陈晓燕
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
- 供职机构：温州医学院眼视光学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MicroRNA-34a抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的研究被引量：4
- 2011年
- 该文采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法将microRNA-34a转染入体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5。应用BrdU法、细胞平板克隆形成实验检测转染microRNA-34a后对细胞增殖的影响,发现M23和SP6.5细胞增殖明显被抑制(P<0.01);并利用流式细胞技术检测转染microRNA-34a后细胞周期的变化,发现细胞停滞于G_1期;同时检测转染microRNA-34a后细胞caspase-3/7酶的活性,发现无明显改变。另外,Real-time PCR检测表明阿霉素处理后M23、SP6.5细胞中microRNA-34a的表达量上调(P<0.01)。用阿霉素处理转染microRNA-34a的M23、SP6.5细胞,检测caspase-3/7酶活性的改变,发现caspase-3/7酶活性显著增加(P<0.01)。本研究表明microRNA-34a通过抑制细胞周期来抑制体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,能够增加细胞对阿霉素的敏感性,但不直接诱导细胞凋亡。
- 王教陈林华周仲楼陈晓燕
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤增殖细胞周期阿霉素
- 甲状腺乳头状癌钠碘同向转运体基因启动子区域CpG岛异常甲基化状态检测及其意义被引量：2
- 2009年
- 目的 通过检测甲状腺乳头状癌中钠碘同向转运体(NIS)基因的启动子区域甲基化状态及其与各项临床指标之间的关系,探讨NIS基因甲基化在甲状腺乳头状癌发病过程中的地位、作用和相关机制.方法 取2007年5～7月手术切除的甲状腺乳头状癌及正常组织标本各11份,液氮保存.针对NIS-L区域设计新的甲基化特异PCR(MSP)引物,对所有亚硫酸氢钠修饰后的甲状腺癌及对照组织标本DNA进行MSP检测,比较肿瘤和对照甲状腺组织的NIS-L甲基化状态,分析其与有关临床指标之间的相关性.结果 实验发现11例甲状腺癌中NIS-L区域CpG岛甲基化率达81.8%(9/11),与肿瘤直径存在相关性,与年龄、性别、AJCC分期、淋巴结转移情况、多灶性等临床指标无相关性;相应对照组织中NIS-L甲基化率为36.4%(4/11),与所有临床指标无相关性.结论 甲状腺乳头状癌组织中NIS-L区域CpG岛甲基化率异常增高,且与肿瘤直径存在相关性.NIS-L与其它NIS表达调控因素的关系有待进一步研究.
- 殷凯张筱骅王瓯晨闫东升陈晓燕李权
- 关键词：甲状腺乳头状癌启动子区域CPG岛甲基化甲基化状态肿瘤直径钠碘同向转运体
- 外源性视黄酸对人巩膜成纤维细胞MMP-2及TIMP-2 mRNA水平的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 研究外源性视黄酸（RA）对人巩膜成纤维细胞（HSF）生长的调控,以及对基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP-2）mRNA水平的影响.方法 体外培养HSF,取第5～7代细胞,经10^-10、10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol/L浓度的RA作用6 d后,进行细胞计数,观察RA对HSF生长的调控情况;用Real-time PCR检测RA作用后HSF中MMP-2、TIMP-2的mRNA水平.对不同浓度组问比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 RA作用HSF 6 d后,浓度≥10^-9 mol/L RA组对细胞的生长抑制作用差异均有统计学意义（P〈0.05）,随着RA浓度增高,细胞数量逐渐减少,抑制作用呈剂量效应.RA作用6 d后,RA≥10^-8 mol/L时,HSF中MMP-2 mRNA水平有升高趋势,但各组差异无统计学意义（P〉0.05）;RA≥10^-9 mol/L时,TIMP-2 mRNA水平下降（P〈0.05）.结论 RA能够抑制HSF的生长,并可能通过调控TIMP-2的mRNA水平,使巩膜主动重塑.
- 陈林华王教陈晓燕鹿润霞周翔天
- 关键词：维甲酸巩膜基质金属蛋白酶2
- microRNA-449抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖和迁移被引量：4
- 2009年
- 目的探讨脉络膜黑色素瘤细胞M21转染microRNA-449后对增殖和迁移的影响,及其分子机制的初探。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法,将microRNA-449转染入体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞。应用MTS法检测转染后细胞增殖的影响;Transwell小室检测细胞迁移的变化;Western blotting检测c-Met蛋白的表达。结果转染microRNA-449后,脉络膜黑色素瘤细胞增殖明显被抑制(P<0.01),迁移亦受抑制(P<0.01),c-Met表达量下降。结论转染microRNA-449对体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞的增殖和迁移具有抑制作用,microRNA-449可下调c-Met蛋白的表达水平。
- 王教陈晓燕瞿佳
- 关键词：微RNAS基因疗法增生
- microRNA-206对人横纹肌肉瘤细胞增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究microRNA-206在人横纹肌肉瘤细胞A673和A204中的表达以及对细胞增殖的影响。方法Northern blotting检测正常肌肉组织与人横纹肌肉瘤细胞中microRNA-206表达水平的差异,MTS法检测转染microRNA-206后对细胞增殖的影响。Western blotting检测microRNA-206后对细胞中蛋白水平的影响。结果Northern blotting结果显示,microRNA-206在正常肌肉组织中高表达,在横纹肌肉瘤细胞A673和A204中不表达;MTS结果表明转染microRNA-206后,横纹肌肉瘤细胞的数目明显减少,microRNA能够明显下调人横纹肌肉瘤细胞中p-ERK的表达。结论microRNA-206通过ERK信号传导通路抑制横纹肌肉瘤细胞的增殖。
- 陈晓燕王教王瓯晨
- 关键词：横纹肌肉瘤微RNAS基因疗法增生转染
- 表皮生长因子对人眼Müller细胞增生迁移的影响及作用机制
- 陈春丽申焕君张宗端周仲楼陈晓燕闫东升宋宗明
- 人眼巩膜成纤维细胞中视黄酸受体的分布及其对巩膜成纤维细胞的生长调控被引量：12
- 2007年
- 目的研究正常人眼巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达，进一步研究视黄酸对人巩膜成纤维细胞的生长调控作用，从而阐明其和近视发生发展的关系。方法应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞，取3～5代生长良好的细胞，运用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测培养的巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达；在培养液中分别加入0．01、0．10、1．00、10．00和100．00nmol／L的视黄酸，6d后进行细胞计数。每株细胞重复3次，共用3株细胞，观察视黄酸对巩膜成纤维细胞的生长调控作用。结果培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型，平均分裂时间为2～3d左右，细胞生长旺盛，近融合时细胞成规则排列的纺锤型。RT—PCR提示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达所有的视黄酸受体亚型。视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长，对细胞生长的抑制作用呈明显的剂量效应关系，RA浓度≥0．10nmol／L时，与无RA的对照组相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论所有的视黄酸受体亚型在人巩膜成纤维细胞上均有分布，视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长。
- 闫东升周翔天陈晓燕吕帆王教胡诞宁瞿佳
- 关键词：巩膜成纤维细胞受体维甲酸近视
- 两种微量RNA扩增方法的比较研究被引量：2
- 2011年
- 本研究通过比较体外转录和单引物扩增这两种扩增微量RNA的不同方法,以寻找一种高效的扩增方法。我们用两种不同方法分别扩增小鼠大脑全皮层及第五皮层细胞的RNA,扩增的RNA合成cDNA后进行荧光定量PCR实验,根据PCR结果比较两种不同扩增方法的效率。WT-ovation扩增RNA的效率约为IVT效率的2.8倍;IVT方法扩增后,基因D-C值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均存在正线性相关(P<0.05),即引物距离mRNA的3'端越近、mRNA越短,基因D-Ct值越低。而WT-ovation方法扩增后,基因D-Ct值与引物距离mRNA 3'端的长度及mRNA的长度均不存在统计学相关性。与IVT方法相比,WT-ovation方法效率更高,扩增时受影响因素较少、更稳定。
- 陈林华赵月娥陈晓燕高英
- 关键词：定量PCR
- 表皮生长因子对人眼Müller细胞增生迁移的影响及其作用机制被引量：1
- 2011年
- 背景研究证实表皮生长因子（EGF）可促进鼠视网膜Müller细胞的增生和迁移，但EGF能否促进人眼Müller细胞的增生迁移尚未见报道。目的探讨人眼Müller细胞能否自身表达和分泌EGF及EGF对Müller细胞增生迁移的影响及其作用机制。方法同一代人永生株Müller细胞系MIO—M1细胞用高糖DMEM进行培养，利用MTT比色法观察不同质量浓度EGF作用24、48、72h，不同浓度CoCl2作用12h和24h，加入导致Müller细胞半数致死量的CoCl，浓度前2h加入不同质量浓度EGF的Müller细胞增生情况；Transwell小室观察正常及CoCl2缺氧条件下用不同质量浓度EGF作用24、48、72h后Müller细胞的迁移情况；采用ELISA法观察Müller细胞表达和分泌EGF的情况；通过Westernblot法检测体外不同条件培养下EGF对ERK1/2及Akt信号转导通路的作用。结果正常培养条件下，不同质量浓度的EGF作用后Mfiller细胞的吸光度（A570）值的总体比较差异有统计学意义（F=123．765，P=0．000），100mg／LEGF促Müller细胞增生作用最强，为对照组的1．6倍，10mg／LEGF促Müller细胞迁移的作用最强，为对照组的4．5倍。各EGF组Müller细胞的A570，值均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈O．01）。缺氧条件下培养，Müller细胞半数致死量的CoCl2浓度为600nmol／L，提前2h加入10～100阻g／LEGF后，EGF对抗缺氧所致Muller细胞的损伤作用最明显。700nmol／LCoCl2致Müller细胞损伤80％时其自身低分泌7．8ng／LEGF。10～100mg／LEGF作用Müller细胞促增生迁移作用信号最明显，600nmol／ LCoCl2作用Müller细胞24h后ERKl／2及Akt信号强度减弱，提前2h加入外源性EGF后，ERK1／2及Akt两条信号通路最明显。结论EGF能以剂量依赖的方式促进体外培养的Müller细胞增生及迁移。正常培养条件下的Müller细胞自身不表达，缺氧条件下Müller细胞自身可少量分泌EGF。EGF可能通过ERK1／2及Akt信号转
- 陈春丽申焕君张宗端周仲楼陈晓燕闫东升宋宗明
- 关键词：表皮生长因子MÜLLER细胞增生迁移信号传导通路增生性玻璃体视网膜病变
- MicroRNA-133b抑制人横纹肌肉瘤细胞增殖与迁移的研究被引量：1
- 2012年
- 该研究首先通过Real-time RT-PCR检测发现,microRNA-133b在人横纹肌肉瘤细胞RD和A204中的表达量比正常肌肉组织中的表达量明显降低,再通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-133b转染入横纹肌肉瘤细胞RD和A204细胞中,并应用MTS法、Transwell法研究发现,microRNA-133b可明显抑制RD和A204细胞的增殖与迁移;采用Western blot法检测转染后细胞内与增殖、迁移及细胞周期相关的蛋白表达,发现microRNA-133b能下调RD和A204细胞中的LIMand SH3 protein 1(LASP1)、c-MET、p-MET、p-AKT、p-ERK1/2、p-Rb的表达水平,并降低RD和A204细胞中细胞周期蛋白CDK4和CDK6表达量。该研究表明,microRNA-133b是通过下调LASP1、c-MET和p-MET的表达水平,影响c-MET下游信号分子p-AKT、p-ERK1/2的表达水平,同时还下调细胞周期相关蛋白如CDK4、CDK6、p-Rb等的表达,从而影响RD和A204细胞的增殖与迁移。
- 王丽花陈通克姚莎莎陈晓燕王教
- 关键词：横纹肌肉瘤增殖迁移细胞周期
