方悦
- 作品数：8 被引量：37H指数：4
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- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 汉防己甲素预防裸鼠白血病多药耐药性形成的研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨不同浓度汉防己甲素(Tetrandrine,Tet)在不同给药时间对白血病荷瘤小鼠耐药性形成的预防作用。方法建立K562荷瘤小鼠模型,随机分成4组(每组9只):Tet高(28 mg/kg)、中(18 mg/kg)、低(5 mg/kg)剂量组和对照组(生理盐水)。每组再根据注射Tet和生理盐水的时间不同分为24 h、48 h、72 h三个亚组(每组3只)。观察荷瘤动物的生长情况和肿瘤生长曲线,测定肿瘤生长抑制率,肿瘤生长延迟时间以及生存期的改变。免疫组织化学染色检测各组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达情况。结果汉防己甲素的预防给药可增强阿霉素对小鼠K562实体瘤生长的抑制作用,且随浓度的增加和给药时间的提前,抑制作用增强,肿瘤生长延迟时间增长,生存期延长(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示:对照组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达分别呈强阳性(P<0.05),且随Tet浓度的增加和给药时间的提前,实验组P-gp、MRP1、LRP1蛋白的阳性率减弱(P<0.05)。结论在一定条件下,汉防己甲素具有预防白血病多药耐药形成的作用。
- 曹渊方悦秦蓉李皓许文林沈慧玲
- 关键词：汉防己甲素多药耐药白血病K562
- 汉防己甲素诱导人胃癌BGC-823细胞自噬和凋亡的作用及机制被引量：6
- 2013年
- 目的观察汉防己甲素诱导人胃癌BGC-823细胞自噬与凋亡的作用,并探讨两者发生以及相互关联的分子机制。方法用不同浓度的汉防己甲素作用于人胃癌BGC-823细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western-blot法检测各组细胞Bcl-2和自噬标记蛋白LC3、Beclin1的表达,MDC自噬特异性染料荧光染色观察自噬泡的聚集。结果 TET对BGC-823细胞的生长有显著抑制作用,呈明显的时间、剂量依赖性;TET可诱导BGC-823细胞发生凋亡;TET可诱导BGC-823细胞发生自噬,自噬作用在8、10μg/mL TET给药组达到高峰,后随着浓度的增加逐渐下降;在TET给药前用3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻断自噬后,低浓度(8μg/mL)TET诱导的凋亡率明显升高;高浓度(20μg/mL)TET诱导的凋亡率差别无统计学意义。结论 TET能明显抑制人胃癌BGC-823细胞的生长,并诱导其发生凋亡和自噬。TET诱导的自噬作为保护性机制,可发挥拮抗凋亡的作用。
- 方悦曹渊秦蓉沈慧玲许文林
- 关键词：汉防已甲素自噬凋亡
- 白血病多药耐药裸鼠荷瘤模型的建立被引量：8
- 2013年
- 目的建立人白血病荷瘤小鼠多药耐药模型。方法将人白血病细胞K562接种于裸鼠背部皮下,持续低剂量瘤内注射阿霉素,逐步诱导建立耐阿霉素的白血病荷瘤裸鼠模型。绘制裸鼠移植瘤生长曲线;MTT法检测阿霉素诱导后移植瘤细胞对各化疗药物的敏感性;荧光定量PCR检测MDR1、MRP1、LRP1基因表达水平;免疫组化和流式细胞技术检测P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达;流式细胞技术检测移植瘤细胞周期分布和细胞内阿霉素浓度。结果裸鼠皮下移植瘤的成瘤率为100%;化疗组瘤细胞对ADR、VP16、DNR和VCR的IC50均明显高于对照组,其耐药指数分别为40.78、20.59、21.24、18.81;阿霉素诱导组MDR、MRP1、LRP1基因mRNA表达水平分别是对照组的31.55、3.35、3.16倍;免疫组化和流式细胞术检测结果均显示诱导组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达较对照组明显升高;流式细胞术检测显示诱导耐药组瘤细胞S期比例[(8.0±1.32)%]较对照组[(56.92±1.41)%]明显降低,细胞内阿霉素浓度较对照组明显减少。结论成功建立白血病多药耐药动物荷瘤模型,为克服肿瘤继发多药耐药的深入研究奠定了基础。
- 曹渊惠璐璐秦蓉方悦许文林沈慧玲
- 关键词：移植瘤白血病多药耐药K562MRP1P-GP
- miR-520a靶基因PIK3CA结合位点多态性与中国汉族人群大肠癌易感性的关联研究被引量：7
- 2015年
- 背景与目的：越来越多的研究表明，微小RNA（microRNA，miRNA，miR）靶基因位点的多态性可能会影响miRNA的转录或生成能力，影响个体对肿瘤的易感性。本研究旨在探讨大肠癌患者miR-520a靶基因PIK3CA 3’端单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）位点rs141178472与中国汉族人群大肠癌易感性之间的关系。方法：选取386例大肠癌标本作为实验组，394名年龄及性别比例匹配的非肿瘤个体作为对照组。病例对照研究检测rs141178472的分布频率。统计分析大肠癌易感性与多态性之间的关系。结果：携有rs141178472 CC基因型或C等位基因显著增加了大肠癌的发病风险（CC vs TT，OR=1.716，95%CI：1.084~2.716， P=0.022；C vs T，OR=1.258，95%CI：1.021~1.551，P=0.033）。通过检测大肠癌患者外周血单个核细胞PIK3CA的表达发现，PIK3CA mRNA的表达与SNP基因型rs141178472具有关联性。结论：miR-520a与PIK3CA 3’UTR的SNP位点rs141178472相互作用可能与大肠癌易感性有关。
- 丁丽芳姜藻陈巧云秦蓉方悦李皓
- 关键词：PIK3CA基因
- 雷公藤甲素通过抑制microRNA-21的表达提高SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性被引量：2
- 2012年
- 目的:观察雷公藤甲素对胃癌SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性的影响,并探讨其机制。方法:采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于SGC7901/CDDP细胞,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞增长率;荧光定量PCR检测microRNA-21表达;蛋白质印迹法检测Bcl-2蛋白表达;AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡。将microRNA-21反义寡核苷酸转染SGC7901/CDDP细胞,观察其对细胞增长率、凋亡和Bcl-2表达的影响。采用小干扰RNA转染实验证明Bcl-2与胃癌耐药的关系。结果:非毒性浓度雷公藤甲素可提高SGC7901/CDDP细胞对顺铂敏感性,并且降低mi-croRNA-21的表达。microRNA-21反义寡核苷酸转染SGC7901/CDDP细胞后,降低Bcl-2表达,提高顺铂敏感性和顺铂诱导的细胞凋亡。小干扰RNA实验证明Bcl-2水平与SGC7901/CDDP细胞顺铂耐药有关。结论:雷公藤甲素通过降低microRNA-21的表达,抑制Bcl-2蛋白表达,促进顺铂诱导的细胞凋亡,从而提高胃癌SGC7901/CDDP细胞顺铂敏感性。
- 龙璐璐许文林沈慧玲方悦
- 关键词：雷公藤甲素MICRORNA-21BCL-2顺铂胃癌细胞
- 肿瘤耐药体内外模型的建立及其耐药的临床和基础研究
- 沈慧玲许文林朱小兰李皓苏兆亮曹渊方悦
- 项目所属科学技术领域：该成果为肿瘤耐药预防和逆转的基础与临床研究。主要科技内容：（1）成功建立肿瘤耐药体内外模型：首次采用梯度浓度阿霉素诱导的方法建立了白血病、乳腺癌细胞的耐药株，模仿肿瘤体内耐药形成过程，建立白血病、乳...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤治疗
- 汉防己甲素对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:探讨汉防己甲素对人胃癌BGC-823细胞株的增殖抑制与诱导凋亡的作用。方法:通过MTT实验检测汉防己甲素对于细胞生长的抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡比,Western blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果:汉防己甲素显著抑制BGC-823细胞生长,呈时间-剂量依赖性。流式细胞术检测显示不同浓度汉防己甲素干预后,凋亡细胞比例明显增高,且呈浓度-时间依赖性。Western blotting检测显示Bax,Bad和Bak蛋白表达增加,Bcl-2和Bcl-xl蛋白表达降低,Caspase-3和Caspase-9表达增加,用Caspase抑制剂z-VAD-fmk预处理4h后,z-VAD-fmk能抑制汉防己甲素引起的Caspase-3表达增加。结论:在一定条件下,汉防己甲素能够抑制胃癌BGC-823细胞增殖并且诱导其发生凋亡。
- 秦蓉曹渊方悦谢婵娟陈巧云沈慧玲许文林
- 关键词：汉防己甲素BGC-823增殖凋亡
- bcl-2与p53的表达对女性乳腺癌新辅助化学疗法影响的Meta分析被引量：3
- 2013年
- 目的评价凋亡相关基因bcl-2、p53的表达与乳腺癌新辅助化学疗法(化疗)疗效的关系。方法计算机检索Cochrane、Pubmed、Embase、中国知网、万方、维普等数据库,2003年4月-2013年4月bcl-2、p53蛋白与乳腺癌新辅助化疗的病例对照研究,应用RevMan 4.2统计软件进行定量分析。结果共纳入15篇病例对照研究,bcl-2与乳腺癌新辅助化疗6篇,治疗有效279例,其中bcl-2表达阳性159例;治疗无效115例,其中bcl-2表达阳性57例。p53与乳腺癌新辅助化疗13篇,治疗有效679例,其中p53表达阳性249例;治疗无效341例,其中p53表达阳性195例。Meta分析结果显示,bcl-2表达的阳性率与乳腺癌新辅助化疗疗效无统计学意义[OR=1.40,95%CI(0.89,2.18),P=0.14],而p53表达的阳性率与乳腺癌新辅助化疗疗效有统计学意义[OR=0.46,95%CI(0.26,0.80),P=0.007]。结论 p53可以作为乳腺癌新辅助化疗疗效敏感性的一个指标,对乳腺癌新辅助化疗有提示作用。
- 曹渊方悦秦蓉沈慧玲朱小兰李皓许文林
- 关键词：基因,BCL-2乳腺癌新辅助化疗META分析
