岳冬梅 作品数:38 被引量:66 H指数:6 供职机构: 辽宁省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 辽宁省自然科学基金 辽宁省科技厅农业攻关重大项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
荧光定量实时PCR方法分析柞蚕核型多角体病毒对不同昆虫细胞的感染性 柞蚕核型多角体病毒(ApMNPV)通常只感染柞蚕、樗蚕等少数昆虫及所属细胞,具有较高的宿主专一性。我们曾发现ApNPVΔph/egfp~+在感染不同昆虫细胞后,绿色荧光蛋白有不同程度表达。为进一步了解ApNPVΔph/e... 赵振军 王林美 岳冬梅 叶博 张波 范琦关键词:柞蚕核型多角体病毒 昆虫细胞 文献传递 柞蚕核型多角体病毒对Tn-Hi5细胞的感染性及抗细胞凋亡分析 被引量:1 2015年 细胞凋亡是昆虫宿主细胞抗病毒感染及控制病毒复制增殖的一个复杂的分子生物学机制。前期研究发现柞蚕核型多角体病毒(Ap NPV)的重组病毒Ap NPV-Δph/egfp+能够感染非特异性宿主细胞Tn-Hi5,并表达EGFP蛋白。利用实时荧光定量PCR方法进一步检测分析Ap NPV-Δph/egfp+在Tn-Hi5细胞中的复制增殖特点以及子代病毒的感染性;通过检测细胞凋亡信号通路中类caspase-3蛋白酶活性,分析Ap NPV-Δph/egfp+感染Tn-Hi5细胞后对抗细胞凋亡的作用途径。结果显示,随着病毒感染时间的延长,Ap NPV-Δph/egfp+在Tn-Hi5细胞中的DNA拷贝数增加,被感染的Tn-Hi5细胞能够产生子代病毒,但病毒DNA拷贝数逐代减少;Ap NPV-Δph/egfp+感染Tn-Hi5细胞后可抑制放线菌素D诱导的细胞类caspase-3蛋白酶活性。研究结果证实Ap NPV能够在Tn-Hi5细胞中复制增殖,并具有抑制由放线菌素D诱导的细胞凋亡的作用。 赵振军 王林美 叶博 岳冬梅 张波 李树英 都兴范 范琦关键词:柞蚕核型多角体病毒 细胞凋亡 花椰菜的组织快繁 被引量:2 2008年 岳冬梅关键词:快繁技术 花椰菜 自交不亲和系 杂种优势利用 制种成本 柞蚕核型多角体病毒对柞蚕蛹卵巢细胞感染性研究 被引量:1 2013年 研究柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)与宿主细胞相互作用及形态发生机制,以便更好地开发利用杆状病毒表达系统。体外培养柞蚕蛹卵巢原代细胞,ApNPV病毒悬液感染细胞,测定细胞感染率及半数组织培养感染剂量,应用倒置相差显微镜和电子显微镜观察ApNPV感染后细胞的形态学变化。结果显示,ApNPV感染柞蚕蛹卵巢细胞5 d,倒置相差显微镜下观察即可发现细胞胀大,细胞内有多角体病毒出现;感染7 d,细胞内多角体病毒数量增多,细胞感染率为40.2%,细胞上清液中无包涵体病毒(NOV)效价滴度为6.95×105TCID50/mL。电子显微镜下观察到受病毒感染的细胞早期表现为细胞核膨大,而后核内出现病毒发生基质和核衣壳,核衣壳获得套膜形成病毒束,发育为成熟的病毒粒子,众多病毒粒子同时封存在一个折光性强,具有蛋白质性质、直径在0.7-10μm的多角体中。得出结论,ApNPV对柞蚕蛹卵巢细胞高度敏感,其在柞蚕蛹卵巢细胞内复制为典型的杆状病毒非同步复制。 王林美 岳冬梅 李树英 范琦 叶博 赵振军 张波关键词:柞蚕 核型多角体病毒 卵巢细胞 柞蚕蛹虫草水提物对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响 被引量:8 2014年 研究柞蚕蛹虫草水提物(Aqueous extract from cordycep militaris of antheraea pernyi,AEoAPC)对人乳腺癌细胞MCF-7生长抑制与凋亡的作用。将不同浓度的AEoAPC分别作用于人乳腺癌细胞MCF-7 24、48、72 h后,应用倒置相差显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7的形态变化,噻唑蓝比色法测定细胞生长抑制效应,流式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果表明:AEoAPC能显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖,且在一定的浓度范围内呈时间和浓度的依赖性;形态学观察发现,细胞形状不规则、变暗、皱缩;FCM检测结果显示,作用72 h后G0-G1期(DNA合成前期)的细胞分布有所增加,使细胞阻滞于G2期(DNA合成后期)和S期(DNA合成期);0.8 g/L AEoAPC在24、48、72 h凋亡率分别为8.65%、14.20%、26.30%,其凋亡程度与时间呈正相关。说明AEoAPC能明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7的生长,诱导其细胞凋亡。 岳冬梅 王林美 李树英关键词:柞蚕 蛹虫草 乳腺癌细胞 细胞周期 高通量DNA快速提取方法及其在柞蚕微孢子虫分子诊断中的应用 2019年 针对柞蚕微孢子虫分子检测受限于繁琐的DNA提取而局限于实验室使用的瓶颈问题,以成本较低的碱裂解法结合磁珠抽提,建立了一种全程在96孔板上使用排枪操作的高通量DNA提取方法(HT提取),对比HT-冻融法和HT-SDS法2种裂解方法获得的DNA在常规PCR与荧光定量PCR(qPCR)中的检测下限,并进行微粒子病筛查的应用。结果表明,HT提取法与传统方法相比,无繁琐预处理,操作快速、通量高,污染低、抗干扰、提取DNA品质好,主要耗材能重复使用,可自动化,人力物力成本较低;HT-SDS法具有更稳定的裂解效果,获得的DNA用于常规PCR、qPCR检测下限可达45和0045个/μL;HT-冻融法在常规PCR与qPCR中的检测下限为45和045个/μL,而传统抽提方法的常规PCR检测下限仅为110个/μL。结合HT-SDS法和qPCR,对3 000个样品进行微粒子病筛查,结果显示,其检测灵敏度显著高于现行镜检技术,最高高出近11倍,且对低带毒品种优势尤为显著,有望实现在柞蚕种茧微粒子病检疫及柞蚕种质资源保护中的应用,促进柞蚕业发展。 李佩佩 李佩佩 徐亮 岳冬梅 徐亮 何龙 米锐 叶博 王林美 赵振军 李树英 米锐关键词:高通量 DNA提取 柞蚕微孢子虫 分子诊断 高灵敏度 柞蚕蛹虫草抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和诱导凋亡的作用研究 研究柞蚕蛹虫草水提物(aqueous extract from cordycep militaris of antheraea pernyi,AEoAPC)对人乳腺癌MCF-7生长抑制与凋亡的作用。将不同浓度的AEoAP... 岳冬梅 王林美 都兴范 李学军 李树英关键词:蛹虫草 乳腺癌细胞 凋亡 细胞周期 文献传递 一种柞蚕微孢子虫株(系)的分离、培养及保存的方法 本发明公开了一种柞蚕微孢子虫株(系)分离、培养及保存的方法。利用柞蚕精巢或卵巢组织制备原代细胞,分离、培养柞蚕微孢子虫;利用柞蚕蛹期滞育可以长期储存的特点,将柞蚕原代细胞分离、培养的柞蚕微孢子虫经发芽后注射入健康柞蚕蛹体... 岳冬梅 范琦 王林美 李佩佩 叶博 赵振军 张波文献传递 五种柞树叶营养成分分析 被引量:6 2017年 为研究柞树叶的营养特性,采集丹东地区的5种柞树叶进行基础营养成分测定。测得柞树叶中粗蛋白、粗脂肪、粗多糖、粗灰分、粗纤维含量分别为1.84%~5.73%、0.23%~0.42%、1.04%~3.87%、1.71%~3.67%、9.50%~18.67%,总黄酮含量为0.34%~1.27%,柞叶中矿质元素及维生素含量丰富,其中蒙古栎、尖柞、辽东栎还含有一定量的硒。5种柞树叶均有较高的营养价值,在医药食品行业有很好的应用前景。 岳冬梅 王林美 李树英关键词:营养成分 粗蛋白 黄酮 矿物质 柞蚕血球细胞体外培养及对核型多角体病毒的感染研究 2012年 分别采用Grace、TC-100和MGM-448加20%胎牛血清和10%苯基硫尿做为细胞原代培养基,在27℃,pH 6.2~6.4的条件下,对5龄柞蚕(Antheraea pernyi)幼虫血球细胞进行体外培养,发现细胞在培养1 h后基本贴壁,在相差倒置显微镜下观察三种培养基细胞形态各异,原代培养的细胞主要是椭圆形、梭形和不规则形,进行了45 d培养试验,观察结果表明:三种培养基中Grace培养基优于其他两种,其新生细胞增殖较快,细胞透明,大约10 d左右即基本长满瓶底,15 d进行第一次传代,传代培养细胞主要以园形和椭圆形为主。利用Grace培养基培养传代第2代的细胞进行柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的感染实验,通过相差倒置显微镜和电子显微镜观察呈现出典型的细胞病理变化,感染7 d细胞感染率可达75%。 岳冬梅 王林美 李树英 范琦 叶博 赵振军 张波关键词:柞蚕 细胞培养 核型多角体病毒