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盛力翔
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
湖南师范大学
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发文基金:
国家精品课程建设项目
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相关领域:
生物学
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合作作者
罗世锋
湖南师范大学
冯德峰
湖南师范大学
戴国
湖南师范大学
莫小阳
湖南师范大学
吴秀山
湖南师范大学
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盛力翔
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激光生物学报
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2013
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斑马鱼Fbxl5基因多克隆抗体的制备与检测
被引量:1
2013年
Fbxl5为F-box基因家族的一员,目前研究发现其与心脏的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。通过桥式PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Fbxl5基因片段,将其克隆入表达载体pET-28a,转化至大肠杆菌Rosseta中。用IPTG诱导Fbxl5重组质粒得到His-Fbxl5的融合蛋白。这个融合蛋白用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的His-Fbxl5融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。使用Western Blot检测,获得了Fbxl5原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Fbxl5多克隆抗体。随后检测了Fbxl5在斑马鱼胚胎和成体组织中蛋白的表达,通过基因芯片分析在Fbxl5-MO和Std胚胎样品的mRNA含量差异.所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Fbxl5多克隆抗体,为Fbxl5功能的进一步研究奠定了基础。
盛力翔
冯德峰
罗世锋
吴秀山
戴国
莫小阳
关键词:
融合蛋白
多克隆抗体
基因芯片
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