孙岚
- 作品数：27 被引量：65H指数：5
- 供职机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- EB病毒编码的小RNA荧光双重标记技术的建立被引量：4
- 2020年
- 目的利用原位杂交联合免疫荧光建立EB病毒编码的小RNA(EBER)的荧光双重标记方法。方法收集2018年12月至2019年11月于首都医科大学附属北京友谊医院病理科诊断为淋巴瘤患者的蜡块20例,其EBER原位杂交检测结果均为阳性。每例取蜡块进行连续切片,每例切片2张,其中1张切片进行荧光双重标记,另1张作为阴性对照。通过荧光显微镜查看双重荧光标记的效果。结果荧光双重标记成功后细胞和组织结构完整。原位杂交联合免疫荧光阳性的细胞核呈绿色荧光,免疫荧光阳性的细胞膜呈红色荧光,双重标记阳性细胞的膜与核红绿荧光对比鲜明。结论建立了一种新的EBER荧光双重标记方法,且此方法可以用于判断EB病毒感染的细胞属于B细胞还是T细胞,有助于淋巴瘤的诊断。
- 毕阔梅雪周小鸽孙岚刘伟
- 关键词：原位杂交免疫荧光
- 刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA2全基因的原核重组表达被引量：3
- 2013年
- 目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白2(GRA2)的全长基因,在大肠埃希菌工程菌中重组表达GST-HisGRA2融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA2基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠埃希菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,然后采用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白产物。结果 PCR鉴定弓形虫GRA2全基因重组表达质粒构建正确;诱导表达的GSTHis-GRA2融合重组蛋白分子质量单位为52ku,与预测值相符。结论本研究成功构建了弓形虫GRA2全基因重组蛋白质粒,该质粒能表达GRA2蛋白,为研究GRA2与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
- 黄敏君薛峰洪彩玲孙岚甘绍伯谷俊朝
- 关键词：刚地弓形虫原核表达
- 钩端螺旋体聚Beta羟基丁酸(PHB)生物合成途径分析被引量：2
- 2013年
- 【目的】致病型问号钩端螺旋体(问号钩体,Leptospira interrogans)和腐生型双曲钩体(L.biflexa)能够大量合成菌体内贮藏物,这可能是钩体在营养贫瘠环境中长时间存活的主要原因之一。本研究对钩体聚Beta羟基丁酸(PHB)贮藏物进行定性定量测定,通过基因组分析补充定义PHB合成主要功能基因,并采用分子生物学方法初步证明PHB合成途径的完整性,为进一步研究PHB合成与钩体抗逆能力的关系奠定基础。【方法】采用脂类特异性尼罗红染色法和浓硫酸氧化-紫外分光光度计测定法,对问号钩体和双曲钩体的PHB贮藏物进行定性定量测定;采用生物信息学方法(BLAST和InterProscan/InterPro2Go),通过同源性分析和功能结构域搜索寻找钩体基因组中的PHB合成相关基因;最后采用克隆测序和定量RT-PCR技术检测相关基因表达情况,初步验证生物信息学预测结果。【结果】尼罗红染色和氧化后比色定量实验证明钩体合成细菌常见贮藏物PHB,问号钩体合成量为菌体干重的42%45%,双曲钩体合成量为64%68%。尽管已公布的多个钩体基因组中均没有定义完整的PHB合成途径,但本研究通过综合生物信息学分析,在问号钩体和双曲钩体中鉴定了PHB合成途径的主要功能基因(phbC)。克隆测序和定量RT-PCR证实钩体转录表达大部分PHB合成相关基因(phbA/B/C),说明钩体内该生物途径基本完整,且部分高水平表达基因可能是钩体主要的PHB合成相关基因。【结论】问号钩体和双曲钩体均可合成PHB贮藏物,且具有基本完整的PHB合成生物途径。
- 薛峰刘媛洪彩玲孙岚辛德莉温艳黄敏君谷俊朝
- 关键词：钩端螺旋体抗逆能力
- 钩虫病致上消化道出血1例被引量：5
- 2011年
- 本文回顾了1例钩虫病致上消化道出血病例被误诊误治的情况,分析了误诊原因,旨在加深临床医师对钩虫病流行病学及临床表现的认识,提高诊治水平。
- 黄敏君孙岚郭增柱
- 关键词：钩虫病上消化道出血
- 颈部淋巴结肿大
- 2021年
- 淋巴浆细胞淋巴瘤(LPL)是由小B淋巴细胞、浆细胞样淋巴细胞和浆细胞组成的肿瘤,可累及骨髓、淋巴结和脾脏等部位。骨髓穿刺活检多见,淋巴结为首次活检诊断极具挑战性。该文讨论肺癌术后多发淋巴结肿大病例,形态学上滤泡间区大量浆细胞及小淋巴细胞,免疫表型支持B细胞和浆细胞,分子检测B细胞克隆性重排和MYD88突变。LPL形态学及免疫表型与其他小B细胞淋巴瘤类似,给临床病理诊断带来困难,容易造成误诊或漏诊,需提高警惕。
- 谢建兰孙岚周小鸽
- 关键词：颈部淋巴结肿大临床病理诊断小淋巴细胞活检诊断肺癌术后浆细胞
- 中国耶氏肺孢子菌主要表面糖蛋白UCS基因分型研究被引量：1
- 2015年
- 目的以主要表面糖蛋白上游保守区UCS基因对中国耶氏肺孢子菌进行基因多态性分析。方法用巢式PCR扩增127例耶氏肺孢子菌感染患者呼吸道标本中主要表面糖蛋白上游保守区UCS基因,通过DNA直接测序获得该基因的序列,并随机选取部分标本经过克隆测序,分析其UCS串联重复区序列的特征,并分析不同患者人群中基因多态性分布。结果共获得97例（占76.4%）患者标本的UCS基因序列,依据串联重复单元的数目、序列不同得到2~5个重复的7种基因型,其中基因型1,2,3（占68.04%）最为常见,其次为基因型1,2,3,3（占21.65%）。在6组患者中,基因型1,2,3亦最为常见。结论本研究获得了我国耶氏肺孢子菌UCS基因多态性的基础资料,为进一步分析耶氏肺孢子菌的遗传学、流行病学提供了依据。
- 孙岚黄敏君郭增柱王建成
- 关键词：基因分型
- 循环荧光原位杂交在淋巴瘤诊断中的价值研究被引量：1
- 2022年
- 目的在单张淋巴瘤石蜡切片上建立循环荧光原位杂交检测的方法,为需要多基因检测的淋巴瘤患者在组织或切片不足的情况下提供及时有效的诊断。方法回顾性收集2020年1月至2021年5月首都医科大学附属北京友谊医院病理科(北京市临床医学研究所淋巴瘤诊断研究中心)和外院会诊的淋巴瘤病例共27例,其中本院10例,外院会诊17例。27例均进行过MYC、BCL2和BCL63种基因的FISH检测,每例切片3张。根据杂交的不同将实验分为3组:杂交1组(HG1):将3张切片分别滴加MYC、BCL2、BCL6探针并按我科室常规荧光原位杂交方法操作。杂交2组(HG2):将HG1组中杂交MYC探针的切片使用本文介绍的循环荧光原位杂交方法,滴加BCL2探针进行第2次杂交。杂交3组(HG3):将HG2组的切片用循环方法滴加BCL6探针进行第3次杂交。观察3组切片红、绿荧光信号的有无、信号模式及组织、细胞结构情况。结果HG2组和HG3组循环荧光原位杂交的成功率均为100%。循环杂交后,HG2组中BCL2基因和HG3组中BCL6基因断裂阳性、阴性及扩增病例与HG1组完全相符,每张切片上基因表达异常的细胞数目与HG1组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HG2组和HG3组在循环杂交后,切片上的组织结构完整,细胞轮廓清晰,信号明亮清晰、定位准确。结论循环荧光原位杂交检测法可以在同一张切片上多次杂交不同的基因探针,方法简便,成功率高,结果准确,可有效解决淋巴瘤患者因组织或切片不足而无法进行多基因检测的问题,在淋巴瘤诊断中具有实用价值。
- 滕孝静刘伟毕阔孙岚王照情杨璐晶
- 关键词：原位杂交荧光淋巴瘤
- 荧光原位杂交和原位杂交联合免疫荧光检测EBER的可行性比较被引量：6
- 2018年
- 目的探讨利用荧光原位杂交(FISH)和原位杂交(ISH)联合免疫荧光(IF)两种方法检测EB病毒编码的小RNA(EBER)的可行性。方法收集首都医科大学附属北京友谊医院病理科2016年7月至2017年1月诊断的淋巴瘤患者20例,EBER原位杂交检测均为阳性。每例取蜡块进行切片,每张厚3μm,4张连续切片分为四组:荧光原位杂交及其阴性对照,原位杂交联合免疫荧光及其阴性对照。通过荧光显微镜查看两种荧光方法的效果。结果利用荧光原位杂交与原位杂交联合免疫荧光的方法检测EBER,均可以使EBER阳性细胞显示出阳性绿色荧光信号,且阴性对照无阳性荧光信号。后者更敏感,背景更少。结论荧光原位杂交与原位杂交联合免疫荧光这两种方法都可以有效地应用于EBER的检测,且这两种方法可能会成为EB病毒相关疾病诊断的实验室检查方法。
- 毕阔滕孝静刘伟孙岚周小鸽
- 关键词：荧光原位杂交原位杂交
- 实时定量PCR技术诊断PCP的研究进展被引量：5
- 2011年
- 肺孢子菌肺炎（PCP）是一种由耶氏肺孢子菌引起的致死性肺炎,常见于免疫功能低下人群,早期诊断有助于临床治疗.目前常用的病原学检查漏诊率较高;定性PCR检测虽然敏感,但有时难以区分隐性感染和显性感染.实时定量PCR是近年来发展的一种精确、敏感、污染少的核酸定量技术.本文综述结果表明,实时定量PCR技术能快速、敏感、特异地检测肺孢子菌,可随时跟踪监测PCP的治疗效果,指导临床用药,有助于PCP的流行病学研究及其他基础生物学研究.
- 孙岚黄敏君郭增柱
- 关键词：肺孢子菌肺孢子菌肺炎机会性感染实时定量PCR
- 抗肺孢子虫药物的研究进展
- 2008年
- 肺孢子虫（Pneumocystis）是一种机会性致病真菌，能引起免疫力低下宿主严重的肺孢子虫肺炎（Pneumocystis pneumonia，PCP）。近年来，随着艾滋病、器官移植、放，化疗肿瘤患者等高危人群的增加，PCP发病呈明显上升趋势。开发新药物或老药新用以治疗、预防PCP成为研究热点。本文对近年来抗肺孢子虫药物及其筛选技术的研究进展进行综述。
- 孙岚许炽熛郭增柱
- 关键词：肺孢子虫肺炎免疫力低下致病真菌器官移植高危人群
