胡蓉
- 作品数:11 被引量:7H指数:2
- 供职机构:南华大学基础医学院药物药理研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省教育厅优秀青年基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 1 Wnt5a对荷脂平滑肌细胞中胆固醇蓄积的影响及相关机制
- 目的:探讨wnt5a对荷脂平滑肌细胞中胆固醇蓄积的影响及相关机制.方法:采用不同浓度的氧化低密度脂蛋白ox-LDL(0,25,50,75,l00μg/ml)处理平滑肌细胞48小时,并选取100 μg/ml ox-LDL分...
- 覃丽姚海伦胡蓉凌红艳廖端芳
- 文献传递
- PIG11与热休克蛋白60的相互作用介导肝癌HepG2细胞凋亡
- 2010年
- 为了探讨候选肝癌抑癌蛋白PIG11(p53-induced gene11,PIG11)诱导细胞凋亡的机制,首次在HepG2细胞株中鉴定了11个PIG11结合蛋白,热休克蛋白60(heat shock protein60,Hsp60)为其中之一.采用免疫共沉淀联合Western blot技术对Hsp60进行了验证.用Western blot检测其蛋白质表达,结果显示:pLXSN-PIG11-HepG2细胞中Hsp60蛋白表达较pLXSN-HepG2、HepG2细胞组下调(n=3,P<0.01).选取与Hsp60关系密切的Bax蛋白进行研究,Western blot结果显示PIG11高表达可引起胞浆Bax向线粒体转位.以上结果表明,PIG11蛋白能与HepG2细胞中的Hsp60结合,促进Hsp60-Bax的分离,引起Bax从胞液到线粒体转位,激活线粒体凋亡途径,这可能是其诱导HepG2细胞凋亡的主要机制之一.
- 刘小敏胡蓉梁晓秋王晓娟王燕张杨
- 关键词:HSP60HEPG2BAX
- Wnt5a对荷脂细胞Raw264.7/VMSC中胆固醇蓄积的影响及其初步机制探讨
- <正>目的:研究Wnt5a对荷脂细胞中胆固醇蓄积的影响及其初步机制方法:分别以Raw264.7以及VMSC作为研究对象,采用不同浓度的ox-LDL孵育不同时间,形成荷脂细胞模型。Western bloting检测荷脂细胞...
- 覃丽胡蓉姚海伦谢志忠廖端芳
- 关键词:实验药理学荷脂细胞胆固醇蓄积
- 文献传递
- 2 Wnt5a高表达抑制巨噬细胞中胆固醇的蓄积及分子机制
- 目的:探讨wnt5a高表达对巨噬细胞中胆固醇蓄积的影响及分子机制.方法:构建wnt5a cDNA逆转录病毒表达载体,采用逆转录病毒感染的方法建立wnt5a稳定高表达的巨噬细胞株RAW264.7/wnt5a.l00μg/m...
- 覃丽姚海伦胡蓉顾洪丰廖端芳
- 文献传递
- HepG2细胞中PIG11相互作用蛋白质的初步分离与鉴定被引量:1
- 2009年
- 目的探讨人肝细胞癌细胞系(HepG2)并初步鉴定候选肝癌抑癌蛋白肿瘤蛋白P53下游靶基因11号(PIG11)相互作用蛋白,确定PIG11的作用方式。方法课题组前期利用质粒pLXSN构建逆转录病毒载体,转染细胞后建立起PIG11高表达HepG2细胞株。将HepG2分为HepG2对照组,空载体HepG2组和PIG11高表达HepG2组分别培养,流式细胞术检测细胞凋亡。采用免疫共沉淀富集HepG2细胞中PIG11结合蛋白,切取PIG11结合蛋白条带,胶内酶解后进行电喷雾串联质谱得到肽序列标签,通过数据库查询蛋白。结果PIG11蛋白高表达组凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。串联质谱后数据库查询鉴定出11个蛋白,分别是热休克蛋白家族中的HSP60,KH型剪接调节蛋白(KSRP)、脑酸溶性蛋白BASP1、蛋白水解诱导因子(PIF/DCD)、Y染色体RNA结合蛋白、碳酸酐酶、白蛋白以及骨架蛋白中的波形蛋白、α、β-微管蛋白、肌动蛋白。结论PIG11蛋白高表达对HepG2具有诱导凋亡作用;初步鉴定出11个PIG11结合蛋白,为进一步阐明PIG11蛋白的作用机制提供线索。
- 胡蓉王晓娟王燕梁晓秋
- 关键词:PIG11HEPG2免疫共沉淀电喷雾串联质谱
- PIG11基因沉默与HepG2细胞凋亡关系的研究被引量:3
- 2010年
- 目的:构建人PIG11的miRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR,建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株,联合PIG11蛋白稳定高表达HepG2细胞株,探讨PIG11基因表达对HepG2细胞凋亡的影响。方法:构建miRNA干扰载体,通过脂质体转染HepG2细胞,建立PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞,与前期已建立的PIG11蛋白稳定高表达的HepG2细胞模型作对比,利用PI染色流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测Caspase-3蛋白、Caspase-9蛋白的表达情况。结果:成功构建人PIG11的miRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR,转染后获得PIG11基因沉默的HepG2细胞株。PI染色流式细胞仪检测结果显示,HepG2细胞、miR-PIG11-HepG2细胞、miR-HepG2细胞、pLXSN-PIG11-HepG2细胞和pLXSN-HepG2细胞的凋亡率分别为(5.72±0.81)%、(1.34±0.71)%、(5.10±0.40)%、(34.83±2.29)%和(5.34±0.60)%。PIG11高表达的pLXSN-PIG-11-HepG2细胞组凋亡率比其他组增高(P<0.01),PIG11低表达的miR-PIG11-HepG2细胞组凋亡率降低(P<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示,PIG11高表达的HepG2细胞Caspase-3及Caspase-9蛋白表达均上调(P<0.01),PIG11低表达的HepG2细胞Caspase-3及Caspase-9蛋白的表达下调(P<0.01)。结论:构建人PIG11的干扰载体成功获得PIG11蛋白稳定低表达的HepG2细胞株,PI染色流式细胞仪检测及Caspase-3的检测证实PIG11对HepG2细胞凋亡起负调控作用,Caspase-9检测显示PIG11诱导HepG2细胞凋亡可能通过线粒体途径。
- 王燕胡蓉梁晓秋王晓娟郭彩霞
- 关键词:PIG11转染细胞凋亡流式细胞术
- Wnt5a对Raw264.7//VMSC胆固醇蓄积的影响及其机制初探
- 目的:研究Wnt5a对荷脂细胞中胆固醇蓄积的影响,以及初步的机制探讨方法:用不同浓度的ox-LDL孵育Raw264.7以及VMSC不同时间,形成荷脂细胞模型,Western bloting检测荷脂细胞中Wnt5a表达的时...
- 胡蓉
- 关键词:WNT5A小凹蛋白氧化低密度脂蛋白胆固醇蓄积
- 文献传递
- Wnt5a与动脉粥样硬化的研究进展被引量:4
- 2012年
- Wnt5a是一种分泌型糖蛋白,参与生物体多种生命活动。研究显示wnt5a在apoE敲除小鼠的主动脉弓内膜处巨噬细胞聚集区域成强阳性,并且Wnt5a在人动脉粥样硬化斑块处高表达,提示Wnt5a在动脉粥样硬化发病过程中的重要作用。Wnt5a通过参与炎症反应、介导脂质转运以及脂质代谢等多个方面影响了动脉粥样硬化(As)的发生和发展。本文就近年有关Wnt5a与As关系研究的相关进展。
- 胡蓉廖端芳覃丽
- 关键词:WNT5A炎症反应动脉粥样硬化
- Wnt5a对荷脂平滑肌细胞中胆固醇蓄积的影响及相关机制
- 目的:探讨wnt5a对荷脂平滑肌细胞中胆固醇蓄积的影响及相关机制。方法:采用不同浓度的氧化低密度脂蛋白ox-LDL(0,25,50,75,100μg/ml)处理平滑肌细胞48小时,并选取100μg/mlox-LDL分别处...
- 覃丽姚海伦胡蓉凌红艳廖端芳
- 文献传递
- Wnt5a高表达抑制巨噬细胞中胆固醇的蓄积及分子机制
- 目的:探讨wnt5a高表达对巨噬细胞中胆固醇蓄积的影响及分子机制。方法:构建wnt5acDNA逆转录病毒表达载体,采用逆转录病毒感染的方法建立wnt5a稳定高表达的巨噬细胞株RAW264.7/wnt5a。100μg/ml...
- 覃丽姚海伦胡蓉顾洪丰廖端芳
- 文献传递