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人白细胞介素-10转基因治疗类风湿关节炎的可行性研究: 构建人白细胞介素-10(hIL-10)真核表达载体,通过转染家兔滑膜细胞(RSCs)观察其表达情况,以探讨 hIL-10基因治疗类风湿关节炎(RA)的可行性。从药物过敏患者提取外周血单个核细胞(PBMCs)总 RNA;以...; 王吉波刘国平吕振华刘湘萍杨堃; 文献传递

趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义被引量：4: 2013年; 目的检测趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在子宫内膜癌组织中的表达水平,探讨其与子宫内膜癌患者的临床病理特征和预后的关系。方法采用组织芯片技术和免疫组化方法检测子宫内膜癌组织中CXCL12、CXCR4表达水平,并分析它们与FIGO分期、细胞分化程度、淋巴结转移、病理类型及年龄等临床病理特征及总生存率的关系。结果子宫内膜癌组织中CXCL12、CXCR4的表达水平均显著高于正常子宫内膜组,且二者在子宫内膜癌组的上调表达呈正相关。CXCR4的表达与子宫内膜癌细胞分化程度呈正相关(P<0.05)。CXCL12、CXCR4均不影响子宫内膜癌患者的生存率(P>0.05)。结论 CXCL12和CXCR4可能在子宫内膜癌的发生、发展中发挥生物学作用。; 赵静张佳宋萌萌黄煜崔竹梅刘湘萍; 关键词：子宫内膜肿瘤趋化因子CXCL12

人血小板源性生长因子B基因的体外扩增以及克隆和鉴定被引量：2: 2006年; 目的:自行构建人血小板源性生长因子B(PDGF-B)真核表达载体,为人血小板源性生长因子B基因转染真核细胞的实验研究及基因治疗奠定基础。方法:实验于2002-01/2005-01在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。①根据Genbank的人血小板源性生长因子B的全长基因序列,设计合成一对附加BamHⅠ,XhoⅠ两个限制性内切酶酶切位点的特异性引物。②采用反转录聚合酶链反应从人胎盘mRNA中扩增出人血小板源性生长因子B基因片段,将其插入真核表达载体PcDNA4构建成重组真核表达载体PcDNA4/PDGF-B。③经测序鉴定后,再用双酶切和聚合酶链反应对插入片段进行分析和验证。结果:反转录-聚合酶链反应产物经琼脂糖电泳结果显示在预期位置有相对分子质量为725bp的特异性扩增带。②序列分析、双酶切和聚合酶链反应结果证实插入片段序列正确。结论:成功扩增出完整的人血小板源性生长因子B基因,构建了基因重组真核表达载体PcDNA4/PDGF-B。为人及动物细胞的转基因研究,在基因水平改变其遗传性状打下基础。; 罗文娟王传富吕振华刘湘萍隋爱华; 关键词：血小板源性生长因子基因

原癌基因PIK3CA在宫颈癌组织中的表达及意义被引量：9: 2008年; 目的研究原癌基因PIK3CA在宫颈癌组织中的表达及其意义。方法用RT-PCR方法检测PIK3CA mRNA在15例正常宫颈组织和30例宫颈癌组织中的表达,免疫组化方法检测其蛋白在50例宫颈癌前病变组织及20例宫颈癌组织中的表达情况。结果从宫颈上皮内瘤样病变(CIN)到宫颈癌的发展过程中,PIK3CA的蛋白表达产物PI3K p110a蛋白表达水平逐渐增加(Hc=9.968,P<0.05);PIK3CA mRNA在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达差异有显著性(t=2.672,P<0.05)。结论PIK3CA基因改变与宫颈癌的发生发展有关,宫颈癌的发展过程伴随着PI3K p110a蛋白的表达异常。; 王洪艳崔竹梅刘湘萍隋爱华杨堃孙显路; 关键词：宫颈肿瘤宫颈上皮内瘤样病变

PCR法快速筛选重组克隆方法的改进被引量：1: 2003年; ①目的　以PCR法在菌液中快速筛选重组克隆。②方法　提取小鼠巨噬细胞总RNA ,反转录PCR(RT PCR)获得肿瘤坏死因子 α(TNF α)基因片段 ,TA克隆连接质粒载体、转化大肠杆菌JM10 9。在大肠杆菌培养中的不同时间取样测定大肠杆菌A60 0 值及计数。以不同数量的大肠杆菌为模板进行系列PCR扩增 ,获得适宜PCR扩增条件的大肠杆菌数。③结果　以菌液为模板进行PCR能够快速筛选重组体 ,大肠杆菌模板数在 12 5～ 2 5 0个范围内 ,PCR对阳性克隆的扩增可获得良好结果 ;获得常规培养条件下转化大肠杆菌的生长曲线 ,A60 0 值与大肠杆菌计数间存在显著正相关 (r=0 .93,P <0 .0 0 1)。④结论　通过测定大肠杆菌培养液A60 0 值推算大肠杆菌数量 ,以适宜的大肠杆菌模板行PCR法筛选重组克隆。; 毛伟征孙道升司春祥隋爱华刘湘萍陈栋吕振华; 关键词：重组体聚合酶链反应克隆方法大肠杆菌

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刘湘萍