武福云
- 作品数：12 被引量：31H指数：4
- 供职机构：湖北医药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 多药耐药基因MDR1和细胞自噬在肿瘤多重耐药机制中的研究进展被引量：8
- 2018年
- 肿瘤是威胁人类健康的恶性疾病。化疗是目前临床抗肿瘤最常用的治疗方法,化疗药物具有较广的抗瘤谱。但肿瘤多重耐药的发生是导致化疗疗效不佳的主要原因。肿瘤多重耐药机制非常复杂,与药物代谢、药物靶点改变、DNA修复增强、细胞周期改变及肿瘤微环境等均有密切联系。其中多药耐药基因MDR1表达的膜转运蛋白P-糖蛋白参与的化疗药物逆向转用是多药耐药发生的重要机制之一,但是针对MDR1的一些抑制剂并不能很好地解决肿瘤的耐药问题。近年来研究发现,细胞自噬直接参与肿瘤多药耐药,联合调控MDR1的表达及肿瘤细胞自噬水平将可能改善肿瘤细胞的多重耐药。该文主要从多药耐药基因MDR1的表达调控及细胞自噬水平改变两方面综述肿瘤细胞多重耐药机制的研究进展。
- 柳丹李珊赵红艳柯镜汤志明白磊牛成群牟雪瑶朱明明武福云
- 关键词：肿瘤多药耐药耐药蛋白自噬
- 洛哌丁胺在逆转结直肠癌5-氟尿嘧啶耐药中的应用
- 本发明属于生物医疗技术领域，具体而言，涉及洛哌丁胺在逆转结直肠癌5‑氟尿嘧啶耐药中的应用，所述应用为非治疗目的，任选地，所述洛哌丁胺的含量为20μM；本发明研究发现，对于结直肠癌5‑FU的耐药细胞，LOP可以快速提高5‑...
- 李珊于娟安晓彤武福云柯镜郑伟汪彪
- 钙库调控的钙通道Orai1体外研究方法的建立被引量：1
- 2018年
- 目的：建立钙通道Orai1的体外研究方法。方法：利用脂质体重组技术,将体外纯化的Orai1蛋白重组到脂质体膜上,利用蔗糖密度梯度离心来检测其重组效率及Orai1蛋白在脂质体膜上的结构,并利用钙染料Fura-2检测脂质体内钙离子的释放。结果：成功制备了脂质体及体外纯化了GST-Orai1融合蛋白,蔗糖密度梯度离心结果证明GST-Orai1蛋白成功重组到脂质体上,以及Orai1蛋白以多聚体的形式定位在脂质体膜上。钙离子释放实验证明脂质体内钙离子包装完好,可用于后续Orai1钙通道的功能研究。结论：利用脂质体重组技术建立了一种新的Orai1的研究方法,能够更直接有效地研究其功能及其活化机制。
- 武福云姚美连吴胜英汪雄李珊
- 关键词：钙通道体外研究
- 曲古抑菌素A抑制胃癌细胞增殖的分子机制被引量：1
- 2020年
- 目的曲古抑菌素A(TSA)是氧肟酸盐类组蛋白去乙酰化酶抑制剂,具有一定的抗肿瘤活性。文中主要探讨胃癌细胞中TSA通过p-AKT/p-mTOR途径抑制细胞增殖的分子机制。方法分别用不同浓度的TSA处理胃癌细胞SGC-7901,通过MTT实验检测TSA对细胞的抑制率。将细胞分为对照组(不做任何处理)、TSA处理组(200 ng/mL TSA)、p-AKT回补组(200 ng/mL TSA+8μg/mL SC79)和自噬抑制组(5 mmol/mL 3-甲基腺嘌呤+200 ng/mL TSA)。通过细胞免疫荧光染色检测对照组和TSA处理组内Lc3的蛋白表达分布。Western blot检测对照组、TSA处理组和p-AKT回补组中p-AKT、p-mTOR以及自噬相关蛋白Lc3、P62的相对表达水平。EdU和细胞计数实验检测对照组、TSA组、p-AKT回补组和自噬抑制组中细胞的增殖能力。结果处理24 h,TSA处理组Lc3在细胞质内形成大量颗粒状聚集物,荧光分布从初始的弥散状转变为致密状。EdU实验显示,与对照组相比,TSA处理组的绿色荧光显著减少。对照组、TSA处理组、自噬抑制组p-AKT的表达量分别为1.78±0.19、0.92±0.03和1.71±0.19,Lc3分别为0.21±0.01、0.79±0.06和0.55±0.10,与对照组相比,TSA处理组中p-AKT相对表达水平均降低,Lc3表达升高(P<0.05)。3组p-mTOR分别为0.80±0.16、0.45±0.04和0.98±0.16,与对照组相比,TSA处理组中p-mTOR相对表达水平均降低(P<0.05)。3组P62分别为1.17±0.15、0.48±0.08和0.77±0.10,与对照组相比,TSA处理组中P62相对表达水平均降低(P<0.05)。与TSA处理组比较,p-AKT回补组p-AKT、p-mTOR、P62表达升高(P<0.05),Lc3表达降低(P<0.05)。与对照组相比,TSA处理组的细胞生长曲线抑制效应最明显,而p-AKT回补组和自噬抑制组较TSA处理组细胞生长曲线有部分回升。结论TSA可以通过抑制p-AKT/p-mTOR途径,促进自噬,进而抑制胃癌细胞的增殖。
- 汤志明谷春明刘洋覃韦宁李佳莉杨萍杨方红蔡云丽武福云李珊
- 关键词：曲古抑菌素蛋白激酶B自噬增殖
- 姜黄素在糖基化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞脂质聚积中的作用机制研究被引量：1
- 2019年
- 目的研究姜黄素在糖基化低密度脂蛋白(AGE-LDL)诱导的血管平滑肌细胞脂质聚积中的作用机制。方法体外制备并检测AGE-LDL,将AGE-LDL及不同浓度的姜黄素作用于大鼠血管平滑肌细胞系A7r5,分别设置空白对照组、AGE-LDL处理组、10μmol/L姜黄素处理组、20μmol/L姜黄素处理组和10、20μmol/L姜黄素+3-MA处理组;Western blot检测B类I型清道夫受体(SRB1)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(pmTOR)、自噬相关蛋白Beclin和SQSTM1/p62蛋白表达水平;油红O染色检测脂质聚积程度。结果体外糖基化修饰的LDL硫代巴比妥反应显著降低、电泳迁移率明显增加,表明AGE-LDL构建成功。Western blot实验结果显示,与空白对照组相比,姜黄素处理组明显上调AGE-LDL诱导的SRB1的表达,并具有一定的浓度依赖效应。姜黄素还能够抑制p-GSK3β和p-mTOR的表达水平,增加细胞的自噬水平(beclin表达升高和p62表达下降)。油红O染色实验证实,AGE-LDL处理组脂质聚积明显,而姜黄素各处理组脂质聚积减弱,但3-MA各处理组脂质聚积进一步增加。结论姜黄素可促进血管平滑肌细胞SRB1表达,抑制其脂质聚积,机制可能与通过GSK-3β/mTOR途径增加自噬相关蛋白表达有关。
- 郑伟朱明明陈欣柳丹白磊路可欣李珊武福云
- 关键词：姜黄素自噬
- 核受体NR6A1通过上调RIPK3基因表达诱导血管平滑肌细胞凋亡被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨核受体亚家族6A1(NR6A1)对血管平滑肌细胞凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将腺病毒Ad-NR6A1感染大鼠血管平滑肌细胞,分别在感染后0 h、24 h和48 h时进行MTT实验,以时间为横坐标,A570为纵坐标绘制细胞生长曲线,观察NR6A1对细胞生长的影响;进行DAPI染色、TUNEL染色及caspase活性检测,观察细胞凋亡情况;进一步通过基因芯片技术,寻找NR6A1的靶基因;采用siRNA介导的基因沉默技术,观察受体相互作用丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶3(RIPK3)基因沉默对NR6A1诱导的血管平滑肌细胞凋亡的影响。结果:腺病毒Ad-NR6A1感染细胞48 h时,NR6A1过表达组细胞数量较对照组(重组腺病毒载体Ad-Lac Z)明显减少;DAPI染色显示NR6A1过表达诱导血管平滑肌细胞出现核浓缩和核碎裂的凋亡表型,TUNEL染色显示NR6A1过表达引起细胞凋亡,caspase活性检测结果显示NR6A1过表达细胞内caspase-3、caspase-8和caspase-9活性均较对照组高;基因芯片技术检测发现,NR6A1过表达上调血管平滑肌细胞中RIPK3基因表达;RIPK3基因沉默可以显著抑制NR6A1诱导的平滑肌细胞凋亡。结论:NR6A1通过上调RIPK3基因表达诱导血管平滑肌细胞凋亡。
- 张亚辉汪雄吴胜英彭吉霞武福云柯镜张鹏张秋芳吕艳霞
- 关键词：细胞凋亡
- PDCD4表达下调通过pAKT/pGSK3β途径促进胃癌顺铂耐药的机制初探被引量：2
- 2019年
- 目的探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)表达下调在顺铂诱导胃癌细胞凋亡中的作用机制,为胃癌的顺铂耐药提供新的分子靶点。方法通过在人胃癌细胞系SGC7901中敲减表达PDCD4基因,顺铂诱导细胞凋亡,将细胞分为shNC组、shPDCD4组、shNC加药组和shPDCD4加药组,荧光实时定量PCR( qRT-PCR)检测PDCD4mRNA表达水平;Caspase-3活性测定试剂盒、Hoechst染色结合细胞免疫荧光检测细胞凋亡水平;Westernblot检测磷酸化蛋白激酶B( pAKT)和磷酸化糖原合成酶激酶3β( pGSK3β)蛋白表达水平。在细胞中加入特异性Akt抑制剂,将细胞分为shNC加药组、shPDCD4加药组、LY294002阻断组(转染shPDCD4质粒,先加LY294002再加入顺铂处理)和Wortmannin阻断组(转染shPDCD4质粒,先加Wortmannin再加入顺铂处理),Westernblot检测聚ADP-核糖聚合酶(PARP)蛋白表达水平。结果 qRT-PCR和Westernblot检测结果证实稳定转染ShPDCD4质粒的SGC7901细胞中PDCD4的mRNA表达和蛋白表达均有显著下降,体外稳定转染ShPDCD4的SGC7901胃癌细胞株构建成功。相较于shNC加药组,shPDCD4加药组Caspase3活性下降,细胞凋亡降低(P<0.05)。 PDCD4表达下调将导致pAKT和pGSK3β的表达水平提高(P<0 .05),应用Akt抑制剂(LY294002、 Wortmannin)阻断该信号通路后,PARP的相对表达水平重新上调(P<0.05)。结论 PDCD4表达下调能够通过pAKT/pGSK3β途径降低顺铂引起的胃癌细胞凋亡,进而促进细胞顺铂耐药的形成。
- 柳丹汤志明武福云赵红艳柯镜向鹏金佳晴李珊
- 关键词：顺铂糖原合成酶激酶3Β
- 过表达PDCD4逆转胃癌顺铂耐药的初步机制被引量：5
- 2019年
- 目的程序性细胞死亡因子(PDCD4)是近年来新发现的一类促凋亡基因,文中主要研究PDCD4逆转胃癌顺铂耐药的分子机制,为胃癌的耐药机制研究和治疗提供新的基因靶点。方法通过在人胃癌细胞系SGC7901/DDP中稳定过表达PDCD4基因,实验分为对照组(仅转染p CMV质粒),高表达组(仅转染p CMV-PDCD4质粒),对照加药组(转染p CMV质粒并加入顺铂处理),高表达加药组(转染p CMV-PDCD4质粒并加入顺铂处理),进行细胞免疫荧光﹑流式细胞术、RT-PCR和Western blot实验。实验分为空载加药组(转染p CMV质粒并加入顺铂处理)﹑PDCD4加药组(转染p CMV-PDCD4质粒并加入顺铂处理)和PDCD4加激活剂组(转染p CMV-PDCD4质粒,先加入SC79再加入顺铂处理)进行p Akt回补实验。结果高表达组PDCD4蛋白和mRNA表达较对照组明显升高(P<0.05),高表达加药组PDCD4蛋白和mRNA表达较对照加药组明显升高(P<0.05)。流式细胞术检测细胞早期凋亡水平显示,高表达加药组顺铂诱导的细胞早期凋亡率(25.22%)较对照加药组(21.08%)显著增高(P<0.05)。通过Western blot法表明,相较于对照加药组,高表达加药组中p Akt、p GSK3β和BCL-2的表达量均有明显降低(0.73±0.06 vs 0.42±0.04、0.88±0.05 vs 0.53±0.08、1.15±0.13 vs 0.84±0.14),差异均有统计学意义(P<0.05);而相较于对照加药组,高表达加药组中促凋亡蛋白BAK的表达水平则明显升高(1.28±0.09 vs 1.48±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。PDCD4加药组p Akt、p GSK3β表达较空载加药组、PDCD4加激活剂组明显降低(P<0.05),PARP(C)表达较空载加药组、PDCD4加激活剂组明显升高(P<0.05)。结论过表达PDCD4能够通过p Akt/p GSK3β促进顺铂引起的胃癌细胞凋亡,有利于逆转细胞顺铂耐药的形成。
- 柳丹汤志明赵红艳柯镜白磊牛成群金佳晴武福云李珊
- 关键词：AKT糖原合酶激酶3Β顺铂耐药
- 恩格列净通过雷帕霉素靶点蛋白抑制胃癌的分子机制初探
- 2023年
- 目的 恩格列净(empagliflozin, EMPA)是钠-葡萄糖转运蛋白2(sodium-glucose cotransporter 2, SGLT2)特异性抑制剂。通过综合网络药理学预测EMPA对胃腺癌的干预靶点,并利用细胞生物学和分子生物学实验对其作用及分子机制进行验证。方法 使用生物信息学分析胃腺癌预后与SGLT2表达情况的相关性,网络药理学分析EMPA和胃腺癌的共同靶点。用不同浓度的EMPA孵育人胃腺癌细胞AGS 24 h后,CCK8法检测细胞增殖率;选择0、3、6 mmol/L EMPA孵育AGS细胞,实时细胞分析(real-time cell analysis, RTCA)和EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)检测EMPA对胃腺癌细胞增殖的抑制能力,伤口愈合实验和Transwell实验检测EMPA对胃腺癌细胞迁移和侵袭的抑制能力,Western blot检测雷帕霉素(mammalian target of rapamycin, mTOR)和磷酸化mTOR(phosphorylated mTOR, p-mTOR)表达。BALB/c(nu/nu)裸鼠均于腋下种植5×10~6 AGS细胞,分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组7只,1周后,对照组每日腹腔注射生理盐水,低剂量组和高剂量组每日腹腔注射EMPA 3 mg/kg和5 mg/kg,给药1周后检测肿瘤体积。结果 低表达SGLT2的胃腺癌患者生存期和存活率均高于高表达SGLT2的胃腺癌患者。收集了104个EMPA相关潜在靶点和2 028个胃腺癌相关靶点,胃腺癌相关的45个靶点和EMPA潜在靶点相重合,从中鉴定出10条相关信号通路和4个核心基因。这4个关键基因分别是细胞周期依赖激酶4基因(cyclin-dependent kinase-4, CDK4)、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、雷帕霉素靶点蛋白基因(mammalian target of rapamycin, mTOR)和周期蛋白E1基因(cyclin E1, CCNE1)。CCK-8检测结果示0.39~50 mmol/L EMPA能抑制AGS细胞增殖;与对照组相比,RTCA结果表明3 mmol/L、6 mmol/L EMPA组细胞生长曲线下移。与对照组相比,EdU检测发现3 mmol/L、6 mmol/L EMPA能够抑制AGS细胞的增殖(P<0.05),伤口愈合实验和Transwell实验结果表明,3 mmol/L
- 饶慧玲程旺于娟安晓彤邓浩君张昭阳武福云戢福云李珊
- 关键词：胃腺癌MTOR
- 病理生理学课程中Think-Pair-Share模式在麻醉学专业教学中的应用与探索被引量：5
- 2020年
- 该校麻醉学是湖北省最早、全国第2家开设的麻醉学本科专业,是国家级特色专业、湖北省“专业综合改革试点”项目。为使麻醉学医学生能更好地认识和掌握疾病发生、发展和转归规律及机制,针对麻醉学学生基础知识扎实、班级学生人数相对较少等教育教学特点,在病理生理学课程教学中实施Think-Pair-Share模式教学法,在教学上实施“以问题为导向,以学生为主体”的教学理念,提高学生主动学习和合作学习的积极性,培养学生的创新意识。
- 柯镜彭吉霞汪雄刘坚武福云赵相宜陈义芝吴胜英
- 关键词：教学方式病理生理学
