隋爱华
- 作品数：160 被引量：367H指数：9
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向小鼠TNF-α基因RNA干扰慢病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的:构建靶向小鼠TNF-α基因的RNA干扰慢病毒载体,为RNA干扰基因治疗提供基础。方法:设计、合成3组靶向TNF-α基因的特异小干扰RNA(siRNA):siRNA1、siRNA2、siRNA3及阴性对照siRNA,体外转染小鼠巨噬细胞株RAW264.7,用real-time PCR和ELISA法检测其对经脂多糖刺激的RAW264.7细胞表达TNF-α、IL-1β、IL-6的影响。筛选出特异且抑制性高的siRNA,根据其序列设计合成寡核苷酸链,构建表达短发卡RNA(shRNA)的重组慢病毒质粒并测序,经鉴定质粒与包装质粒共转染293T细胞生产慢病毒颗粒,计算病毒颗粒滴度。结果:①siRNA1、siRNA2、siRNA3组的TNF-αmRNA相对表达量分别为0.24±0.01、0.16±0.02、0.19±0.01,与阴性对照0.95±0.02相比差别均具有统计学意义(F=531.3,P<0.001);与阴性对照相比,mRNA表达抑制率分别为74.26%、83.09%、79.93%。siRNA1、siRNA2、siRNA3及阴性对照组的IL-1βmRNA或IL-6 mRNA相对表达量之间差别无统计学意义(F=0.981,P=0.980 7>0.05;F=0.739,P=0.586 7>0.05)。②siRNA1、siRNA2、siRNA3的TNF-α蛋白表达分别为(23.95±1.21)、(17.27±1.46)、(19.07±1.57)ng/ml与阴性对照的(35.37±2.93)ng/ml相比,差别均具有统计学意义(F=18.1,P=0.000 6<0.001);与阴性对照相比,TNF-α蛋白表达抑制率分别为32.29%、51.16%、46.08%。③以siRNA2序列设计、合成寡核苷酸链,构建重组慢病毒穿梭质粒,其PCR产物电泳结果为343 bp,空载体PCR产物306 bp;DNA测序显示pGCSIL-GFP-shRNA测序反应中断,但已显示部分插入序列。④转染后的293T细胞,生长良好,荧光表达强,慢病毒滴度为2×106TU/μl。结论:靶向小鼠TNF-α基因RNAi慢病毒载体构建成功。
- 赵颖杰王吉波辛苗苗梁宏达刘相萍杨堃隋爱华
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体巨噬细胞肿瘤坏死因子-Α
- 恩度与紫杉醇联合诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究
- 目的:探讨重组人血管内皮抑素(恩度)与紫杉醇联合作用对人食管癌细胞Eca-109增殖和凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度的恩度与紫杉醇及恩度、紫杉醇单药及联合用药对Eca-109细胞增殖的抑制作用;在光学显微镜下观察...
- 孔霞王秀美隋爱华刘圆圆
- 骨髓基质干细胞片层复合聚乳酸羟基乙酸支架构建组织工程骨被引量：2
- 2013年
- 目的制备骨髓基质干细胞片层，探讨其对组织工程骨成骨的作用。方法培养骨髓基质干细胞（BMSCs）并向成骨方向诱导，利用温度反应性培养皿制备骨髓基质干细胞片层，光学及电子显微镜下观察其形态。将经过预处理的三维多孔聚乳酸羟基乙酸（PLGA）支架注射BMSCs悬液并复合干细胞片层后植入犬左侧下颌骨缺损，为实验侧；将未复合细胞片层的支架植入右侧．为对照侧。16周后，对新生骨行影像学及组织学观察分析。结果片层中细胞排列紧密，生长活跃。实验侧吸光度值高于对照侧（P〈0．05），并可见较多哈弗系统及板层骨样结构。结论经温度反应性培养皿制备的干细胞片层结合PLGA支架可形成具有板层状结构的组织工程骨。
- 姚超李宁毅刘风芝王玲玲于跃远隋爱华
- 关键词：骨髓基质干细胞聚乳酸羟基乙酸组织工程骨
- 厄贝沙坦联合雷公藤甲素对2型糖尿病大鼠肾脏ANGPTL2、VEGF表达影响被引量：8
- 2013年
- 目的:观察厄贝沙坦联合雷公藤甲素(TP)对ANGPTL2、VEGF在2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏表达的影响并探讨其机制。方法:50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(NC,10只)和实验组(40只),实验组给予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ 30 mg/kg)建立T2DM大鼠模型,再随机分为4组:糖尿病对照组(DM)、厄贝沙坦组(DI)、雷公藤甲素组(DT)及厄贝沙坦联合雷公藤甲素组(DIT)。药物干预8周后,测体重、血压、肾重、血糖、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),24 h尿蛋白(UAL)的排泄量;镜下观察肾组织病理改变;免疫组化显色技术及实时定量PCR检测血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化。结果:DM组与NC组相比血糖、肌酐、BUN及UAL明显升高(P<0.01),实时定量PCR示ANGPTL2、VEGF mRNA明显上调(P<0.01);与DM组相比较,DT、DI及DIT组血糖、肌酐、BUN及UAL明显降低(P<0.01),DT、DI组中ANGPTL2、VEGF mRNA表达下调,DIT组更为明显(P<0.05)。结论:ANGPTL2、VEGF在T2DM大鼠肾脏中的表达上调,厄贝沙坦及雷公藤甲素可降低ANGPTL2及VEGF在T2DM大鼠肾脏中的表达,并有协同作用。
- 李柯桢栾健隋爱华马瑞霞周丽敏王艳
- 关键词：血管内皮生长因子雷公藤甲素厄贝沙坦糖尿病肾病
- TGF-β_1对支气管哮喘病人肺成纤维细胞的作用被引量：2
- 2013年
- 目的通过观察转化生长因子β1(TGF-β1)对支气管哮喘病人肺成纤维细胞增殖和分泌的影响,探讨二者在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法采用组织块贴壁培养方法,分离和原代培养哮喘病人肺成纤维细胞,免疫荧光法鉴定。以0、1、5、10μg/L TGF-β1分别作用肺成纤维细胞48h,MTT法测定成纤维细胞增殖情况,RT-PCR法测定肺成纤维细胞Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)mRNA表达水平。结果组织块贴壁法成功地培养出了肺成纤维细胞。免疫荧光法鉴定证明,原代培养出的细胞为肺成纤维细胞。不同浓度的TGF-β1均可促进哮喘病人肺成纤维细胞增殖,诱导哮喘病人肺成纤维细胞CollagenⅠmRNA的表达水平上调,呈浓度依赖性(F=44.723、24.704,P<0.05)。结论在哮喘发病机制中,TGF-β1可促进肺成纤维细胞的增殖,合成和分泌CollagenⅠ,从而引起气道黏膜下纤维化和胶原沉积,导致哮喘病人气道重塑。
- 孙文静杜春华隋爱华
- 关键词：哮喘转化生长因子Β1成纤维细胞
- 靶向肿瘤坏死因子-α慢病毒介导RNA干扰的实验性治疗研究被引量：1
- 2015年
- 目的：观察靶向小鼠TNF-α RNA干扰（RNAi）慢病毒载体颗粒对小鼠巨噬细胞株RAW264.7表达TNF-α、IL-1β及IL-6的影响，及对胶原诱导性关节炎（CIA）的治疗作用。方法分别用靶向小鼠TNF-α RNAi慢病毒颗粒、慢病毒阴性对照、空白对照感染小鼠巨噬细胞株 RAW264.7，检测TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平及TNF-α蛋白水平。制作小鼠CIA模型，设慢病毒RNAi治疗组、慢病毒阴性对照、空白对照和阳性对照，分别尾静脉注射 RNAi慢病毒颗粒、慢病毒阴性对照、PBS溶液，腹腔注射甲氨蝶呤，观测CIA关节炎积分，检测小鼠TNF-α血清水平，病理检查受累关节组织。结果①慢病毒治疗组TNF-αmRNA表达水平为0.291±0.021，低于慢病毒阴性对照0.925±0.013，差异有统计学意义（t=25.4，P〈0.01），抑制率为68.5%；②慢病毒治疗组TNF-α血清水平为（249±11） ng/ml，低于阴性对照（382±6） ng/ml，差异有统计学意义（t=10.31，P〈0.05），抑制率为34.7%。③慢病毒治疗组、阴性对照及空白对照之间，IL-1β、IL-6 mRNA表达水平差异无统计学意义（t=1.00，1.22，P均〉0.05）。④尾静脉注射后第8天，慢病毒治疗组关节炎分值为2.50±0.19，低于空白对照3.63±0.18及阴性对照3.75±0.16，差异均具统计学意义（F=42.8，P〈0.01），慢病毒治疗组与阳性对照的关节炎分值缓慢下降，至少持续至尾静脉注射后2周。⑤慢病毒治疗组、阳性对照TNF-α血清水平分别为（35±6） pg/ml、（32±7） pg/ml，均低于阴性对照47±3，差异有统计学意义（t=3.03，4.11，P均〈0.01）。病理显示慢病毒治疗组关节炎症细胞浸润减轻。结论靶向小鼠TNF-αRNAi在体外、体内有效抑制TNF-αmRNA及蛋白表达，降低CIA关节炎分值，减轻炎症细胞浸润。慢病毒介导RNAi为RA治疗提供一可行、有效方法。
- 赵颖杰王吉波赵磊温大蔚潘琳杨堃隋爱华
- 关键词：慢病毒肿瘤坏死因子-ΑRNA干扰
- 一种检测Notch信号通路的试剂、PCR检测方法及其应用
- 本发明提供了一种检测细胞内Notch信号通路的试剂、PCR检测方法及其应用，本发明所述检测试剂包括检测ADAM10基因、ADAM17基因、AES基因、CBL基因、CCND1基因、CD44基因等PCR反应引物以及相应的内参...
- 王海波梁晔刘相萍王丽萍刘世海姚如永隋爱华杨堃迟静薇周泉刘加秀
- 文献传递
- 急性淋巴细胞白血病并EB病毒感染的临床分析被引量：3
- 2011年
- 目的探讨EB病毒（EBV）在急性淋巴细胞白血病（ALL）儿童中的感染及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术检测EBV DNA,ELISA法检测EB病毒衣壳抗原IgM抗体（EBV-CA-IgM）,共检测47例。其中新发45例,复发2例;年龄0~14岁[（8.06±3.71）岁]。另取14例健康儿童作为健康对照组。男9例,女5例;年龄2~10岁[（7.24±2.54）岁]。结合临床表现、诱导治疗骨髓完全缓解（CR）率、形态学CR状态下的微小残留病（MRD）、复发率及无事件生存（EFS）率等分析ALL患儿中EBV感染情况及其临床意义。结果 47例ALL患儿中检出EBV感染15例（31.9%）,其中11例（23.40%）检出EBV DNA,EBV DNA水平为（3.28±5.95）×108copy.L-1;14例健康对照组外周血未检测到EBV DNA及EBV-CA-IgM。ALL中EBV感染组与非EBV感染组白细胞数分别为（78.00±58.38）×109L-1、（27.46±60.10）×109L-1（t=2.70,P=0.01）,诱导治疗CR率分别为46.7%、87.5%（P〈0.01）,MRD〉10-3分别为90.0%、26.1%（P〈0.01）,复发率分别为53.8%、13.8%（P〈0.01）,EFS率分别为23.1%、82.8%（P〈0.01）。结论 ALL并EBV感染具有高白细胞数、低诱导治疗CR率、高复发率、低EFS率,提示EBV感染可能参与儿童ALL的发生发展过程,亟待改善EBV感染ALL的治疗方法。
- 卢愿孙立荣仲仁庞秀英隋爱华赵艳霞宋爱琴
- 关键词：EB病毒急性淋巴细胞白血病荧光定量聚合酶链反应儿童
- 一种检测细胞凋亡信号通路的试剂及其PCR检测方法
- 本发明提供了一种检测细胞凋亡信号通路的试剂及其PCR检测方法，本发明所述检测试剂包括检测BAX基因、ANGPTL4基因、IL1A基因、MYBL2基因、PEA15基因、PRKAA1基因、BIRC5基因、CASP1基因、DA...
- 姚如永隋爱华刘世海杨堃刘相萍
- 文献传递
- 兔适合构建鼻窦炎动物模型(英文)被引量：6
- 2014年
- 背景:以实验动物模拟人类相关疾病是研究疾病发生发生及治疗的基础,鼻腔、鼻窦疾病也需要恰当实验动物作为其模型。目的:观察兔鼻腔、鼻窦的CT和局部解剖表现,探讨兔应用于鼻窦炎动物模型的可行性。方法:利用CT使用常规鼻窦冠状位与水平位扫描新西兰兔,随后进行常规鼻腔、鼻窦解剖学观察。结果与结论:兔鼻中隔将鼻腔分为左右两个腔,鼻腔外侧壁由上颌鼻甲、中间鼻甲、内侧鼻甲、下鼻甲组成,上颌窦窦腔最大,筛窦、蝶窦、额窦相对较小,以上结构均对称分布。兔鼻腔、鼻窦在CT扫描下显示清晰。兔鼻腔、鼻窦的解剖与人类鼻腔、鼻窦解剖结构既有相似也有不同,其上颌窦解剖部位与人相似且窦腔较大便于操作,具有动物实验模型建立的可行性,适用于鼻窦炎动物模型建立,可应用于模拟人类鼻窦炎的研究。
- 解道宇鞠建宝于海玲李娜郝大鹏隋爱华
- 关键词：实验动物鼻窦炎动物模型CT鼻腔鼻窦
