胞相互作用及形态发生机制,以便更好地开发利用杆状病毒表达系统。体外培养柞蚕蛹卵巢原代细胞,ApNPV病毒悬液感染细胞,测定细胞感染率及半数组织培养感染剂量,应用倒置相差显微镜和电子显微镜观察ApNPV感染后细胞的形态学变化。结果显示,ApNPV感染柞蚕蛹卵巢细胞5 d,倒置相差显微镜下观察即可发现细胞胀大,细胞内有多角体病毒出现;感染7 d,细胞内多角体病毒数量增多,细胞感染率为40.2%,细胞上清液中无包涵体病毒(NOV)效价滴度为6.95×105TCID50/mL。电子显微镜下观察到受病毒感染的细胞早期表现为细胞核膨大,而后核内出现病毒发生基质和核衣壳,核衣壳获得套膜形成病毒束,发育为成熟的病毒粒子,众多病毒粒子同时封存在一个折光性强,具有蛋白质性质、直径在0.7-10μm的多角体中。得出结论,ApNPV对柞蚕蛹卵巢细胞高度敏感,其在柞蚕蛹卵巢细胞内复制为典型的杆状病毒非同步复制。
- 王林美岳冬梅李树英范琦叶博赵振军张波
- 关键词：柞蚕核型多角体病毒卵巢细胞
- 柞蚕抗菌肽cecropin B的结构和抑菌活性及基因表达分析
- 2019年
- 抗菌肽对昆虫抵御病原微生物的侵染具有重要作用。使用在线软件分析成熟的柞蚕抗菌肽cecropin B高级结构,并与鳞翅目其他昆虫抗菌肽进行聚类分析。利用巴斯德毕赤酵母体外表达柞蚕cecropin B,并测试重组柞蚕cecropin B的抑菌活性。采用qRT-PCR方法检测3个不同品种柞蚕蛹在柞蚕肠球菌、柞蚕核型多角体病毒和柞蚕微孢子虫感染情况下,体内cecropinB基因的转录表达情况。结果显示,柞蚕cecropin B成熟肽的N端和C端分别有1个α螺旋结构,聚类分析将柞蚕cecropin B归为昆虫抗菌肽cecropin B亚型;柞蚕cecropin B在巴斯德毕赤酵母工程菌中得到体外表达,重组柞蚕cecropin B具有体外抑菌活性;柞蚕肠球菌感染的不同品种柞蚕蛹的cecropinB基因转录表达水平均上调,柞蚕核型多角体病毒或柞蚕微孢子虫感染的不同品种柞蚕蛹的cecropinB基因转录表达水平有明显差异,提示柞蚕cecropin B在柞蚕抵抗不同病原微生物的感染过程中可能具有不同的作用。
- 叶博叶博李佩佩赵振军张波李佩佩李树英岳冬梅
- 关键词：柞蚕巴斯德毕赤酵母表达系统病原微生物实时荧光定量PCR
- 一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用
- 本发明公开一组柞蚕微孢子虫检测引物及其应用，具体的所述引物碱基序列如SEQ ID NO.1～3所示，其模板提取的方法为，应用碱裂解结合磁珠进行DNA的释放、富集、分离与纯化，该引物特异性好，灵敏度高，利用该引物建立的柞蚕...
- 李佩佩范琦叶博赵振军王晓燕都兴范
- 文献传递
- 无花果曲霉(Aspergillus ficuum 3.4322)植酸酶基因的克隆及序列分析
- 2010年
- 以无花果曲霉(Aspergillus ficuum 3.4322)基因组DNA为模板,用PCR方法扩增植酸酶基因(phyA)。将PCR产物克隆到pMD 18-T质粒中,用于DNA测序。DNA序列分析结果表明,基因全长1 509 bp,其中包括一个长105 bp的内含子。编码467个氨基酸,第1-19氨基酸为信号肽序列,成熟的植酸酶由448个氨基酸组成。与黑曲霉(Aspergillus niger)植酸酶(GenBank Accession:M94550)的氨基酸同源性为95.7%,与无花果曲霉(Aspergillus ficuum3.324)植酸酶(GenBank Accession:AY013315)的氨基酸同源性为98.9%,显示了植酸酶基因在不同菌株中的差异。
- 张波王林美叶博赵振军李树英
- 关键词：无花果曲霉植酸酶基因克隆
