王教
- 作品数：15 被引量：48H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
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- 苦参碱对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的探讨苦参碱对人宫颈癌细胞株Hela细胞体外增殖的抑制作用。方法选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养,以0.25～4.0mg/ml的苦参碱分别处理Hela细胞24～72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察。结果苦参碱对Hela细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在苦参碱作用后,细胞凋亡率增加;透射电镜观察发现部分细胞发生凋亡早期改变。结论苦参碱对人宫颈癌Hela细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其机制之一。
- 滕小玲金畅周仲楼王教付小莹
- 关键词：苦参碱宫颈癌凋亡
- 碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β对人巩膜成纤维细胞的生长调控研究被引量：12
- 2008年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob-last growth factor,bFGF)和转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)对人巩膜成纤维细胞的生长调控,进一步明确bFGF和TGF-β影响近视的作用部位及可能机制。方法取角膜移植后的3只健康供体眼球,分离培养巩膜成纤维细胞并建立细胞系,取第3～5代生长良好的细胞,在培养液中分别加入1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml、300ng/ml的bFGF以及0.1ng/ml、0.3ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml的TGF-β,两组均设空白对照。6d后进行细胞计数,选用t-test进行统计分析。每株细胞重复3次,共重复3株细胞,观察bFGF和TGF-β对巩膜成纤维细胞的生长调控作用。结果bFGF能明显促进人巩膜成纤维细胞的生长,随浓度增加呈明显剂量效应关系。bFGF大于10ng/ml时(包括10ng/ml),和无bFGF的正常培养液比较,差异具有显著性(P<0.05)。TGF-β能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长,抑制细胞生长的作用亦呈明显的剂量效应关系。TGF-β大于0.3ng/ml时(包括0.3ng/ml),和无TGF-β的正常培养液比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论本实验结果显示,bFGF对人巩膜成纤维细胞生长具有明显促进作用,而TGF-β则表现为明显抑制作用。进一步证实外源性bFGF和TGF-β可能作用于巩膜组织,并通过调控巩膜成纤维细胞的生长及巩膜细胞外基质合成代谢单独或协同作用参与巩膜重塑过程。
- 傅亚娜周翔天付小莹王教吕帆胡诞宁瞿佳
- 关键词：巩膜成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子转化生长因子-Β近视
- p85a基因对小鼠大脑皮层投射神经元迁移的影响被引量：3
- 2014年
- Pi3k/Akt信号通路是近年来发现的参与细胞增殖、调控的重要通路,Pi3k激活可介导多种细胞功能,Pi3k由p85a和p110构成。该研究通过干扰p85a基因的表达,探讨其在小鼠大脑皮层投射神经元迁移中的作用。首先,构建p85a基因的对照质粒(scramble)、siRNA质粒(sip85a-1、sip85a-2)和过表达质粒(OEp85a);接着转染N2a细胞,48 h后,用定量PCR方法检测p85a基因mRNA的表达情况。随后,将sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒分别转入小鼠大脑,4 d后,借助免疫荧光方法检测皮层神经元的迁移情况。定量PCR结果显示:与对照相比,转染sip85a-1、sip85a-2均能显著降低N2a细胞中p85a基因的mRNA表达,抑制效率约为40%(P<0.05);而转染OEp85a质粒后,能显著增加p85a基因mRNA的表达,约为对照组的12倍(P<0.01)。胚胎电转结果中,各区EGFP阳性神经元数目定量分析显示,sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒均能显著抑制神经元的迁移(P<0.05)。大脑发育阶段中,p85a基因在适当范围内,对平衡神经元迁移过程中起着重要作用。
- 陈林华曹华腾涂晓萌王教李雪
- 关键词：迁移定量PCR
- 人眼巩膜成纤维细胞中视黄酸受体的分布及其对巩膜成纤维细胞的生长调控被引量：12
- 2007年
- 目的研究正常人眼巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达，进一步研究视黄酸对人巩膜成纤维细胞的生长调控作用，从而阐明其和近视发生发展的关系。方法应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞，取3～5代生长良好的细胞，运用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测培养的巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达；在培养液中分别加入0．01、0．10、1．00、10．00和100．00nmol／L的视黄酸，6d后进行细胞计数。每株细胞重复3次，共用3株细胞，观察视黄酸对巩膜成纤维细胞的生长调控作用。结果培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型，平均分裂时间为2～3d左右，细胞生长旺盛，近融合时细胞成规则排列的纺锤型。RT—PCR提示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达所有的视黄酸受体亚型。视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长，对细胞生长的抑制作用呈明显的剂量效应关系，RA浓度≥0．10nmol／L时，与无RA的对照组相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论所有的视黄酸受体亚型在人巩膜成纤维细胞上均有分布，视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长。
- 闫东升周翔天陈晓燕吕帆王教胡诞宁瞿佳
- 关键词：巩膜成纤维细胞受体维甲酸近视
- microRNA-449抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖和迁移被引量：4
- 2009年
- 目的探讨脉络膜黑色素瘤细胞M21转染microRNA-449后对增殖和迁移的影响,及其分子机制的初探。方法采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法,将microRNA-449转染入体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞。应用MTS法检测转染后细胞增殖的影响;Transwell小室检测细胞迁移的变化;Western blotting检测c-Met蛋白的表达。结果转染microRNA-449后,脉络膜黑色素瘤细胞增殖明显被抑制(P<0.01),迁移亦受抑制(P<0.01),c-Met表达量下降。结论转染microRNA-449对体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞的增殖和迁移具有抑制作用,microRNA-449可下调c-Met蛋白的表达水平。
- 王教陈晓燕瞿佳
- 关键词：微RNAS基因疗法增生
- microRNA-206对人横纹肌肉瘤细胞增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究microRNA-206在人横纹肌肉瘤细胞A673和A204中的表达以及对细胞增殖的影响。方法Northern blotting检测正常肌肉组织与人横纹肌肉瘤细胞中microRNA-206表达水平的差异,MTS法检测转染microRNA-206后对细胞增殖的影响。Western blotting检测microRNA-206后对细胞中蛋白水平的影响。结果Northern blotting结果显示,microRNA-206在正常肌肉组织中高表达,在横纹肌肉瘤细胞A673和A204中不表达;MTS结果表明转染microRNA-206后,横纹肌肉瘤细胞的数目明显减少,microRNA能够明显下调人横纹肌肉瘤细胞中p-ERK的表达。结论microRNA-206通过ERK信号传导通路抑制横纹肌肉瘤细胞的增殖。
- 陈晓燕王教王瓯晨
- 关键词：横纹肌肉瘤微RNAS基因疗法增生转染
- MicroRNA-34a抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的研究被引量：4
- 2011年
- 该文采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法将microRNA-34a转染入体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5。应用BrdU法、细胞平板克隆形成实验检测转染microRNA-34a后对细胞增殖的影响,发现M23和SP6.5细胞增殖明显被抑制(P<0.01);并利用流式细胞技术检测转染microRNA-34a后细胞周期的变化,发现细胞停滞于G_1期;同时检测转染microRNA-34a后细胞caspase-3/7酶的活性,发现无明显改变。另外,Real-time PCR检测表明阿霉素处理后M23、SP6.5细胞中microRNA-34a的表达量上调(P<0.01)。用阿霉素处理转染microRNA-34a的M23、SP6.5细胞,检测caspase-3/7酶活性的改变,发现caspase-3/7酶活性显著增加(P<0.01)。本研究表明microRNA-34a通过抑制细胞周期来抑制体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,能够增加细胞对阿霉素的敏感性,但不直接诱导细胞凋亡。
- 王教陈林华周仲楼陈晓燕
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤增殖细胞周期阿霉素
- MicroRNA-34a在人眼葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达及功能研究
- 目的：
本研究着重探讨miR-34a在人眼葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达、功能以及分子机制研究，为葡萄膜黑色素瘤的诊断和治疗提供新的思路与理论基础。
方法：
体外培养人葡萄膜黑色素瘤细胞株M23和SP6．5...
- 王教
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤蛋白表达细胞迁移
- 文献传递
- 外源性视黄酸对人巩膜成纤维细胞MMP-2及TIMP-2 mRNA水平的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 研究外源性视黄酸（RA）对人巩膜成纤维细胞（HSF）生长的调控,以及对基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP-2）mRNA水平的影响.方法 体外培养HSF,取第5～7代细胞,经10^-10、10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol/L浓度的RA作用6 d后,进行细胞计数,观察RA对HSF生长的调控情况;用Real-time PCR检测RA作用后HSF中MMP-2、TIMP-2的mRNA水平.对不同浓度组问比较采用单因素方差分析,两两比较采用t检验.结果 RA作用HSF 6 d后,浓度≥10^-9 mol/L RA组对细胞的生长抑制作用差异均有统计学意义（P〈0.05）,随着RA浓度增高,细胞数量逐渐减少,抑制作用呈剂量效应.RA作用6 d后,RA≥10^-8 mol/L时,HSF中MMP-2 mRNA水平有升高趋势,但各组差异无统计学意义（P〉0.05）;RA≥10^-9 mol/L时,TIMP-2 mRNA水平下降（P〈0.05）.结论 RA能够抑制HSF的生长,并可能通过调控TIMP-2的mRNA水平,使巩膜主动重塑.
- 陈林华王教陈晓燕鹿润霞周翔天
- 关键词：维甲酸巩膜基质金属蛋白酶2
- MicroRNA-1调控人结肠癌细胞周期及其机制的研究被引量：2
- 2017年
- 该研究通过阳离子脂质体介导的方法将microRNA-1(miR-1)转染入人结肠癌细胞HT-29和HCT 116,使其过表达。应用MTS法、克隆形成实验、流式细胞术检测转染后细胞增殖及细胞周期的变化情况,结果发现,miR-1能使HT-29和HCT 116细胞周期滞留在G1期,显著抑制细胞的增殖;通过靶基因预测及荧光素酶分析法预测并确定CCND1(cyclin D1)和CDK6(cyclin dependent kinases 6)是miR-1作用的靶基因。采用Western blot法检测细胞内相关蛋白质表达水平,结果发现,miR-1能下调HT-29和HCT 116中细胞周期相关蛋白CDK2、CDK4、p-Rb(retinoblastoma gene)、E2F1(E2F transcription factor 1)、p-Cdc2(cell division cycle 2)等蛋白质水平。通过人结肠癌裸鼠动物模型检测miR-1对结肠癌细胞体内成瘤能力的改变情况,研究发现,miR-1能在体显著抑制人结肠癌细胞增殖能力。该研究表明,miR-1通过下调靶基因cyclin D1、CDK6的表达,并影响细胞周期相关蛋白CDK2、CDK4的水平,下调了决定细胞周期进程的关键蛋白Rb及Cdc2的磷酸化水平,同时也降低了E2F1蛋白质水平,使细胞周期滞留在G1期,从而抑制了细胞增殖。
- 陈通克陈林华王教王丽花
- 关键词：MICRORNA-1人结肠癌增殖细胞周期
