刘海龙
- 作品数：8 被引量：13H指数：2
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- BaP诱导细胞恶性转化过程中DNA甲基化水平的变化
- 目的：通过分析BaP诱导细胞恶性转化过程中DNA甲基化水平的变化,探讨BaP致癌的可能作用机制。方法：以正常人支气管上皮细胞(16HBE)为研究对象,使用梯度浓度BaP(0、10、20和40μ M)染毒处理,构建不同染毒...
- 刘海龙高玮古盼邓燕霞黄新凤吴德生刘建军黄海燕
- ADP-核糖基化调控泛素化修饰的研究进展被引量：1
- 2017年
- 在生物体内,蛋白质翻译后修饰具有十分重要的作用,ADP-核糖基化和泛素化修饰作为2个重要的蛋白翻译后修饰类型,参与重要的生命活动。ADP-核糖基化在维持基因组的稳定性,转录调节、细胞分化与信号转导、肿瘤的发生发展等重要的生命活动相关。泛素化在蛋白质定位、代谢、功能、调节和降解中发挥重要作用,几乎参与一切生命活动的调控。蛋白翻译后修饰过程不是孤立存在的。
- 刘海龙刘海龙黄海燕
- 关键词：翻译后修饰泛素化
- PARG调控组蛋白修饰在苯并芘诱导的细胞恶性转化中的作用研究
- 【目的】聚腺苷二磷酸核糖水解酶(PARG)基因沉默所致细胞聚-腺苷二磷酸(ADP)核糖基化水平上调可抑制苯并芘(BaP)诱导的16HBE细胞恶性转化,但其具体机制仍不清晰。文献报道聚-ADP核糖基化调控的组蛋白修饰在肿瘤...
- 黄海燕曾卓颖刘海龙代文娟任晓虎杨晨刘建军庄志雄
- 关键词：人支气管上皮细胞组蛋白修饰
- 文献传递
- 表皮生长因子受体在苯并（a）芘致肺肿瘤中的表达变化被引量：5
- 2017年
- 目的 探讨表皮生长因子受体（EGFR）在苯并（a）芘（BaP）致肺肿瘤中的表达变化.方法 利用课题组前期构建的BaP诱导的人支气管上皮细胞恶性转化模型（BTC）作为研究对象,采用细胞免疫荧光和Western blot法分析比较恶性转化细胞（BTC细胞）和同期未转化对照组细胞（16HBE细胞）中的EGFR蛋白表达变化.将健康雌性SPF级SD大鼠36只,将其以单纯随机法分为2组,每组18只.染毒组以肺穿刺法注射10 mg/ml玉米油-BaP,每只浓度0.2 ml,构建SD雌性大鼠肺肿瘤模型,收集肺脏组织,利用组织免疫荧光和Western blot法分析肺脏组织中EGFR蛋白的表达变化.采用t检验对EGFR蛋白相对灰度值进行分析.结果 细胞免疫荧光结果显示,与正常16HBE细胞比较,BTC细胞中EGFR蛋白的荧光强度较高;进一步利用Western blot检测EGFR的蛋白表达发现,对照组相对灰度值为1.04±0.13,BTC细胞的相对灰度值为2.32±0.12,BTC细胞的EGFR蛋白的表达水平较高,差异有统计学意义（t=12.39,P〈0.001）.SD大鼠肺肿瘤模型检测发现,染毒组大鼠肺组织存在弥漫性的肺泡间隔增厚、肺泡壁破坏以及肺泡融合等,肺组织内可见较大肿块,病理学分析为未分化细胞癌,提示肺肿瘤模型建立成功.免疫荧光结果显示,与对照组相比,BaP诱导的动物肺癌模型的肺组织中EGFR的荧光强度明显增强;Western blot分析结果证实,对照组和染毒组EGFR蛋白的相对灰度值分别为0.21±0.03、1.30±0.07,染毒组动物肺肿瘤组织中EGFR蛋白的表达水平高于对照组,差异有统计学意义（t=12.84,P〈0.001）.结论 在BaP致癌模型中,EGFR蛋白表达上调,EGFR在BaP致癌中可能发挥重要作用.
- 古盼刘海龙邓燕霞高玮刘建军黄新凤李习艺黄海燕
- 关键词：肺肿瘤16HBE细胞
- 苯并芘诱导肝脏的炎症损伤及EGFR的表达变化被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨苯并芘(Ba P)长期暴露对大鼠肝脏的炎症损伤及表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化。方法:选择6周龄雌性SPF级SD大鼠36只,将其随机分为染毒组和对照组,每组18只,染毒组胸腔注射10 mg/m L的玉米油-苯并芘0.2 m L,对照组注射0.2m L玉米油,每2周注射1次,共4次,连续观察1年,期间记录大鼠的生存状况和体质量变化,实验结束时收集大鼠肝脏组织,利用HE染色进行病理分析,同时采用免疫组化、免疫荧光和Western blot检测肝脏组织中EGFR蛋白的表达变化。结果:与对照组比较,染毒组实验期间大鼠体质量和生长未见明显异常;病理分析发现Ba P作用后的大鼠肝脏出现了明显的碎片状坏死和炎性浸润;免疫组化、免疫荧光结果均显示染毒组大鼠肝脏内EGFR表达增强;Western blot检测发现,染毒组EGFR蛋白表达水平(0.915±0.253)较对照组(0.452±0.095)明显升高(P<0.05)。结论:Ba P诱导肝脏炎症的同时可激活EGFR高表达,推测Ba P诱发的炎症与EGFR的表达密切相关。
- 邓燕霞邓燕霞刘海龙刘海龙刘建军刘建军黄新凤李习艺
- 关键词：肝损伤炎症表皮生长因子受体
- PARG沉默对抗苯并芘诱导细胞恶性转化中组蛋白表达改变的分析
- 2021年
- 目的了解在苯并芘(Benzo[a]pyrene,BaP)诱导细胞恶性转化中,聚-ADP-核糖水解酶(PARG)缺失对组蛋白表达所起的作用,为BaP所致肺癌的防治提供科学依据。方法选用BaP诱导的恶性转化人支气管上皮细胞(16HBE细胞)和同样处理的PARG基因缺失细胞(shPARG细胞)为研究对象,使用40μmol/L BaP处理24 h后,在透射电子显微镜下对比观察2种细胞恶性转化前后染色质结构的变化,再用Western blot技术分析BaP诱导的细胞发生恶性转化后组蛋白表达水平的情况。结果经BaP染毒后,16HBE细胞内染色质结构出现转变,细胞核异常,常染色质减少、异染色质增多,而shPARG细胞内的上述变化表现不明显;16HBE细胞还出现了组蛋白H2A和H1表达水平降低、H2B表达水平升高、H3和H4表达水平无明显变化的现象,shPARG细胞内上述4种组蛋白的表达则均未见明显改变。结论受BaP作用的细胞会出现染色质结构改变和组蛋白表达水平异常的现象,而PARG缺失可对抗这些变化。
- 张泽娜刘海龙黄海燕
- 关键词：组蛋白
- 苯并芘诱导肝脏的炎症损伤及表皮生长因子受体的表达变化
- [目的]探讨苯并芘(BaP)长期暴露对大鼠肝脏炎症的损伤及表皮生长因子受体(EGFR)的表达变化.[材料与方法]选取36只SPF级雌性SD大鼠作为实验对象,6周龄,体质量180～220g.将其随机分为染毒组和对照组,每组...
- 邓燕霞古盼刘海龙郑凯刘建军黄新凤李习艺黄海燕
- 关键词：肝损伤表皮生长因子受体
- BaP诱导细胞恶性转化过程中DNA甲基化水平的变化被引量：2
- 2017年
- 目的:通过分析苯并芘(BaP)诱导细胞恶性转化过程中DNA甲基化水平的变化,探讨BaP致癌的作用机制。方法:以正常人支气管上皮细胞(16HBE)为研究对象,使用梯度浓度BaP(0、10、20和40μmol/L)染毒处理,构建不同染毒周期(1周、9周和15周)的细胞株,使用5-甲基胞嘧啶(5-mC)细胞免疫荧光检测各组细胞基因组DNA整体甲基化水平的变化,并进一步利用Western blotting和实时荧光定量-PCR技术分析不同染毒周期细胞甲基化蛋白酶(DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、MBD2)表达的变化。结果:BaP染毒后,16HBE细胞的5-mC荧光强度表达下降,且随着染毒剂量的增加和染毒时间的延长,这种下降趋势更明显,其中40μmol/L BaP染毒处理细胞15周时,肉眼已难以观察到可见荧光。与对照组比较,BaP染毒可下调细胞DNMT1蛋白及其mRNA的表达,并呈现明显的剂量和时间反应关系(P均<0.05),但DNMT3a、DNMT3b、MBD2蛋白的表达变化不明显(P均>0.05)。结论:BaP可诱导16HBE细胞基因组DNA整体甲基化水平下调,DNMT1在其中可能发挥重要作用。
- 刘海龙高玮古盼邓燕霞黄新凤吴德生刘建军黄海燕
- 关键词：DNA甲基化恶性转化
