任丽丽
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校优势学科建设工程资助项目国防基础科研计划更多>>
- 相关领域：医药卫生艺术建筑科学生物学更多>>
- 耐辐射奇球菌PprI蛋白质在毕赤酵母菌中的高效表达及纯化被引量：1
- 2016年
- 目的 利用真核毕赤酵母高效表达原核的耐辐射奇球菌pprI基因,建立高效表达及纯化PprI蛋白质的技术路线。方法 根据毕赤酵母密码子的偏爱性,改造耐辐射奇球菌pprI基因的编码序列,利用PCR技术全合成改造过的pprI基因,并在其N末端添加一个6×His标签。PCR产物经纯化后克隆到毕赤酵母表达载体pHBM-905A中,利用Cop I和Not I双酶切并回收线性化的目的片段后,转化毕赤酵母GS115菌株。将获得的毕赤酵母转化子诱导表达,SDS-PAGE、Western blot和质谱检测培养上清液,用Ni-NTA柱纯化目的蛋白,BCA法测定蛋白浓度。结果 新合成的耐辐射奇球菌pprI基因编码序列正确,毕赤酵母转化菌株的培养上清液经SDS-PAGE和Western blot均可检测到相对分子质量为43000的目的蛋白条带,经质谱检测证实该目的蛋白为耐辐射奇球菌PprI蛋白。选用Ni-NTA柱获得了大量纯化的PprI蛋白,应用浓度为250 mmol/L的咪唑淋洗时,PprI蛋白洗脱率最高。BCA法测得纯化蛋白浓度为0.35 mg/ml。结论 建立了一种新的适于毕赤酵母表达的耐辐射奇球菌pprI基因,成功构建了分泌表达PprI蛋白质的重组毕赤酵母工程菌株,建立了高效表达目的蛋白的技术路线,并获得了高效表达和纯化的PprI蛋白。
- 任丽丽吴伟施怡岳凌杨占山
- 关键词：耐辐射奇球菌毕赤酵母纯化
- 基于模糊层次分析法对苏州古城老街坊居住环境综合分析与评价——以道前街区为例
- 苏州作为历史文化名城，古城区内的传统街坊居住模式一直由古代沿用至今，由于时代发展，老街坊的居住环境受到一定的冲击与影响，要了解现阶段老街坊居住环境质量优劣、对古城保护改造是否成功，需要对其进行实际评价分析。 本文对苏州...
- 任丽丽
- 关键词：苏州古城居住环境
- 原核pprI基因活体转染对BALB/c小鼠急性放射损伤保护作用的研究被引量：3
- 2015年
- 目的 研究耐辐射奇球菌pprI基因活体转染对小鼠急性放射损伤的防护作用.方法 采用SPF级纯品系BALB/c雄性小鼠,应用活体电转染技术,将pEGFP-c1空载质粒及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入小鼠股前肌肉.应用60Coγ射线进行全身照射,死亡率观察组吸收剂量为6 Gy,观察照后30 d内小鼠死亡率的变化;放射效应观察组吸收剂量为4 Gy,于照后1、7、14、28和35 d观察小鼠外周血象、胸腺、脾脏和骨髓细胞的凋亡率,并于照后第7和28天观察小鼠肺脏和睾丸组织的病理变化.结果 质粒注射剂量为50 μg/50μl,电场强度为200 V/cm时转染肌细胞的效率最高.pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠急性辐射死亡率为30％,显著低于单纯照射组（60.0％）和空载体组（63.3％）（x2=4.90、6.24,P＜0.05）.与单纯照射组、空载体组比较,pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠的外周血白细胞计数在照后1、7、14和28 d显著增高（F=16.26、8.10、6.37、10.74,P＜0.05）,血小板计数在照后第7和14天显著增高（F=7.36、5.71,P＜0.05）,淋巴细胞百分率在照后7d显著增高（F=18.43,P＜0.05）;胸腺和骨髓细胞凋亡率均在照后第1、7、14、28和35天显著降低（F=3.88、14.91、14.14、39.86、5.65,P＜0.05;F=53.70、11.75、21.78、41.40、4.54,P＜0.05）;脾脏细胞凋亡率在照后第1、7、14和28天显著降低（F=97.95、56.61、33.55、14.71,P＜0.05）.pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转染组小鼠肺脏和睾丸的放射病理损伤较轻并且恢复较快.结论 耐辐射奇球菌pprI基因活体电转染对BALB/c小鼠急性放射损伤具有显著的保护作用,为进一步临床应用奠定了实验基础.
- 施怡文玲任丽丽杨占山
- 关键词：耐辐射奇球菌BALB/C小鼠急性放射损伤
- 一种DNA分子及毕赤酵母重组质粒和高效表达耐辐射球菌PprI蛋白的毕赤酵母重组菌
- 本发明涉及生物技术领域，公开了包含SEQ ID NO:1所示序列的DNA分子，以及插入所述DNA分子的毕赤酵母重组质粒和转化所述毕赤酵母重组质粒到毕赤酵母感受态细胞并高效表达耐辐射球菌PprI蛋白的毕赤酵母重组菌。本发明...
- 杨占山吴伟乔惠萍文玲施怡任丽丽于冬
- 文献传递
- 耐辐射球菌pprI基因真核表达载体的构建及其抗辐射作用被引量：2
- 2014年
- 目的 研究耐辐射球菌pprI原核基因的真核表达载体的构建及其转染对离体真核细胞急性放射损伤的防护作用.方法 应用DNA重组技术构建pEGFP-c1-pprI质粒;采用脂质体转染技术分别将空载体质粒pEGFP-c1和重组质粒pEGFP-c1-pprI转入人肺上皮细胞系Beas-2B细胞,筛选稳定转染细胞系;应用集落形成实验检测受照转染细胞的生存能力;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化;荧光显微镜观察受照细胞ROS荧光强度;免疫荧光实验观察受照细胞不同时间γ-H2AX焦点数目.结果 成功地构建了pprI原核基因的真核表达载体,并在Beas-2B细胞中表达了PprI融合蛋白,建立了稳定转染细胞系.与空白对照组和空载体组相比,细胞克隆生存曲线显示转染了pprI基因的Beas-2B细胞经不同剂量辐射,其存活分数SF增加,该曲线参数D0、Dq、N增高;转染了pprI基因的Beas-2B细胞受照后的ROS的荧光强度和不同时间（1、2、4 h） γ-H2AX的焦点数均显著减低（F=16.73、19.47、6.94,P＜0.05）;此外,该细胞G2期阻滞（F=139.73、237.92,P＜0.05）和凋亡率显著减低（F=626.02、2 052,P＜0.05）.结论 耐辐射球菌pprI原核基因可在离体真核细胞中稳定表达,并且显著提高受照真核细胞的辐射抗性.
- 文玲施怡任丽丽丛瑛杨占山
- 关键词：耐辐射球菌急性放射损伤辐射抗性
- 一种新的耐辐射球菌PprI蛋白的用途及药物
- 本发明涉及生物技术领域，特别涉及PprI蛋白的用途及药物。本发明提供了PprI蛋白在制备防治高等真核生物辐射损伤药物中的应用。本发明研究发现PprI蛋白对人类细胞和小鼠急性放射损伤具有至关重要的防治作用，并增强了抗氧化和...
- 杨占山施怡任丽丽岳凌杨巍张舒羽
- 文献传递
- 耐辐射奇球菌TAT-PprI蛋白对小鼠急性放射损伤防治作用及其机理的研究
- 目的：耐辐射奇球菌是目前地球上辐射抗性最强的原核生物之一。该菌极端的辐射抗性与其DNA损伤应答（DDR）和修复系统的蛋白表达密切相关，其中PprI蛋白是一种关键的修复蛋白调控因子。本课题组近年的研究表明，耐辐射奇球菌pp...
- 任丽丽
- 关键词：耐辐射球菌急性放射损伤动物模型
- 文献传递
- 衍纸艺术在家居装饰中的运用研究
- 衍纸艺术是纸艺术中一种特殊的艺术形式,它是纸艺术的优雅典范。将衍纸艺术的形式创新运用到家居装饰中赋予了家居装饰新的春天。据调查分析,关于在家居装饰行业的学术研究较多,衍纸艺术的学术研究几乎为零。本文主旨是对衍纸艺术在家居...
- 任丽丽
- 关键词：家居装饰装饰设计
- 文献传递
- 结肠癌术后化疗的相关预后因素分析
- 目的：探讨结肠癌术后曾接受以奥沙利铂为基础的化疗方案的患者的预后相关的临床病理因素，为肿瘤治疗疗效评估提供一定的理论指导。
方法：回顾性分析2003年1月1日至2007年12月31日之间，术后在我科接受辅助化疗...
- 任丽丽
- 关键词：结肠癌术后化疗预后
- 文献传递
