李建厂
- 作品数:100 被引量:212H指数:7
- 供职机构:滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金:山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生哲学宗教文化科学化学工程更多>>
- Livin反义寡核苷酸对K562细胞增殖、凋亡和耐药的影响被引量:1
- 2011年
- 目的探讨Livin反义寡核苷酸(ASODN)对白血病细胞K562增殖、凋亡和耐药的影响。方法设计合成特异性的Livin硫代磷酸ASODN及其对照错义寡核苷酸(MSODN),脂质体(Lip)介导转染K562细胞,实验分为Lip-ASODN组、Lip-MSODN组、Lip对照组和细胞对照组4组,采用反转录-PCR法检测Livin mRNA的表达;四甲基偶氮唑蓝法与膜联蛋白V异硫氰酸荧光素法检测Livin ASODN与K562细胞增殖、凋亡及与高三尖杉酯碱(HHT)耐药的关系。结果 Livin ASODN可显著抑制K562细胞增殖(P<0.01),且作用具有时间和浓度依赖性。终浓度为600 nmol.L-1的Lip-ASODN能明显降低Livin mRNA表达,细胞凋亡率达(36.89±1.08)%(P<0.01),而Lip-MSODN组、Lip对照组与细胞对照组之间差异均无统计学意义(Pa>0.05)。Livin ASODN可增加K562细胞对HHT的耐药性,半数抑制质量浓度为(0.37±0.02)mg.L-1;与HHT及小剂量阿糖胞苷联合应用可显著抑制细胞增殖(P<0.01)。结论 Livin ASODN可下调Livin基因表达,有效抑制K562细胞的增殖,增加K562细胞凋亡及其对HHT的敏感性。
- 谢绍华贾秀红李建厂韩兆东刘媛媛
- 关键词:LIVIN反义寡核苷酸K562凋亡耐药
- 重症支原体细菌性肺炎病原菌分析及降阶梯治疗策略被引量:3
- 2009年
- 【目的】探讨重症支原体肺炎合并细菌性肺炎病原菌种类及成分,评价降阶梯治疗策略。【方法】对重症支原体肺炎患儿常规行痰培养及药敏试验。【结果】45例痰培养阳性患儿,革兰氏阴性菌感染占57.7%(主要为肺炎克雷伯杆菌53.8%);革兰氏阳性菌感染占42.3%(主要为肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌)。药敏结果显示,头孢吡肟、亚胺培南、万古霉素、阿米卡星和喹诺酮类药物均具有很高或较高的敏感率;青霉素类抗生素、第一、二、三代头孢菌素类均有较高的耐药。【结论】重症支原体细菌性肺炎病原菌主要为革兰氏阴性菌,革兰氏阳性菌次之。头孢吡肟可作为首选药物。降阶梯策略治疗重症支原体细菌性肺炎,住院时间缩短,住院费用减少,疗效显著。
- 段培锋贾秀红朱淑霞李建厂李晓梅王建勇
- 关键词:抗感染治疗微生物敏感性实验降阶梯疗法
- 儿童急性髓系白血病的治疗进展被引量:3
- 2015年
- 急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一组异质性疾病,约占15岁以下儿童所有确诊肿瘤的15%~ 20%,在过去的几十年里,儿童AML的长期预后取得了巨大的进展.基于AML临床和生物学特征的更加完善的危险度分层,抗白血病药物更加有效的应用以及在支持治疗方面的进展使得儿童AML治愈的可能性达到了60%左右.该文就儿童AML在化疗方案和化疗药物方面的新进展作一综述.
- 孙维梅李建厂
- 关键词:急性髓系白血病化疗方案靶向治疗儿童
- RNA干扰Apollon基因逆转白血病K562细胞多药耐药被引量:4
- 2013年
- 背景与目的:Apollon基因在白血病等多种肿瘤内高表达。本试验通过构建高效干扰Apollon基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体,探讨RNA干扰技术能否逆转人髓系白血病K562细胞多药耐药。方法:构建靶向Apollon基因真核表达载体pGPHI-GFP-Neo-Apollon,应用LipofectamineTM2000转染K562细胞,G418稳定筛选。采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、细胞免疫荧光法分别检测重组载体稳定转染K562细胞后Apollon mRNA及蛋白的表达情况;四甲基偶氮唑盐(MTT)、流式细胞术检测细胞转染前后对长春新碱(leurocristine,VCR)、足叶乙苷(etoposide,VP16)的敏感性及凋亡率的变化。结果:成功构建了pGPHI-GFP-Neo-Apollon载体并在K562细胞内稳定表达的细胞克隆,经G418筛选后,重组载体能有效沉默Apollon的表达,Apollon mRNA及蛋白表达水平明显下降。MTT结果显示,基因干扰组细胞对VCR、VP16的敏感性明显增强,其半数抑制浓度(half-inhibitory,IC50)值分别为(0.144±0.018)mg/L、(17.336±3.571)mg/L,明显低于细胞对照组(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明,基因干扰组细胞联合化疗药物后细胞凋亡率显著升高(P<0.05),而转染阴性对照组细胞凋亡率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:pGPHI-GFP-Neo-Apollon载体能显著增强VCR和VP16对白血病K562细胞的诱导凋亡作用,提高K562细胞对化疗药物的敏感性,提示RNA干扰Apollon基因表达能一定程度逆转白血病细胞的多药耐药。
- 贾秀红孝飞飞李建厂
- 关键词:白血病RNA干扰多药耐药性K562细胞
- ShRNA靶向沉默HOXA10基因对U937细胞增殖和凋亡的影响被引量:3
- 2012年
- 目的探讨慢病毒载体介导短发夹RNA(shRNA,siRNA前体)靶向沉默HOXA10基因对U937细胞增殖、凋亡和形态的影响。方法设计并构建4条针对HOXA10基因的shRNA质粒表达载体,并构建HOXA10基因的过表达质粒,将4条干扰质粒分别和过表达质粒共转染293T细胞,用Western blot检测出敲减效果最好的1条质粒并包装成慢病毒(lenti-shHOXA10);将U937细胞分为干扰组(lenti-shHOXA10)、阴性对照组(lenti-NC)和未处理组,通过流式细胞仪测定慢病毒对U937细胞的感染效率并用real-time PCR、Western blot方法测定对HOXA10基因的沉默作用;瑞氏染色观察3组细胞形态上的变化;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测3组细胞凋亡率。结果成功构建了有效沉默HOXA10基因的慢病毒-shRNA载体。干扰组HOXA10 mRNA的沉默效率为(92.3±1.3)%,蛋白表达水平下降91.1%,干扰组细胞抑制率为(43.9±0.7)%,与阴性对照组、未处理组相比差异有统计学意义(P<0.05);瑞氏染色显示干扰组细胞核质比减小、核分裂相少见;干扰组细胞凋亡率为(27.1±1.4)%,显著高于阴性对照组的(19.4±1.9)%和未处理组的(5.5±1.3)%(P<0.05)。结论慢病毒载体介导的shRNA可稳定地降低HOXA10基因的表达水平,有效抑制U937细胞增殖和促进其凋亡,HOXA10基因有望成为白血病基因治疗的新靶点。
- 张艳君贾秀红李建厂徐酉华
- 关键词:HOXA10基因慢病毒RNA干扰U937细胞
- 端粒酶及其抑制剂在白血病中的研究进展
- 2004年
- 白血病是一类严重威胁健康和生命安全的疾病,在儿童恶性疾病中发病率居首位。寻找有效的检测治疗方法是控制疾病的关键。端粒、端粒酶是近年来肿瘤研究的热点之一。该文主要综述了端粒酶在白血病细胞中的表达,端粒酶活性与预后的关系,端粒酶抑制剂的研究进展。研究表明,端粒酶在大多数白血病细胞中高表达,是一个重要的检测位点,对观察病情和估计预后有较大帮助。端粒酶活性抑制剂目前处于体外试验阶段,已取得重大进展,有望成为白血病治疗的一个新靶点。
- 李建厂徐酉华
- 关键词:白血病
- 黄芪注射液对U937细胞增殖与凋亡的影响及相关机制的探讨被引量:7
- 2013年
- 目的研究不同浓度黄芪注射液对白血病细胞株U937增殖、凋亡的影响,并初步探讨其相关分子机制。方法白血病细胞株U937随机分为实验组(分别采用不同浓度黄芪注射液62.5、125、250、500、1000μg/mL处理U937细胞)和对照组(不加黄芪注射液)。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖能力,FITC-PI双染法流式细胞术检测各组细胞的凋亡,Hoechst33258染色后荧光显微镜下观察各组细胞形态学变化;U937细胞加入1000μg/mL黄芪注射液后0 h、12 h、24 h、48 h,采用RT-PCR法检测c-myc、p27 mRNA的表达。结果与对照组相比,不同浓度黄芪注射液均能抑制U937细胞增殖,差异均具有统计学意义(P<0.05);不同浓度黄芪注射液均能诱导U937细胞凋亡,较对照组显著增多(P<0.05),黄芪注射液浓度为1000μg/mL时凋亡率可达(63±4)%;黄芪注射液作用于U937细胞,随时间延长,c-myc mRNA表达逐渐下降,p27 mRNA表达逐渐增强,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论黄芪注射液体外可有效抑制白血病细胞株U937增殖,并诱导其凋亡,其相关分子机制可能与下调c-myc基因和上调p27基因表达有关。
- 贾秀红尹宝慧李建厂
- 关键词:黄芪注射液白血病细胞增殖细胞凋亡白血病细胞株
- 儿童Evans综合征1例被引量:2
- 2009年
- 王建勇李建厂朱淑霞田春梅段培锋
- 关键词:EVANS综合征溶血性贫血COOMBS试验甲基泼尼松龙
- 同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病中的表达及其临床意义
- 目的:研究同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病(AL)患儿骨髓单个核细胞中的表达,并探讨其临床意义.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测52例不同时期AL患儿HOXA9 mRNA的表达水平,以15例特...
- 贾秀红朱立平李建厂王翠翠
- 关键词:急性白血病儿童患者骨髓单个核细胞
- 西咪替丁治疗轮状病毒肠炎患儿前后血清细胞因子的变化被引量:2
- 2009年
- 【目的】研究西咪替丁对轮状病毒(rotavirus,RV)肠炎患儿血清细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α的影响及其治疗效果。【方法】RV肠炎患儿75例,随机分为治疗组(n=38)和对照组(n=37)。两组在补液、调整饮食、微生态疗法等常规治疗的基础上,治疗组用西咪替丁10 mg/(kg.d)静滴;对照组应用抗病毒药物治疗。采用ELISA双抗体夹心法检测治疗前后血清IL-2I、FN-γ、TNF-α水平。观察大便次数、性状及全身症状的恢复时间及3项指标的变化。【结果】治疗组、对照组显效率(治疗3 d)分别为94.7%和64.7%,总治愈率分别为97.4%和78.4%,差异有显著性(P<0.05)。两组治疗后血清IL-2较治疗前明显升高(P<0.01),TNF-α较治疗前明显降低(P<0.01)。治疗组IFN-γ较治疗前明显降低(P<0.01),对照组IFN-γ治疗前后无明显变化(P>0.05)。治疗组均较对照组变化明显(P<0.01)。【结论】IL-2I、FN-γ、TNF-α参与RV肠炎的炎症反应。西咪替丁治疗RV肠炎有效,与调节机体炎症免疫反应有关。
- 贾秀红朱淑霞李建厂段培锋谢庆芝李晓梅
- 关键词:西咪替丁轮状病毒肠炎细胞因子类