张晓璐
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：沈阳医学院附属中心医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅基金沈阳市科学技术计划项目辽宁省自然科学基金更多>>
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- 组蛋白去乙酰化酶SIRT1经Toll样受体4途径对巨噬细胞凋亡的调控被引量：1
- 2020年
- 目的观察组蛋白去乙酰化酶——人沉默调节蛋白(SIRT1)经组蛋白表观遗传学调控细胞凋亡的具体机制和途径,为动脉粥样硬化防治提出新思路。方法选用假手术组大鼠作为对照,观察颈动脉损伤组大鼠颈动脉组织凋亡、SIRT1、组蛋白3(H3)、H3赖氨酸9位点乙酰化(H3K9Ac)及炎症因子蛋白表达;选用不同条件干预的氧化低密度脂蛋白(oxLDL)暴露巨噬细胞为研究对象,采用细胞功能获得或缺失方法,观察巨噬细胞凋亡、SIRT1、H3、H3K9Ac及炎症因子蛋白表达。结果与假手术组大鼠和对照组巨噬细胞比较,颈动脉损伤组大鼠颈动脉组织和oxLDL暴露巨噬细胞SIRT1蛋白表达减少,H3K9Ac/H3比值增加,Toll样受体4(TLR4)、白介素1β(IL-1β)蛋白表达增加且伴有凋亡增加(P<0.01);与给予SP600125(JNK通路拮抗剂)、IAXO-102(TLR4通路拮抗剂)、LY294002(PI3K通路拮抗剂)干预的巨噬细胞比较,IAXO-102干预后,SIRT1减少现象被逆转(P<0.01);给予SIRT1兴奋剂后,巨噬细胞凋亡减轻伴有H3K9Ac/H3比值减少,TLR4、IL-1β蛋白表达减少(P<0.01);给予SIRT1抑制剂后,巨噬细胞凋亡加重伴有H3K9Ac/H3比值增加,TLR4、IL-1β蛋白表达增加(P<0.01)。结论组蛋白乙酰化表观遗传学参与细胞凋亡的调控,进而与动脉粥样硬化发生发展密切相关。组蛋白去乙酰化酶SIRT1减少,H3乙酰化增加,恶化细胞凋亡,促发动脉粥样硬化发生发展,这个过程必经TLR4途径实现。
- 张晓璐王丽莉陈凯明娄宪芝张曼
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶巨噬细胞凋亡
- 微小RNA-181减轻氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤的作用及机制被引量：7
- 2017年
- 目的观察微小RNA-181和输入蛋白α3在氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的血管内皮细胞损伤模型中的表达水平，并探讨微小RNA-181对血管内皮细胞损伤的作用及机制。方法培养人静脉血管内皮细胞株CRL-1730，并通过加入ox-LDL构建血管内皮细胞损伤模型。将细胞分为对照组（加入双蒸水）、低剂量组（加入10 μg/ml ox-LDL）和高剂量组（加入20 μg/ml ox-LDL），分别检测各组细胞活性及白细胞介素-6（IL-6）、微小RNA-181、输入蛋白α3和核转录因子-κB（NF-κB）的mRNA和蛋白表达水平。另外，将低剂量组细胞进一步分为微小RNA-181模拟物组（转染微小RNA-181模拟物）和模拟物对照组（转染微小RNA-181模拟物对照），观察微小RNA-181过表达对ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤模型中细胞活性及微小RNA-181、输入蛋白α3和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平的影响。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞活性；分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞中IL-6、微小RNA-181、输入蛋白α3和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平。结果（1）低剂量组和高剂量组的细胞活性分别为0.207±0.012和0.204±0.007，均低于对照组的0.323±0.018（P均〈0.01）。低剂量组和高剂量组IL-6的mRNA相对表达水平分别为1.24±0.16和1.36±0.23，均高于对照组的0.22±0.03（P均〈0.01）。低剂量组和高剂量组微小RNA-181的mRNA相对表达水平分别为0.91±0.11和0.88±0.07，均低于对照组的2.20±0.13（P均〈0.01）。低剂量组和高剂量组输入蛋白α3的mRNA相对表达水平分别是1.23±0.22和1.67±0.34，均高于对照组的0.44±0.06（P均〈0.01）。低剂量组和高剂量组NF-κB的mRNA相对表达水平分别是0.55±0.03和0.41±0.11，均高于对照组的0.11±0.04（P均〈0.01）。低剂量组和高剂量组输入蛋白α3的蛋白相对表达水平分别是1.44±0.23与1.31±0.22，均高于对照组的0.29±0.08（P�
- 王宁宁孙晓张晓璐娄琳陈凯明李卉唐亮王文刚张曼
- 关键词：内皮细胞炎症NF-ΚB
- siRNA技术沉默SOCS3对缺氧复氧心肌细胞增殖、凋亡的影响以及作用机制被引量：6
- 2018年
- 目的:研究小干扰RNA(siRNA)靶向沉默细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)基因对心肌细胞增殖、凋亡的影响以及可能作用机制。方法:采用脂质体Lipofectamine 2000转染大鼠H9C2心肌细胞,分为对照组、缺氧/复氧组、缺氧/复氧+siRNA NC组、缺氧/复氧+siRNA SOCS3组;免疫印迹试验(Western blot)检测细胞的转染效果;噻唑蓝(MTT)观察细胞的增殖活性,观察细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的变化;膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)染色法检测细胞凋亡率,Western blot检测核因子-κB(NF-κB)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、c-Myc蛋白水平。结果:与对照组相比,缺氧/复氧组心肌细胞SOCS3蛋白水平显著增加(P<0. 05),细胞的增殖活性、SOD显著下降(P<0. 05),LDH、MDA、凋亡率显著升高(P<0. 05);靶向沉默缺氧复氧心肌细胞SOCS3基因表达较缺氧/复氧组细胞的增殖活性和SOD显著增加(P<0. 05),LDH、MDA、凋亡率显著降低(P<0. 05);缺氧/复氧干预心肌细胞显著抑制NF-κB、Cyclin D1、cMyc蛋白表达(P<0. 05),下调SOCS3基因表达显著增加NF-κB、Cyclin D1、c-Myc蛋白表达(P<0. 05)。结论:沉默SOCS3表达促进缺氧复氧心肌细胞增殖,抑制其凋亡,增强机体氧自由基的清除能力,其作用机制与NF-κB信号通路的激活有关。
- 王文刚王静杜建峰张晓璐卜秀梅
- 关键词：缺血再灌注损伤心肌细胞SOCS3
- Toll样受体4抑制过氧化物酶体增殖物激活受体γ加重血脂蓄积的分子机制被引量：4
- 2020年
- 目的选取高脂饮食模型大鼠和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)暴露下巨噬细胞模型,验证在血脂蓄积过程中Toll样受体4(TLR4)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的具体干预机制。方法健康雄性Wistar大鼠20只,随机分为对照组和高脂组,每组10只。测定各组大鼠总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平,采用苏木精-伊红染色检测颈动脉血管内膜中膜厚度比,采用Western blotting法检测TLR4、PPARγ蛋白表达水平。体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,以oxLDL(50 mg/L)刺激巨噬细胞制备模型,且应用siRNA-TLR4沉默巨噬细胞内的TLR4因子制备TLR4沉默模型,将细胞分为空白组(A组)、oxLDL组(B组)、oxLDL+siRNA组(C组)、oxLDL+siRNA-TLR4组(D组)、oxLDL+siRNA-TLR4+PPARγ激动剂组(E组)、oxLDL+siRNA-TLR4+PPARγ抑制剂组(F组)。采用油红O染色法观察巨噬细胞内血脂蓄积情况,定量检测巨噬细胞内胆固醇含量,采用Western blotting法检测TLR4、PPARγ蛋白表达水平。结果在动物模型实验中,与对照组相比,高脂组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平、颈动脉内膜中膜厚度比、TLR4蛋白相对表达含量明显增高(P<0.01),血清高密度脂蛋白水平、PPARγ蛋白相对表达含量明显降低(P<0.01),且TLR4与PPARγ呈负相关性(r=-0.9281,P<0.001)。在oxLDL暴露巨噬细胞实验中,与A组比较,B、C组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒、光密度值及TLR4蛋白相对表达含量明显增多(P<0.01),PPARγ蛋白相对表达含量明显减少(P<0.05),且B组TLR4与PPARγ呈负相关性(r=-0.9867,P<0.001)。与B组相比,C组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒、光密度值及TLR4、PPARγ蛋白相对表达含量未见明显改变(P>0.05)。与B组相比,D组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒及光密度值及TLR4蛋白相对表达含量明显减少(P<0.01),PPARγ蛋白相对表达含量明显增多(P<0.05)。与D组相比,E组巨噬细胞内胆固醇
- 付洁琦张曼张晓璐李卉陈红
- 关键词：氧化低密度脂蛋白TOLL样受体4过氧化物酶体增殖物激活受体Γ血脂基因沉默
- ATP结合盒转运体G1与动脉粥样硬化的关系被引量：1
- 2020年
- ATP结合盒转运体G1(ATP binding cassette transporter G1,ABCG1)是ABC转运蛋白超家族的成员,主要负责促进胆固醇流出到成熟的高密度脂蛋白,对于防止胆固醇在巨噬细胞中的积聚起着至关重要的作用。ABCG1缺乏可导致泡沫细胞形成、内皮细胞功能紊乱和炎症反应等,进而影响动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的形成与发展。本文主要对ABCG1参与AS发生发展的相关机制进行综述,以期为AS治疗提供新的理论依据和药物靶点。
- 付洁琦张晓璐娄宪芝张曼佟浩
- 关键词：胆固醇外流动脉粥样硬化
- 酰基化与非酰基化胃饥饿素对大鼠颈动脉内膜损伤的影响被引量：1
- 2019年
- 目的观察酰基化和非酰基化胃饥饿素(ghrelin, Ghr)对大鼠颈动脉内膜损伤的作用并探讨相关机制。方法采用球囊损伤法建立颈动脉内膜损伤模型, 30只制模成功的雄性SD大鼠随机分为3组,每组10只,分别为模型组、酰基化Ghr (30 nmol·kg-1)组和非酰基化Ghr (30 nmol·kg-1)组,予高脂饲料;另随机选择10只健康雄性SD大鼠作为正常对照组,予正常饲料。各组均腹腔注射给药,每日1次,治疗4周后,采血检测血脂和C反应蛋白(CRP)水平, HE染色后测量损伤动脉厚度及内膜-中膜厚度比, Western blot法检测损伤动脉组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、胞间黏附分子-1 (ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1 (VCAM-1)蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和CRP水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P <0.05或P <0.01),颈动脉内膜显著增厚,内膜-中膜厚度比显著增加(P <0.01), TNF-α、 IL-1β、 ICAM-1和VCAM-1蛋白表达上调(P <0.05或P <0.01)。与模型组比较,酰基化Ghr组和非酰基化Ghr组大鼠血清TC、 LDL-C、 CRP水平显著降低, HDL-C水平显著升高(P <0.01),颈动脉内膜厚度显著减小、内膜-中膜厚度比显著降低(P <0.01), TNF-α、 IL-1β和ICAM-1蛋白表达降低(P <0.05或P <0.01)。酰基化Ghr组和非酰基化Ghr组各指标比较均无显著差异(P> 0.05)。结论酰基化和非酰基化Ghr均能通过调血脂、减轻炎症反应而缓解大鼠颈动脉内膜损伤,且两者作用无明显差异。
- 李景德佟浩陈红娄宪芝张晓璐陈凯明李卉张曼
- 关键词：颈动脉内膜中膜厚度胞间黏附分子1血管细胞黏附分子1
