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RNA干扰对白血病CDX2基因表达及其增殖与凋亡的影响: 李建厂孙维梅

RNA干扰对白血病细胞增殖与凋亡机制的探讨被引量：1: 2016年; 目的尾侧同源盒基因(caudal tupe homeobox gene 2,CDX2)是早期胚胎生长发育过程中重要的调节因子,近年来有研究证实CDX2基因在造血细胞增殖分化过程中亦发挥重要作用。本研究采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默白血病K562细胞中CDX2的表达,探讨该基因沉默前后对白血病细胞增殖和凋亡的影响,为白血病的临床治疗提供理论依据。方法设计合成针对目的基因CDX2不同编码区的3个小干扰RNA序列(CDX2-siRNA-1443,CDX2-siRNA-2009,CDX2-siRNA-921)及阴性对照序列(CDX2-siRNA-NC),将各组siRNA分别转染K562细胞,同时设未转染K562细胞组作为对照,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及蛋白质印迹法检测CDX2mRNA和蛋白的表达量变化,筛选对目的基因CDX2沉默效率最高的siRNA序列,用于下一步实验。MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测转染前后细胞增殖和凋亡变化。结果 RT-PCR结果显示,与未转染K562细胞组相比,3组CDX2-siRNA均能有效沉默K562细胞内CDX2mRNA表达,其中CDX2-siRNA-921对CDX2mRNA沉默效率最高(66.2%),差别有统计学意义,P<0.05。蛋白质印迹法结果显示,CDX2-siRNA-921组CDX2蛋白相对表达量与未转染K562细胞组相比降低最明显(68.0%,P<0.01),该结果与RT-PCR结果相符。MTT法显示,转染CDX2-siRNA-921组细胞存活率明显低于未转染K562细胞组,而转染CDX2-siRNA-NC组细胞存活率无明显变化,提示转染CDX2-siRNA-921能够明显抑制细胞增殖。流式细胞术结果显示,与CDX2-siRNA-NC组和正常细胞组相比,转染CDX2-siRNA-921组细胞凋亡率显著增加。结论 CDX2siRNA能够有效抑制白血病细胞K562中CDX2的表达,使细胞增殖减弱、凋亡增加,有望为白血病临床治疗提供新的基因靶点和治疗方法。; 孙维梅李建厂贾秀红李有杰唐慎华; 关键词：CDX2 白血病 SIRNA 细胞增殖

儿童免疫性血小板减少症预后影响因素的评分研究被引量：1: 2020年; 目的分析影响儿童免疫性血小板减少症预后的相关因素,并建立关于儿童免疫性血小板减少症患儿预后的临床评分系统。方法(1)对本院2016年3月至2019年2月期间治疗的206例儿童免疫性血小板减少症患儿进行资料统计,分别记录性别、年龄、初诊时血小板数目、出血及感染情况、治疗效果,并对其中103例进行骨髓穿刺检测患儿骨髓中巨核细胞数目;(2)对患儿进行门诊及电话随访;(3)对预后影响因素进行单因素分析及多因素Logistic回归分析;(4)赋予危险因素合理的分值,计算评分高低与预后的关系。结果随访的206例儿童免疫性血小板减少症的患儿,170例预后良好,36例预后不良;其中103例行骨髓穿刺检查的患儿中,76例预后良好,27例预后不良;统计学分析结果显示两组患儿在年龄、前驱感染、有无出血、初诊时血小板数目及巨核细胞数目方面,差异有统计学意义,在性别、治疗方案方面,差异无统计学意义。在多因素Logistic回归分析中,影响预后的独立因素为年龄、有无出血、前驱感染、初诊时血小板数目及巨核细胞数目;对以上各因素进行赋分,并计算总得分,结果显示得分越低,预后越好。结论年龄、有无出血、前驱感染、初诊时血小板数目及巨核细胞数目对儿童免疫性血小板减少症的预后有重要的预测意义,可用于指导治疗。; 杨梦录孙维梅李晓花李建厂; 关键词：儿童血小板减少预后

RNAi靶向沉默CDX2基因对白血病细胞生物学行为的影响及其作用机制被引量：1: 2016年; 目的探讨小分子干扰RNA(si RNA)靶向沉默CDX2基因后对白血病细胞K562增殖、凋亡的影响,并检测BCR-ABL及相关凋亡蛋白表达量的变化,探讨其可能的作用机制。方法根据前期实验结果,成功筛选出能够特异性有效靶向沉默CDX2基因的si RNA序列(CDX2-si RNA)和相应的阴性对照序列(CDX2-si RNA-NC),应用罗氏X-treme GENE HP DNA Transfection Reagent转染K562细胞,流式细胞术检测CDX2沉默表达后对K562细胞凋亡的影响;RT-PCR法和Western Blot法分别检测BCR-ABL、Caspase-9、Bax m RNA和蛋白表达量变化。结果 MTT及流式细胞术检测显示,CDX2沉默表达后,K562细胞增殖能力减弱,凋亡率明显增加;RT-PCR和Western Blot显示,与正常细胞组和CDX2-si RNA-NC组相比,CDX2沉默表达后,CDX2-si RNA组的BCR-ABL m RNA和蛋白表达量明显降低,Caspase-9、Bax m RNA和蛋白表达量明显升高(均P<0.05)。结论 CDX2-si RNA能够明显促进白血病细胞K562凋亡,其机制可能与其抑制BCR-ABL表达,增强Caspase-9、Bax的活性有关。; 孙维梅李建厂贾秀红李有杰唐慎华; 关键词：白血病 RNA干扰 CDX2 RNA干扰

儿童急性髓系白血病的治疗进展被引量：3: 2015年; 急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）是一组异质性疾病,约占15岁以下儿童所有确诊肿瘤的15％～ 20％,在过去的几十年里,儿童AML的长期预后取得了巨大的进展.基于AML临床和生物学特征的更加完善的危险度分层,抗白血病药物更加有效的应用以及在支持治疗方面的进展使得儿童AML治愈的可能性达到了60％左右.该文就儿童AML在化疗方案和化疗药物方面的新进展作一综述.; 孙维梅李建厂; 关键词：急性髓系白血病化疗方案靶向治疗儿童

siRNA沉默CDX2基因联合化疗药物对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响被引量：2: 2016年; 目的:探讨siRNA靶向沉默CDX2基因联合长春新碱(vincristine,VCR)对白血病K562细胞增殖、凋亡的影响。方法:设计靶向沉默CDX2基因表达的特异性siRNA序列CDX2-siRNA-921和相应的阴性对照序列CDX2-siRNA-NC,分别转染K562细胞,同时设正常细胞组做对照。分别应用Real-time PCR和Western blotting法检测转染CDX2-siRNA-921对细胞内CDX2、BCR-ABL mRNA和蛋白表达的影响;siRNA和VCR单独或联合作用于K562细胞后,应用MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖抑制率、凋亡率的变化。结果:与正常细胞组相比,CDX2-siRNA-921能够显著降低目的基因CDX2和BCR-ABL mRNA与蛋白的表达(均P<0.05),而CDX2-siRNA-NC组CDX2和BCR-ABL mRNA与蛋白表达量无明显变化;与VCR组、CDX2-siRNA-NC组和VCR+CDX2-siRNA-NC组相比,VCR+CDX2-siRNA-921组细胞增殖抑制率降低,凋亡率明显增加(均P<0.05)。结论:CDX2-siRN-921能显著降低K562细胞内CDX2 mRNA和蛋白的表达,并能够下调BCR-ABL融合基因表达水平,同时增强VCR对K562细胞增殖抑制、凋亡诱导作用。; 孙维梅李建厂贾秀红李有杰唐慎华; 关键词：白血病 CDX2 BCR-ABL

假性甲状旁腺功能减退症1例: 2021年; 假性甲状旁腺功能减退症(pseudohypoparathyroidism,PHP)是一种具有甲状旁腺功能减退症的症状和特征性体征的遗传性疾病。自腺体至靶组织细胞之间任何环节的缺陷均可以引起甲状旁腺功能减退,是一种少见的家族性疾病,典型患者有独特的骨骼缺陷和发育缺陷。主要表现为Albright遗传性骨营养不良症(AHO),即身材矮小、体胖、圆脸、颈短、盾状胸;短指、畸形趾;桡骨弯曲,软组织钙化或骨化较多见。; 杨梦录王翠翠孙维梅李建厂; 关键词：假性甲状旁腺功能减退症基因突变

转染CDX2-siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的K562细胞增殖抑制率、凋亡率变化被引量：2: 2016年; 目的观察转染尾型同源盒基因(CDX2)siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖抑制率、凋亡率变化。方法将对数生长期的人慢性粒细胞白血病K562细胞,分为实验组和对照组,实验组包括A、B、C组,A组不转染,B、C组分别转染CDX2-siRNA和阴性对照序列(CDX2-siRNA-NC),然后实验组均加入60μmol/L的人参皂苷Rh2培养。对照组K562细胞常规培养。培养6、12、24、36、48 h采用MTT法测算各实验组细胞增殖抑制率;培养48 h采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法和流式细胞术测算各实验组细胞凋亡率。培养48 h时采用实时荧光定量PCR法检测各实验组细胞CDX2、Ph标记染色体或(和)BCR/ABL基因重排(BCR-ABL融合基因)mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞CDX2、BCR-ABL融合蛋白。结果培养6、12、24、36、48 h时B组细胞增殖抑制率均高于A、C组(P均<0.05)。培养48 h时A、B、C组的细胞凋亡率分别为26.50%±0.72%、73.20%±1.06%、32.00%±1.34%,B组细胞凋亡率均高于A、C组。培养48 h时,B组细胞CDX2、BCR-ABL融合基因mRNA及蛋白相对表达量均低于A、C组,P均<0.05。结论转染CDX2-siRNA并加入人参皂苷Rh2培养的人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖抑制率、凋亡率升高,这可能是转染CDX2-siRNA降低K562细胞CDX2表达,然后降低BCR-ABL融合基因表达导致的。; 李建厂孙维梅贾秀红唐慎华李晓花; 关键词：人参皂苷

微小RNA-132对白血病K562细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 2019年; 目的研究miRNA-132对白血病细胞株K562增殖、凋亡的影响,探讨其可能的作用机制。方法应用Lipofectami-ne TM 2000转染K562细胞,实时荧光定量PCR检测转染后miRNA-132的表达。CCK-8及流式细胞术检测转染后对K562细胞增殖及凋亡的影响。Western Blot法分别检测SRIT1及P53的表达量变化。结果 miRNA-132在正常细胞中的表达明显低于在K562细胞株中的表达,与空白对照组和阴性对照组相比,转染组miRNA-132的表达量明显升高。转染miRNA-132 mim-ics后,K562细胞增殖能力减弱,凋亡率明显增加。与空白对照组和miRNA-132-NC组相比,miRNA-132高表达后,转染组的SIRT1蛋白表达量明显降低,P53蛋白表达量明显升高。结论高表达的miRNA-132对白血病K562细胞有显著的增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与其增强SIRT1、P53的活性有关。; 樊云秀李建厂孙维梅陈博; 关键词：白血病 K562 增殖凋亡

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