王赟
- 作品数：12 被引量：79H指数：6
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 孕早期家兔子宫内膜细胞的分离培养与形态观察被引量：25
- 2004年
- 为探讨子宫内膜细胞的分离与体外培养条件、生长特点及其增殖过程,采用不同消化方法进行了孕早期家兔子宫内膜细胞的消化和分离培养试验。结果表明,多数情况下采用胰蛋白酶消化获得的细胞数量少且活率低于60%,而采用1g/L胶原酶 型消化获得的细胞数量多达1×106/cm3,且活率大于90%。经74μm(200目)滤网过滤分离培养出多角形和梭形2种形态的基质细胞及铺路石状的腺上皮细胞,并均能在体外培养和传代。
- 陈秀荔靳亚平利光辉王赟林炜明
- 关键词：家兔子宫内膜细胞分离基质细胞腺上皮细胞
- 胚胎早期死亡的因素分析被引量：3
- 2003年
- 引起胚胎早期死亡的因素很多。如配子发生过程中的潜在异常、胚胎内在缺陷、母胎识别建立的失败、母体环境异常等。本文从配子发生、胚胎发生、母胎关系建立、母体环境等方面对胚胎早期死亡的因素进行分析。
- 利光辉靳亚平王赟林炜明陈秀荔
- 关键词：胚胎
- 胎猪胰腺干细胞扩增及诱导
- 2009年
- 目的寻找胰腺干细胞扩增方法，为研究糖尿病的细胞治疗提供种子细胞。方法无菌采集胎猪胰腺，经胰酶消化，以含10％血清的RPM11640培养基培养。细胞长满皿底85％时，用胰酶消化传代，传代5～6次后细胞活力下降，细胞大量死亡漂浮，留下少数贴壁的小圆细胞。将培养基中的血清浓度提高到15％，贴壁的小圆细胞能快速增殖并形成细胞克隆，4～6d便可融汇成单层。采用免疫组织化学方法对所获得的的细胞进行胰腺干细胞特征检测。结果经上述方法处理的细胞具有旺盛的增殖能力，可以连续传代，目前已传至64代。采用免疫组织化学检测细胞表达胰腺干细胞特征性标志物，胰肠同源域因子1（PDX-1）、葡萄糖转运子2（GLUT-2）、巢蛋白、波形蛋白；经诱导后细胞表达胰腺内分泌细胞的标志为胰高血糖素、胰岛素、生长抑素、胰多肽。结论通过该方法可以获得大规模扩增的胰腺干细胞，该细胞在体外诱导可分化形成胰腺内分泌部4种主要细胞。
- 王赟楚元奎杨春荣王华岩窦忠英
- 关键词：胰岛胰腺干细胞糖尿病免疫组织化学胎猪
- 胎儿胰岛样细胞团源上皮样细胞分离、纯化和鉴定被引量：8
- 2007年
- 旨在优化胰腺干细胞分离、鉴定的方法和体系，为糖尿痛研究和治疗提供种子细胞。采用胶原酶消化法，分离培养出胰岛样细胞团（ICCs），对其进行贴壁培养，从中纯化出上皮样细胞。采用MTT法测定其生长情况并绘制生长曲线。采用免疫组织化学染色检测分离得到细胞的PDX-1、PCNA、CK-7、CK-19、Nesfin、Glut2、Vimenfin、Insulin表达情况。应用流式细胞仪检测其表面标志。由分离培养的ICCs成功纯化出上皮样细胞；传40代，每代冻存106～10s个细胞；生长曲线显示其传代第3天进入对数生长期，第5天进入平台期；免疫组织化学染色显示其表达PDX-1、PCNA、CK-7、CK-19、Nestin、Glut2、Vimentin；不表达Insulin；流式细胞仪分析表明其表达CD29、CD44、CD166，不表达CD11a、CD14、CD34、CD45、CD90、CD105、CD117。由胎儿胰腺能分离出具有自我更新能力的上皮样细胞，为导管来源，具干细胞特性。
- 乔海赵婷王赟杨春荣效梅窦忠英
- 关键词：胎儿胰腺胰腺干细胞胰岛样细胞团上皮样细胞
- 奶牛乳腺炎分离细菌裂解苗免疫试验被引量：4
- 2004年
- 应用自奶牛乳房炎检测为阳性的牛乳汁中分离的4种优势G+菌,分别与葡聚糖、油佐剂和FIA3种佐剂制成细菌裂解苗免疫家兔。于免疫后第7天开始,每隔7d采集心脏血,分离血清,以试管凝集试验检测血清中抗体效价,以此评价所分离细菌的免疫原性和所用佐剂的免疫促进作用,筛选适宜的佐剂。结果显示,所分离的优势G+菌刺激家兔机体后可产生高效价的抗体,免疫后第7天,抗体效价开始明显上升,第28天左右达到峰值,并一直持续到试验结束(63d)。比较3种佐剂的免疫促进效果,以FIA效果最好,但3种疫苗间的免疫效果差异不显著,而与对照组相比,差异均达极显著(P<0.01)。
- 王赟靳亚平林炜明利光辉陈秀荔
- 关键词：奶牛乳腺炎免疫佐剂免疫原性
- 猪胰腺干细胞分离与培养被引量：2
- 2008年
- 【目的】探寻一种简单的胰腺干细胞的分离方法,以便为糖尿病的细胞治疗研究提供丰富的种子细胞。【方法】采用胰酶消化法分离获得细胞,利用仅含有5%的血清的RPMI1640培养基培养细胞,低浓度的血清使得细胞大量死亡漂浮,只留下少数贴壁的小圆细胞。而后将血清浓度提高到15%以上继续培养;采用免疫组化方法对获得的细胞是否具有胰腺干细胞特征予以检测,并测定了细胞的生长曲线。【结果】在血清浓度提高后每个小圆细胞能快速增殖并形成一个克隆,经过这样增殖后的细胞可以连续传代,目前已传至60代。经免疫组化检测,细胞表达PDX-1、GLUT-2、vimentin等胰腺干细胞的标志;细胞也表达Glucagon、insulin、somatostatin、polypeptide等胰腺内分泌细胞的标志.【结论】通过本方法获得的细胞经检测确定为胰腺干细胞,在体外可自发分化形成胰胰内分泌部4种主要细胞。
- 王赟窦忠英乔海赵婷杨春荣
- 关键词：胎猪胰岛胰腺干细胞糖尿病
- 奶牛乳汁中体细胞计数方法的改进被引量：5
- 2005年
- 王赟靳亚平丰艳妮利光辉陈秀荔林炜明
- 关键词：乳汁LITTLE体细胞计数仪器检测泌乳期
- 奶牛早期胚胎死亡的因素分析及防制措施被引量：9
- 2003年
- 奶牛妊娠失败主要发生在配种后的40d,染色体异常和激素失调等内源性因素和热应激、营养等环境因子,均是引起胚胎死亡的原因。激素治疗,提高P4的浓度或补充bTP—1,在一定程度上可以提高奶牛的妊娠率,改善公母畜的饲养管理条件,满足家畜对维生素及微量元素的需要,并保证优良条件,以提高配子的质量,使早期胚胎得到正常的发育。本文从早期胚胎发育、母胎识别、影响胚胎死亡率的因素及预防、治疗等方面进行综述。
- 利光辉靳亚平林炜明陈秀荔王赟
- 关键词：奶牛早期胚胎防制措施胚胎死亡
- 人胰腺干细胞诱导胰岛样细胞团及其治疗大鼠糖尿病的效果被引量：10
- 2007年
- 目的:观察人胎儿胰腺干细体外诱导分化为胰岛样细胞团及治疗大鼠糖尿病的效果。方法:实验于2005-09/2006-09在西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术研究中心完成。人胰腺干细胞为本实验室冻存的1株传至50代的人胎儿胰腺干细胞。采用DMEM/F12培养液,添加B27、1g/L胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠、1g/L牛血清白蛋白、10mmol/L烟酰胺、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子及10μg/L肝细胞生长因子,诱导胰腺干细胞分化为胰岛样细胞团,应用双硫腙染色、RT-PCR及葡萄糖刺激试验对该胰岛样细胞团进行鉴定。采用完全随机法将30只SD大鼠分为链脲菌素注射组24只,正常对照组6只。空腹12h后,两组大鼠分别腹腔注射70mg/kg体质量的链脲菌素和0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。大鼠分别于注射前、注射后48h、第5天和第8天空腹断尾采血,测定全血血糖浓度。选取连续2次血糖浓度高于16.7mmol/L的大鼠作为糖尿病模型。采用完全随机法从已成模的糖尿病大鼠中挑出18只分为3组:胰岛移植组9只,进行肾被膜下胰岛样细胞团移植,每只大鼠植入胰岛数(3000±100)个;干细胞移植组3只,肾被膜下移植未进行诱导的胰腺干细胞,细胞数约2×106个;糖尿病对照组6只,肾被膜下移植不含细胞的培养液。3组大鼠均于移植前及移植后48h测定空腹血糖浓度,每周定点测空腹血糖及称体质量1次。结果:18只符合糖尿病模型标准的大鼠与正常对照组6只大鼠均进入结果分析。①成功将人胎儿胰腺干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞团,双硫腙染色阳性,RT-PCR检测表达胰岛素,经葡萄糖刺激能释放胰岛素。②共有22只大鼠糖尿病成模,成模率达91.7%。③胰岛移植组大鼠移植后2周内,血糖浓度均有所降低,但仍高于正常血糖浓度范围;移植后第3周血糖浓度迅速上升,之后一直维持高血糖状态。干细胞移植组大鼠移植后血糖一直处�
- 赵婷乔海王赟贾文文窦琳效梅窦忠英
- 关键词：胰腺干细胞糖尿病
- 奶牛隐性乳腺炎病原菌的分离鉴定被引量：10
- 2004年
- 从2002年10月起,应用LMT从西安及其周边地区184个乳区的1000头奶牛中抽取了48头,进行奶牛隐性乳腺炎的调查及病原菌的分离鉴定。结果西安及其周边地区患隐性乳腺炎奶牛占总头数的66.7%,患隐性乳腺炎乳区占总乳区的35.4%。4个乳区全阳性者占15.2%。共检出细菌67株,其中金黄色葡萄球菌占总检出菌41.8%。链球菌占总检出菌29.9%。G+杆菌与G-杆菌各3株,分别占总检出菌4.5%。
- 王赟靳亚平林炜明利光辉陈秀荔丰艳妮
- 关键词：奶牛隐性乳腺炎病原菌金黄色葡萄球菌链球菌
