丛瑛
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：苏州大学医学部放射医学与防护学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金国防基础科研计划更多>>
- 相关领域：核科学技术医药卫生更多>>
- 耐辐射球菌pprI基因真核表达载体的构建及其抗辐射作用被引量：2
- 2014年
- 目的 研究耐辐射球菌pprI原核基因的真核表达载体的构建及其转染对离体真核细胞急性放射损伤的防护作用.方法 应用DNA重组技术构建pEGFP-c1-pprI质粒;采用脂质体转染技术分别将空载体质粒pEGFP-c1和重组质粒pEGFP-c1-pprI转入人肺上皮细胞系Beas-2B细胞,筛选稳定转染细胞系;应用集落形成实验检测受照转染细胞的生存能力;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化;荧光显微镜观察受照细胞ROS荧光强度;免疫荧光实验观察受照细胞不同时间γ-H2AX焦点数目.结果 成功地构建了pprI原核基因的真核表达载体,并在Beas-2B细胞中表达了PprI融合蛋白,建立了稳定转染细胞系.与空白对照组和空载体组相比,细胞克隆生存曲线显示转染了pprI基因的Beas-2B细胞经不同剂量辐射,其存活分数SF增加,该曲线参数D0、Dq、N增高;转染了pprI基因的Beas-2B细胞受照后的ROS的荧光强度和不同时间（1、2、4 h） γ-H2AX的焦点数均显著减低（F=16.73、19.47、6.94,P＜0.05）;此外,该细胞G2期阻滞（F=139.73、237.92,P＜0.05）和凋亡率显著减低（F=626.02、2 052,P＜0.05）.结论 耐辐射球菌pprI原核基因可在离体真核细胞中稳定表达,并且显著提高受照真核细胞的辐射抗性.
- 文玲施怡任丽丽丛瑛杨占山
- 关键词：耐辐射球菌急性放射损伤辐射抗性
- 耐辐射球菌pprI基因转染对受照酵母菌抗氧化能力的影响被引量：4
- 2013年
- 研究不同剂量60Coγ射线对转染了耐辐射球菌pprI基因的毕赤酵母菌过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响,探讨耐辐射球菌pprI基因在酵母菌中的表达对辐射细胞抗氧化能力的作用。Western blot检测酵母菌培养上清液中目的蛋白PprI的表达分泌。分别通过可见光法、单胺氧化法、分光光度比色法测定CAT、SOD和GSH-Px的活性。转染耐辐射球菌pprI基因的毕赤酵母菌中检测到PprI蛋白质的表达。当γ射线剂量为2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy时,不论是转基因毕赤酵母组还是对照组,CAT、SOD、GSH-Px活性均随着剂量的增加出现先升高后降低的趋势,并且受照后转基因毕赤酵母菌中3种酶的活性均显著高于对照组(p<0.01)。耐辐射球菌pprI基因在酵母菌中的表达能显著增强辐射细胞的抗氧化能力,这可能是原核pprI基因转染增强真核细胞抗辐射能力的机理之一。
- 丛瑛吴伟文玲杨占山
- 关键词：毕赤酵母过氧化氢酶谷胱甘肽过氧化物酶
