郝强
- 作品数：17 被引量：25H指数：3
- 供职机构：第四军医大学药学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- T7噬菌体展示人肝癌cDNA文库筛选人CD8^+T淋巴细胞特异结合分子被引量：2
- 2017年
- 目的:利用噬菌体表面展示技术从人肝癌T7 cDNA文库中筛选出能与人CD8^+T淋巴细胞特异结合的蛋白分子。方法:以人CD8^+T淋巴细胞为筛选靶标,对人肝癌T7 cDNA噬菌体肽库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"生物淘选与富集,ELISA鉴定特异结合的噬菌体单克隆;对获得的阳性克隆裂解液进行PCR扩增及DNA测序,然后进行生物信息学分析,确定所编码的结合蛋白。结果:经过4轮筛选,结合人CD8^+T淋巴细胞的噬菌体克隆得到富集,通过测序与同源性比对分析获得17个特异性结合的多肽序列;生物信息学分析发现阳性噬菌体克隆的同源蛋白中,可能与肝癌免疫逃逸相关的分子有Unc-51样自噬活化激酶1(ULK1)、一般受体磷酸肌醇相关支架蛋白1(GRASP)、中间α球蛋白抑制因子H1(ITIH1)、富含亮氨酸重复8家族成员D(LRRC8D)和CD164等。结论:从人肝癌T7 cDNA噬菌体肽库中筛选获得了能与人CD8^+T淋巴细胞特异结合的分子,为阐明人肝癌发生发展过程中肿瘤免疫逃逸相关机制奠定了基础。
- 高凯丽李维娜薛晓畅张存郝强张伟张伟
- 关键词：噬菌体展示技术肝癌CD8^+T淋巴细胞
- 《现代生物技术药物》教学的优化探索
- 2017年
- 目的探讨《现代生物技术药物》教学内容和模式的改进方法。方法突出课程的"时效性",采用新的"自探共研"的教学模式,加强实验课教学。结果上述方法优化了教学内容,加强了教学互动,提高学生的实践能力。结论通过对《现代生物技术药物》现有教学内容和模式的优化,能够解决教学中存在的问题,从而提高该课程教学质量。
- 郝强张伟薛晓畅张存李维娜张英起
- 关键词：教学方法实验课教学教学体会
- 重组人白细胞介素15融合蛋白的表达、纯化及免疫原性检测被引量：2
- 2014年
- 目的:以白细胞介素15(IL-15)为靶点,研制类风湿性关节炎免疫治疗蛋白疫苗。方法:将N端融合破伤风类毒素(TT)表位的人IL-15基因克隆至带有His标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,获得重组人TT-IL-15融合蛋白(简称rtIL-15);目的蛋白经镍柱亲和层析纯化后,用Western印迹和HPLC进行鉴定;将rtIL-15与氢氧化铝佐剂混合,免疫BALB/c小鼠,检测疫苗的免疫原性。结果:双酶切鉴定和核苷酸序列测定结果表明重组融合表达质粒pQE-30-TT-IL-15构建正确,重组蛋白的表达量达到菌体总蛋白的20%,主要以包涵体形式表达,经过纯化、复性后,目的蛋白纯度达到95%以上;蛋白疫苗免疫小鼠后,能诱导高滴度的特异性的IL-15抗体。结论:在大肠杆菌中表达了重组人IL-15融合蛋白疫苗,并具有良好的免疫原性。
- 李佳林张存高源郝强王舒宁张伟张伟
- 关键词：疫苗原核表达类风湿性关节炎
- Reciprocal repression between FOXP3 and NF-γB and theimplication in gastric cancer development
- Controversial roles of FOXP3 in different cancers have been reported previously, while itsrole in gastric canc...
- 郝强
- 关键词：FOXP3NF-ΚB
- 文献传递
- 应用酵母双杂交系统筛选Foxp3△2相互作用蛋白被引量：1
- 2010年
- 目的：应用酵母双杂交系统从人外周血白细胞cDNA文库中筛选与转录因子Foxp3相互作用的蛋白，为进一步研究Foxp3的转录调控机制奠定基础。方法：首先构建pG—BKT7／-Foxp3△2酵母双杂交诱饵载体，转化AH109酵母细胞，检测其毒性及自激活作用；然后将诱饵质粒与人外周血白细胞eDNA文库共转AH109酵母细胞，筛选了与Foxp3△2存在相互作用的蛋白。结果：成功构建了pGBKT7-Foxp3△2酵母表达载体，经转染AHl09酵母细胞，无有毒性，无自激活作用。获得了40个阳性克隆，经生物信息学分析，其中9个具有开放读框。结论：应用酵母双杂交技术筛选出一组可与Foxp3△2相互作用的候选蛋白，为进一步研究Foxp3△2功能奠定了基础。
- 徐玉金姜昌丽张存秦鑫李萌郝强李维娜张伟张英起
- 关键词：酵母双杂交相互作用蛋白
- 抗人白细胞介素15中和抗体识别抗原表位的噬菌体肽库筛选与鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的:用噬菌体呈现随机七肽库筛选能与抗人白细胞介素15(h IL-15)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并初步鉴定其免疫原性。方法:以抗h IL-15中和抗体为靶分子,用生物淘洗法从噬菌体呈现线性七肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,用噬菌体ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;化学合成筛选得到的多肽,并与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联免疫BALB/c小鼠,检测其免疫原性。结果:经过3轮体外筛选后随机挑取50个阳性噬菌体克隆,ELISA检测结果显示其中15个克隆与抗h IL-15抗体有较强的结合能力,DNA测序结果得到的结构相似群为MTPFWQK、MSPFNQK、MIPYWQK和MIPFHQK;竞争性ELISA结果显示4个序列均能与IL-15竞争性地结合抗IL-15单抗;小鼠免疫实验结果显示4组多肽均能诱导IL-15特异性免疫反应。结论:筛选得到能与抗h IL-15中和抗体特异性结合,且具有免疫原性的模拟抗原7肽序列,为进一步开发h IL-15相关的多肽疫苗提供了依据。
- 高源郝强王舒宁张伟张伟
- 关键词：噬菌体随机肽库白细胞介素15单克隆抗体表位
- 新基因C1orf63功能的初步研究
- 2011年
- 目的检测C1orf63基因在肝癌和癌旁组织中的定位,以及C1orf63在多种人肝癌细胞系和人胃癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平;检测干涉C1orf63后对人胃癌细胞MKN28的细胞周期的影响。方法免疫组化染色法检测C1orf63基因在组织中的定位;Real-time PCR和Western blot分别检测C1orf63基因在细胞中的表达;脂质体转染法将干涉片段转染至MKN28细胞中,Real-time PCR和Western blot法筛选有效干涉片段;流式细胞术检测C1orf63干涉后对MKN28细胞的细胞周期的影响。结果 C1orf63在肝癌和癌旁组织细胞中都有胞浆表达,在MKN28细胞中表达量较高,在MKN45细胞中表达量较低;成功筛选出C1orf63基因的有效干涉片段;C1orf63干涉后,胃癌细胞MKN28发生G1期阻滞,经统计学分析,C1orf63干涉后MKN28细胞增殖指数降低(P<0.05)。结论 C1orf63在人肝癌和癌旁组织细胞胞浆中都有表达,在MKN28细胞中表达量最高;干涉C1orf63基因后,可使MKN28细胞发生G1期阻滞,为该基因功能的后续研究奠定了基础。
- 何颖郝强李维娜舒震张阔金亮亮张伟张英起
- 关键词：MKN28RNAI细胞周期
- 雌激素受体α抑制乳腺癌细胞转移及其机制研究
- 在所有乳腺癌中,雌激素受体α（ERα）阳性的肿瘤大约占70%。大量研究表明,通过与雌激素结合,ERα能够促进乳腺癌细胞增殖。因此,通过靶向ERα抑制肿瘤细胞增殖的内分泌治疗被广泛用于治疗ERα阳性的乳腺癌。然而越来越多的...
- 高源张存王昭维郝强李维娜张伟张英起
- 关键词：乳腺癌内分泌治疗雌激素受体Α细胞转移细胞增殖
- 文献传递
- 生物制药学课程思政教学改革探索与实践被引量：4
- 2022年
- 生物制药学是药学专业本科生的一门专业必修课程,是贯穿于药学、生物技术专业必修课整个教学环节中重要的一环。课程思政是指高校在教学过程中充分挖掘各门课程的思想政治教育资源,发挥各门课程的思想政治教育功能,从而实现全员、全过程、全方位育人。课程思政不是一门课,而是一种育人理念,也是一种教育模式。根据生物制药学的特点和人才培养的需求,本文积极探索了如何将思政内容融入生物制药学课程中。通过提高课程思政的手段和方法,完善教学监督体系及教学团队的建设,提高了课程思政质量,极大地调动了学生的积极性和主动性,激发了学生的创造力,取得了良好的教学效果。
- 顾锦涛张阔张旺倩王舒宁张伟张英起郝强
- 关键词：思想教育中国故事
- 自探共研的教学模式在《生物技术概论》本科教学中的应用被引量：6
- 2015年
- 通过对生物技术专业学生《生物技术概论》课程"自探共研"课堂教学模式的探索,我们改革了传统课堂教学模式,指导学生在自主学习的基础上进行自主探究与合作研讨。通过营造全新的课堂模式,确立了学生的主体地位,提高了课堂的教学效率,更有利于学生系统地掌握知识、培养技能、形成创新意识,实现了高等教育中创新人才的培养目标。
- 张伟郝强张存薛晓畅李维娜张英起
- 关键词：高等教育教学改革
