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地塞米松对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪的影响被引量：1: 2015年; 为研究地塞米松（DEx）对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP—PRRSV）感染仔猪造成的免疫系统和呼吸系统损伤的影响，本实验在断奶仔猪感染HP-PRRSVHuN4株前后，肌肉注射不同剂量的DEX。观察临床症状，检测其免疫系统相关指标的变化。结果显示：不同剂量DEX注射组实验猪均表现典型临床症状，虽然其外周血中的促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF—d水平降低，CD4＋CD8‘T淋巴细胞亚群比例较HuN4单独感染组升高，CD8＋CD4-T细胞比例较HuN4单独感染组降低，但DEX注射组仔猪体温始终维持在40℃-42℃，肺部、胸腺和淋巴组织病变加重，死亡率达到100％（10／10），而HuN4单独感染组仔猪死亡率仅为25％（1／4）。表明DEX对HP—PRRSV感染的断奶仔猪虽具有一定的抑制炎症反应作用，但加重了HP-PRRSV感染的不利影响。本研究为全面防控HP—PRRSV提供新的实验依据。; 佟杰王刚于颖张冲常亚飞刘永刚涂亚斌汤艳东姜成刚王淑杰蔡雪辉; 关键词：地塞米松促炎性细胞因子

猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达、纯化及抗原性分析被引量：6: 2016年; 为了获取大量的有良好抗原性的猪圆环病毒2型（PCV-2）重组Cap蛋白,用于PCV-2抗体检测试剂盒的研制,试验对PCV-2 ORF2全长基因进行扩增,构建重组表达质粒p ET-30a-Cap,转化E.coli BL21（DE3）,在SDS-PAGE分析基础上,结合Image J和Graphpad prism 5.0软件的分析,对重组菌E.coli BL21（p ET-30a-Cap）表达条件进行了优化,诱导产物纯化后,经SDS-PAGE分析及Western-blot鉴定其抗原性。结果表明：重组Cap蛋白的最佳表达条件是当菌体浓度（OD600值）达到1.0~1.5时,加入终浓度为0.2 mmol/L的IPTG,37℃恒温摇床175 r/min振荡培养5 h;纯化获得高纯度的重组Cap蛋白,且该蛋白具有良好的反应原性。说明表达的重组Cap蛋白具有良好的抗原性,能为检测PCV-2抗体的间接ELISA试剂盒的研制提供诊断抗原。; 杨莹莹刘永刚郝立沙王刚涂亚斌佟杰田丽红蔡雪辉; 关键词：PCV-2 ORF2 CAP蛋白抗原性

猪圆环病毒Ⅱ型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：2: 2015年; 为了快速准确检测猪圆环病毒Ⅱ型（PCV-2）并对病毒拷贝数进行定量,试验根据Gen Bank中PCV-2保守序列（登录号为FJ644559.1）设计1对特异性引物和Taq Man探针,制备标准品,建立PCV-2的荧光定量检测方法,并对临床样品进行检测。结果表明：该方法在1×10^1~1×10^8拷贝/μL的模板范围内具有良好的线性关系,相关系数可达0.999;敏感性是常规PCR方法的100倍;对猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）均为阴性,没有交叉反应;批内、批间重复试验变异系数均小于2.50%;在临床检测中,比常规PCR方法检测PCV-2的阳性检出率高出38%。说明试验成功建立了PCV-2 Taq Man荧光定量PCR检测方法,可用于临床检测PCV-2感染及对其拷贝数进行定量。; 郝立沙张璐佟杰于颖杨莹莹张武超涂亚斌蔡雪辉; 关键词：探针标准品拷贝数

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒对仔猪骨髓感染及损伤的初步研究被引量：2: 2014年; 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)对断奶仔猪骨髓的损伤,本研究采用HP-PRRSV HuN4株接种30日龄的PRRSV抗原及抗体阴性的健康断奶仔猪,并在病毒感染后10 d检测仔猪骨髓内病毒感染及细胞凋亡情况。PCR和间接免疫荧光试验结果显示HuN4株感染仔猪骨髓内存在病毒;流式细胞计数分析和TUNEL法检测结果显示病毒感染仔猪的骨髓内出现大量的凋亡细胞。本实验结果表明,HP-PRRSV能够感染仔猪骨髓,引起仔猪骨髓损伤并导致机体免疫抑制。本研究为进一步探索HP-PRRSV感染诱导仔猪中枢免疫器官的损伤机制奠定了基础。; 李莉王刚刘永刚李爱东陶冶佟杰于颖涂亚斌王淑杰孙明霞姜成刚蔡雪辉; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒骨髓细胞凋亡

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佟杰