李爽
- 作品数：13 被引量：26H指数：3
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>
- Sqt-1的5'端侧翼序列在旋毛虫rol6基因中的启动功能验证
- 2016年
- 为验证秀丽隐杆线虫(C.elegans)sqt-1的5'端侧翼序列(5'-FSsqt-1)是否具有启动旋毛虫(T.spiralis)基因表达的功能,本研究采用PCR方法从C.elegans全基因组DNA中扩增5'-FSsqt-1,并将其克隆至以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的C.elegans启动子验证载体p PD95.77中,构建重组质粒p PD-sqt-GFP。将T.spiralis表皮胶原蛋白rol6编码序列克隆至5'-FSsqt-1下游,构建重组质粒p PD-sqt-rol6-GFP。通过显微注射法将p PD-sqt-GFP和p PD-sqt-rol6-GFP分别转入C.elegans体内,进行荧光观察及western blot鉴定。结果显示,T.spiralis表皮胶原蛋白Rol6能够在C.elegans体内获得表达。研究表明,5'-FSsqt-1具有启动T.spiralis基因表达的功能,为T.spiralis基因在C.elegans体内表达奠定了基础。
- 李爽路佳琦万悦毛贻贤孔令杰武文浩黄大鹏路义鑫
- 关键词：显微注射
- 4种ELISA检测奶牛O型口蹄疫免疫抗体的比较试验被引量：2
- 2010年
- 张润祥高明春李爽王君伟
- 关键词：O型口蹄疫ELISA检测免疫抗体奶牛世界动物卫生组织口蹄疫病毒
- Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白B细胞线性表位的鉴定被引量：4
- 2009年
- 为了对Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白进行抗原表位作图,设计了7个相互重叠15个氨基酸、覆盖整个VP2蛋白的重叠短肽,经克隆并在大肠杆菌中实现了融合表达。用Asia1型口蹄疫感染血清对7个融合蛋白进行免疫印迹分析,结果初步鉴定出VP2蛋白B细胞线性抗原表位位于氨基末端的第1-44氨基酸区域,并且证实O型、A型、C型口蹄疫标准血清和感染SAT2型口蹄疫康复期的牛血清也能识别融合蛋白F1(1-44 aa)。在此基础上,针对F1(1-44 aa)短肽,设计了6个相互重叠5个氨基酸的短肽片段,进一步鉴定出了VP2蛋白B细胞线性表位位于氨基末端的第6-15氨基酸区域。
- 徐宗香高明春李勐李爽刘思莹葛兰云张润祥马波王君伟
- 关键词：口蹄疫病毒VP2蛋白
- 区分马流感和马鼻肺炎感染的分子生物学检测技术研究
- ＜正＞背景马鼻肺炎和马流感是两种主要的马呼吸道传染病。Ⅰ型和Ⅳ型马疱疹病毒（EHV-1,EHV-4）是引起马呼吸道疾病、流产和神经系统疾病的主要病原。由疱疹病毒引起的疾病在临床上也称之为马鼻肺炎。马流感是由马A型流感病毒...
- 胡哲初晓雨常浩王美月李爽王晓钧
- 一株Asia1型口蹄疫病毒的全基因组序列测定及比较分析被引量：2
- 2008年
- 参考GenBank上已发表的口蹄疫病毒(FMDV)全长基因组序列,设计了覆盖基因组全长的数对引物,通过RT-PCR方法对1株Asia 1型(简称As01)FMDV进行分段克隆及序列测定,将测序结果利用软件进行拼接。结果表明,该毒株的FMDV基因组[不含poly(C)]全长8 180 nt,其中编码区为6 987 nt,5'和3'非编码区(UTR)分别为1 078 nt和95 nt,3'UTR之后为20 nt的poly(A)尾巴。将As01株与其他FMDV参考毒株利用分子生物学软件进行多序列比对分析表明,As01株与Asia 1/Jiangsu/China/2005、Asia 1/Isrl/3/63、ZB/CHA/58等Asia 1型FMDV遗传进化关系较为密切,而与O型和A型FMDV遗传关系较远。
- 李爽李勐高明春于力周国辉王君伟
- 关键词：口蹄疫病毒基因组
- 旋毛虫Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂的表达及免疫相关性被引量：5
- 2015年
- 根据GenBank上旋毛虫Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂(KaSPI)基因编码序列设计特异性引物,进行RT-PCR扩增,将所获PCR产物克隆至pEASY-T1载体后转入克隆感受态Tans5α,经过PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定后进行测序。将所获目的基因与载体pET-30a(+)相连接,然后将鉴定正确的重组表达质粒pET-TsKaSPI转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,利用IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE电泳分析所得融合蛋白大小约为38 000,与预测蛋白理论值大小相符,主要以包涵体形式存在。对纯化后的重组蛋白进行Western blot鉴定,结果显示该蛋白可以被感染旋毛虫小鼠阳性血清所识别,具有良好的抗原性。将纯化的重组蛋白经腹腔注射到小鼠体内检测其对小鼠的免疫保护性,结果表明,旋毛虫肌幼虫减虫率为38.3%。通过间接ELISA法检测血清抗体水平,结果显示重组蛋白免疫小鼠血清的抗重组蛋白抗体IgG总体水平显著高于感染对照组和佐剂组。
- 马静李达孔令杰刘畅李爽毛贻贤杜娟路义鑫
- 关键词：旋毛虫免疫保护性
- 白细胞介素-2及其应用的研究进展被引量：3
- 2013年
- 白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)主要是由激活的T淋巴细胞产生的一类重要的细胞因子,在机体免疫方面具有重要作用。因此它一直是研究得最为广泛的细胞因子之一。本文主要就IL-2的生物学特性,与免疫抑制的关系,作为免疫增强剂和免疫治疗剂,以及用于构建新型基因工程疫苗等进行了综述。
- 李爽
- 关键词：白细胞介素-2细胞因子免疫
- 口蹄疫病毒非结构蛋白3AB单克隆抗体的制备及其对应表位区分析被引量：1
- 2011年
- 为鉴定口蹄疫病毒(FMDV)的非结构蛋白3AB的抗原表位,本研究以原核表达并纯化的FMDV 3AB重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,获得6株能够稳定分泌抗3AB蛋白特异性单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞。这6株MAbs亚类鉴定均为IgG1型,轻链均为κ链。间接免疫荧光试验结果表明,这6株MAbs均能够识别FMDV 3AB蛋白。采用制备的MAb对分段表达的3AB蛋白进行western blot分析,结合位点分别位于3AB的第aa 55～aa 70、aa 64～aa 79、aa 130～aa 145区段。该结果为进一步探索3AB蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。
- 刘丹丹高明春宋军宋鸽曹永生张润祥李爽于力王君伟
- 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体
- 口蹄疫病毒的实验诊断技术研究进展
- 2013年
- 口蹄疫（footandmouthdisease，FMD）是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。目前，口蹄疫是全球最重要的动物健康问题之一，世界大部分地区时有发生，常在牛群及猪群大范围流行。此病的致死率很低，但是感染率很高。发病的主要症状为：口腔粘膜、舌面、唇、鼻镜、蹄叉、乳头等部位发生水疱，破溃形成烂斑，病畜蹄痛卧地、严重者蹄壳边缘溃裂或脱壳。不同动物的症状稍有不同，怀孕母牛可能流产，而后导致繁殖力降低，猪则以破蹄为最主要症状，山羊和绵羊的症状通常比牛温和。口蹄疫的大规模流行，
- 李爽
- 关键词：口蹄疫病毒生物学实验血清学分子生物学
- 牛Asia 1型口蹄疫病毒感染性克隆的构建被引量：2
- 2009年
- 本研究在完成Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)As01株全基因组测序的基础上,采用融合PCR扩增得到含有15个C碱基的5′端片段(约1800bp),并利用长片段PCR扩增得到基因组3′端片段(约6700bp)。再利用单一的酶切位点将2个片段克隆到pBluescript SK载体中,从而获得携带As01株基因组全长cDNA的重组质粒pBSAs。将该质粒线性化后作为模板体外转录并转染BHK-21细胞,可观察到典型的细胞病变。对收获的病毒采用RT-PCR、间接免疫荧光和电镜观察等检测及鉴定,结果表明,拯救出了具有感染性的Asia1型FMDV。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力(LD50)差异不显著,具有相似的生物学特征。该感染性克隆的构建,为深入研究FMDV的致病机理及开发新型疫苗提供了有效的反向遗传操作平台。
- 李爽张润祥宋鸽高明春刘湘涛王君伟
- 关键词：口蹄疫病毒全长CDNA感染性克隆病毒拯救体外转录
