于莉
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：湖北医药学院附属太和医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 酸性环境抑制CIK细胞对肝癌HepG2细胞的杀伤活性被引量：1
- 2016年
- 目的研究酸性环境对CIK(cytokine-induced killer,CIK)细胞杀伤肝癌HepG2细胞的影响。方法利用IFN-γ、IL-2及CD3抗体诱导外周血单个核细胞获得CIK细胞。在pH6.5及pH7.4条件下将CIK细胞和荧光素酶标记的HepG2细胞(HepG2-luc)按不同的效靶比混合培养,用小动物活体成像系统检测HepG2-luc荧光强度并计算杀伤活性,用MTT法检测并计算杀伤活性。在pH6.5及pH7.4条件下,在含CIK条件培养液0、50%和100%的情况下培养HepG2细胞,流式细胞仪检测凋亡坏死的细胞比例。结果 pH7.4时CIK细胞对HepG2细胞的杀伤率明显高于pH6.5时。CIK条件培养液作用下,pH7.4时HepG2细胞的凋亡坏死比例明显高于pH6.5。结论酸性环境明显抑制了CIK细胞对肝癌细胞HepG2的杀伤活性。
- 袁雅红郭兴荣于莉王小莉丁妍李东升
- 关键词：CIKHEPG2杀伤活性
- 脐带间充质干细胞条件培养液促进人胚胎干细胞分化为造血细胞
- 2015年
- 目的利用人脐带间充质干细胞造血支持的特性,优化人胚胎干细胞造血分化方案。方法利用组织块培养法分离扩增人脐带间充质干细胞,收集条件培养液。以小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层培养人胚胎干细胞,再用拟胚体培养液诱导拟胚体形成。分别用条件培养液和拟胚体培养液培养拟胚体,再用流式细胞术检测EB中造血标志CD45和CD34的表达。结果利用组织块培养法获得大量形态均一、增殖迅速的脐带间充质干细胞;间充质干细胞条件培养液诱导8d后,拟胚体中的CD45表达60%以上,CD34表达30%以上,远高于含有BMP4的拟胚体培养液的诱导率。结论人脐带间充质干细胞条件培养液可促进人胚胎干细胞的造血分化,并避免动物源污染,节约成本。
- 袁雅红李大哲于莉马石楠李东升
- 关键词：脐带间充质干细胞胚胎干细胞造血细胞条件培养液
- 新基因Betatrophin原核重组蛋白表达及纯化被引量：1
- 2017年
- 目的构建人Betatrophin基因(h-Betatrophin)原核表达载体,诱导Betatrophin重组蛋白表达及纯化,为制备Betatrophin蛋白多克隆抗体及其功能研究打下基础。方法体外克隆Betatrophin cDNA序列,酶切后连接到PET32a(+)原核表达载体上,构建重组载体h-Betatrophin-PET 32a,然后转入大肠杆菌BL 21(DE 3),用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE-考马斯亮蓝染色及Western blotting检测蛋白表达情况,然后用Ni-NTA His·BindResin纯化目的蛋白。结果成功构建Betatrophin基因原核表达载体,诱导表达Betatrophin重组蛋白表观分子量正确,经纯化后可以得到纯度较高的Betatrophin重组蛋白。结论重组载体h-Betatrophin-PET 32a转入大肠杆菌BL 21后通过诱导及纯化可获取到纯度很高的Betatrophin重组蛋白,为后期研究Betatrophin基因功能奠定基础。
- 周春芳马石楠陈云李东升于莉王小莉郭兴荣
- 关键词：蛋白表达蛋白纯化
