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霍乱毒素B亚单位和旋毛虫幼虫抗原诱导黏膜免疫结果分析被引量：2: 2005年; 目的探讨黏膜佐剂霍乱毒素B 亚单位（CT-B ）在激发旋毛虫感染的黏膜免疫中的作用。方法24只NI H 小鼠随机分为4 组，每组6 只。CT-B 免疫组：每只小鼠于0 、7 、14 d 用含幼虫抗原100 μg 、C T-B 10 μg 的免疫原200 μl 经口灌服；正常对照组；免疫后感染组：免疫方法同CT-B 免疫组，末次免疫后第7 天，每只小鼠用200 条旋毛虫进行感染；单纯感染组：不免疫，与免疫后感染组同时进行感染。CT 蛳B 免疫组与正常对照组在免疫后第7 天、免疫后感染组与单纯感染组在感染后第7 天分别取血检测Ig A 、Ig G 1 、Ig G 2 b ，刮取肠黏液检测sIgA ，检测肠道成虫数，并收集每鼠雌虫，在体外检查其生殖力。结果与单纯感染组相比，CT-B 免疫后感染组肠道成虫数明显减少，雌虫生殖力明显降低，成虫与新生幼虫减虫率分别为88.2%和72.4%。CT-B 免疫组小鼠肠黏液sIg A 、血清Ig A 较对照组小鼠明显提高(0 .2 9 ±0 .04 vs 0.09 ±0.02，0.21 ±0.06 vs 0.08 ±0.01，P <0.001)；而两组Ig G 1 和Ig G 2 b 水平无显著性差异(P>0.05)。CT-B 免疫后感染组小鼠肠黏液sIg A 、血清Ig A 较单纯感染组小鼠相比有显著性差异(0 .5 5 ±0 .28 vs0.08 ±0.15，0.33 ±0.06 vs 0.10 ±0.10，P <0.001)。; 田小军薛燕萍黄敏君; 关键词：霍乱毒素B亚单位黏膜免疫

弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定: 2014年; 目的在大肠杆菌工程菌中重组表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白5(ROP5)的融合蛋白GST-6×His-ROP5,并初步评价重组蛋白的抗原性。方法体外细胞培养弓形虫速殖子,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增ROP5基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后通过Western blotting鉴定重组蛋白rROP5的抗原性。结果构建了弓形虫ROP5全基因重组表达质粒,诱导表达了GST-6×His-ROP5融合蛋白,分子量为96 kDa,与预测结果相符,重组蛋白与人源抗血清有显著免疫印迹反应。结论本研究获得了弓形虫ROP5全长重组蛋白,为进一步改进弓形虫诊断抗原,研究蛋白结构以及分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。; 薛峰黄敏君洪彩玲杨英超甘绍伯谷俊朝; 关键词：刚地弓形虫抗原性

刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达被引量：3: 2013年; 目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。; 黄敏君薛峰洪彩玲孙岚甘绍伯谷俊朝; 关键词：刚地弓形虫原核表达

70株志贺菌属血清分型及耐药分析被引量：7: 2007年; 目的分析医院细菌性痢疾的流行菌株类型及耐药特点。方法对医院肠道门诊腹泻患者的粪便标本进行细菌分离培养、鉴定和血清分型,并以K-B琼脂法进行药敏实验。结果在检出的70株志贺菌属中,弗氏志贺菌37株、宋内志贺菌33株,未分离出志贺菌属的其他型别;70例菌株对传统抗菌药物中的四环素、复方新诺明、氨苄西林、利福平、萘啶酸的耐药率均>62%,对喹诺酮类的常用药诺氟沙星耐药率较低为12.8%,而头孢类的耐药率<10%。结论医院细菌性痢疾流行株主要是弗氏志贺菌和宋内志贺菌,多重耐药率较高,达到77.1%,临床治疗可首选头孢菌素类药物,庆大霉素和诺氟沙星次之。; 李威栗绍刚郑晓燕黄敏君温艳阴赪宏; 关键词：志贺菌属血清分型耐药性

钩端螺旋体聚Beta羟基丁酸(PHB)生物合成途径分析被引量：2: 2013年; 【目的】致病型问号钩端螺旋体(问号钩体,Leptospira interrogans)和腐生型双曲钩体(L.biflexa)能够大量合成菌体内贮藏物,这可能是钩体在营养贫瘠环境中长时间存活的主要原因之一。本研究对钩体聚Beta羟基丁酸(PHB)贮藏物进行定性定量测定,通过基因组分析补充定义PHB合成主要功能基因,并采用分子生物学方法初步证明PHB合成途径的完整性,为进一步研究PHB合成与钩体抗逆能力的关系奠定基础。【方法】采用脂类特异性尼罗红染色法和浓硫酸氧化-紫外分光光度计测定法,对问号钩体和双曲钩体的PHB贮藏物进行定性定量测定;采用生物信息学方法(BLAST和InterProscan/InterPro2Go),通过同源性分析和功能结构域搜索寻找钩体基因组中的PHB合成相关基因;最后采用克隆测序和定量RT-PCR技术检测相关基因表达情况,初步验证生物信息学预测结果。【结果】尼罗红染色和氧化后比色定量实验证明钩体合成细菌常见贮藏物PHB,问号钩体合成量为菌体干重的42%45%,双曲钩体合成量为64%68%。尽管已公布的多个钩体基因组中均没有定义完整的PHB合成途径,但本研究通过综合生物信息学分析,在问号钩体和双曲钩体中鉴定了PHB合成途径的主要功能基因(phbC)。克隆测序和定量RT-PCR证实钩体转录表达大部分PHB合成相关基因(phbA/B/C),说明钩体内该生物途径基本完整,且部分高水平表达基因可能是钩体主要的PHB合成相关基因。【结论】问号钩体和双曲钩体均可合成PHB贮藏物,且具有基本完整的PHB合成生物途径。; 薛峰刘媛洪彩玲孙岚辛德莉温艳黄敏君谷俊朝; 关键词：钩端螺旋体抗逆能力

钩虫病致上消化道出血1例被引量：5: 2011年; 本文回顾了1例钩虫病致上消化道出血病例被误诊误治的情况,分析了误诊原因,旨在加深临床医师对钩虫病流行病学及临床表现的认识,提高诊治水平。; 黄敏君孙岚郭增柱; 关键词：钩虫病上消化道出血

中国耶氏肺孢子虫基因型的初步分析: 2007年; 为研究我国耶氏肺孢子虫的基因分型，利用巢式PCR方法扩增24例肺孢子虫肺炎（PCP）患者支气管肺泡灌洗液中的耶氏肺孢子虫（Pneumocystis jiroveci）核糖体DNA内转录间隔区（ITS1-5.8S rDNA-ITS2）基因。纯化回收目的片段，将其克隆到PMD18-T载体，并导入JM109细胞系中，每个标本制备3～5个克隆，提取质粒测序。从19例患者的标本中检出ITS1-5.8SrDNA-ITS2基因，其中12份标本的25个克隆的测序结果可用于基因分型。经与Lee等（1998）的分型标准进行比对，本组病例耶氏肺孢子虫的ITS1分为B、E、I、N4型，最常见的为E型；ITS2分为a、b、e、h、i、n6型，最常见的为i型；ITS基因分9型，以Bi多见，有2份标本存在混合感染。; 李淑珍黄敏君安亦军卢思奇郭增柱; 关键词：肺孢子虫核糖体DNA 内转录间隔区基因型

用于检测黄热病毒血清中和抗体的试剂盒: 本发明公开了一种用于检测黄热病毒血清中和抗体的试剂盒。其中的试剂组为包被黄热病毒E蛋白人源中和抗体5A、黄热病毒E蛋白、5A抗体标准品、一抗、二抗、阴性对照及阳性对照。本发明对黄热病毒中和抗体检测的特异性强，灵敏度高，无...; 杨光黄敏君郭东星李晶晶

1341例疑似肺孢子菌肺炎非HIV阳性患者病原学诊断分析被引量：6: 2016年; 目的探讨六亚甲基四胺银(gomori’s methenamine silver,GMS)染色镜检法和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测肺孢子菌肺炎(pneumocystis pneumonia,PCP)患者标本的阳性率,为临床提供更有利的实验室支持依据。方法采集1341例疑似PCP患者的深部诱导痰或支气管肺泡灌洗液(broncho-alveolar lavage fluid,BALF)标本,GMS镜检法和PCR法相结合检测肺孢子菌,任何一种方法检测阳性,即判断为PCP。结果共285例诊断为PCP,其中114例为GMS染色镜检法阳性,282例为PCR法检测阳性,111例为2种检测方法双阳性,3例为GMS染色镜检法单独阳性(均为肾移植术后BALF样品),171例为PCR方法单独阳性。深部诱导痰标本中,GMS染色镜检法和PCR法阳性检出率分别为5.1%和16.2%(P<0.05);而BALF标本二者的阳性检出率分别为23.3%和42.2%(P<0.05)。未知原因发热合并肺炎患者和器官移植后接受免疫抑制剂治疗者有更高的阳性检出率。结论 PCR法检测PCP阳性率高于GMS染色镜检法,PCR法检测与GMS染色镜检法结合诊断PCP对临床具有较高指导价值。; 李晶晶邹洋安亦君齐志群李小丽王磊黄敏君; 关键词：肺孢子菌肺炎病原学聚合酶链式反应

黏膜佐剂鼻内免疫抗旋毛虫感染作用的探讨: 2003年; 目的研究黏膜佐剂霍乱毒素B亚单位(CT-B)经鼻内免疫诱发旋毛虫感染的黏膜免疫。方法 24只NIH小鼠随机分为四组,即:①CT-B免疫组(CT-B);②正常对照组(C);③CT-B免疫感染组(CT-B+INF);④单纯感染组(INF)。CT-B组和CT-B+INF组每周经鼻免疫1次(幼虫抗原100μg、CT-B10μg),共3次,末次免疫后1周,CT-B+INF组和INF组同时给予200条旋毛虫幼虫攻击感染,感染后一周,检查小鼠肠道成虫数、雌虫生殖力。CT-B组与C组于CT-B组末次免疫后7日,CT-B+INF组与INF组于攻击感染后7日,对各组小鼠血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG),肠黏液分泌型免疫球蛋白A(sIgA)进行比较。结果与单纯感染组相比,CT-B+INF组肠道成虫数明显减少,雌虫生殖力明显降低,成虫与新生幼虫减虫率分别为89.95％和74.93％。CT-B+INF小鼠肠黏液sIgA、血清IgA较对照组小鼠明显提高(0.29±0.07vs0.09±0.02,0.25±0.09vs0.08±0.01,P<0.001);而两组IgG1和IgG2b水平无显著性差异(P>0.05)。CT-B+INF组小鼠肠黏液sIgA、血清IgA较INF组小鼠相比有显著性差异(0.78±0.25vs0.08±0.15,0.42±0.10vs0.10±0.10,P<0.001),而两组IgG1和IgG2b水平无显著性差异(P>0.05)。结论本研究显示CT-B不仅能提高局部黏膜sIgA水平诱导局部免疫应答,还能提高IgA水平诱导全身?; 田小军薛燕萍黄敏君; 关键词：黏膜佐剂旋毛虫感染霍乱毒素B亚单位鼻黏膜免疫

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黄敏君

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