周宁
- 作品数：12 被引量：144H指数：7
- 供职机构：上海中医药大学附属普陀医院更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 健脾解毒方通过抑制环氧化酶2下调幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞血管内皮生长因子表达被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨健脾解毒方对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染胃癌细胞诱导的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的调控作用及可能的机制。方法:采用Hp标准株NCTC11637与人胃癌MKN45细胞共培养的方法感染MKN45细胞,实验中共分7组:对照组、Hp感染组、NS398抑制组、空白血清组和5%、10%、20%健脾解毒方药物血清组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测Hp感染对人胃癌MKN45细胞VEGF和环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA表达的影响及健脾解毒方血清对Hp感染诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF和COX-2mRNA表达的影响;采用COX-2特异性抑制剂NS398(50μmol/L)抑制COX-2的表达后,检测Hp感染后人胃癌MKN45细胞VEGF mRNA表达的变化。结果:与对照组比较,Hp感染MKN45细胞6h后,Hp感染组COX-2mRNA的表达明显上调(P<0.01);感染12h后,VEGF mRNA表达亦明显上调(P<0.01);而采用COX-2特异性抑制剂NS398抑制COX-2表达后,Hp感染组VEGF mRNA的表达相比抑制前明显下调(P<0.01)。与Hp感染组比较,5%、10%和20%健脾解毒方药物血清均可下调Hp诱导的人胃癌MKN45细胞VEGF和COX-2mRNA的表达,并呈一定的剂量依赖效应。结论:Hp感染可诱导人胃癌细胞VEGF和COX-2表达,健脾解毒方通过下调COX-2表达进而下调VEGF的表达,这可能是其防治胃癌的重要作用机制之一。
- 刘宁宁周宁王炎刘宣周利红吴琼孙珏范忠泽李琦
- 关键词：健脾解毒方胃肿瘤环氧化酶2血管内皮生长因子
- 左金丸醇提物抑制幽门螺旋杆菌感染人胃癌细胞增殖及诱导凋亡的实验研究被引量：17
- 2012年
- 目的研究左金丸醇提物对幽门螺旋杆菌感染人胃癌MKN45细胞生长及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法以不同浓度(7.81、15.63、31.25、62.5、125、250、500μg/mL)的左金丸醇提物分别作用于幽门螺旋杆菌感染的人胃癌MKN45细胞,24、48、72h后用Western blot法检测不同浓度的左金丸醇提物作用于幽门螺旋杆菌感染人胃癌MKN45细胞时凋亡相关蛋白Bax、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的表达情况。结果幽门螺旋杆菌感染MKN45细胞组、左金丸醇提物低剂量(40μg/mL)组、左金丸醇提物高剂量(180μ/mL)组凋亡细胞百分比分别为:(0.28±0.105)%、(3.27±0.702)%、(7.7±0.721)%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),凋亡率呈剂量依赖性;Western blot检测结果显示,左金丸醇提物低、高剂量作用幽门螺旋杆菌感染MKN45细胞24h后,PARP蛋白(89×103)、Bax蛋白表达明显增强,凋亡率上升,并呈现剂量依赖性。结论左金丸醇提物能抑制幽门螺旋杆菌感染人胃癌MKN45细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。调控凋亡相关基因Bax、PARP的表达可能是其诱导幽门螺旋杆菌感染的人胃癌MKN45细胞凋亡的分子机制之一。
- 汤庆丰刘宣葛艳周宁周利红孙健季青高虹李琦
- 关键词：幽门螺旋杆菌胃癌细胞凋亡
- 幽门螺杆菌通过p38MAPK信号通路上调人胃癌MKN45细胞中COX-2启动子的活性被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞环氧合酶2(COX-2)启动子荧光素酶报告基因重组质粒(pGL3-Basic-COX-2-promoter)活性的影响及p38MAPK信号通路对其的调控作用.方法:将构建的COX-2启动子pGL3-Basic-COX-2-promoter和内参质粒pRL-SV40共转染人胃癌MKN45细胞,加入100倍细胞数量的H.pylori共培养一段时间后,检测双荧光素酶的活性.Western blot检测H.pylori感染对人胃癌MKN45细胞p38MAPK信号通路的激活作用.运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路,观察H.pylori对MKN45细胞COX-2启动子活性的影响.结果:瞬时转染实验显示,COX-2启动子在MKN45细胞中的转录表达随时间的变化而升高,转染后40h的双报告基因活性是转染后8h的3.5倍(P<0.01);加入H.pylori共培养后,同时间点的荧光素酶活性明显升高(P<0.05或P<0.01),转染后40h的活性是转染后8h的5倍(P<0.01).H.pylori感染20min后,p38MAPK信号通路被激活,60min达峰值;加入p38MAPK信号通路特异性抑制剂SB203580抑制p38MAPK信号通路后,COX-2启动子的活性均明显下调.结论:H.pylori感染通过p38MAPK信号通路上调COX-2启动子活性,这可能是H.pylori促进胃癌发生发展的重要因素之一.
- 刘宣刘宁宁王炎殷佩浩吴琼周宁孙珏范忠泽李琦
- 关键词：幽门螺杆菌环氧合酶2P38丝裂原活化蛋白激酶信号转导
- MALAT1、COX-2、β-catenin、MMP-3、MMP-9等基因在结直肠癌发生发展中的意义被引量：5
- 2012年
- 目的探讨人肺腺癌转移相关转录因子1（MALATl）、环氧合酶-2（COX-2）、B-连环素（β-catenin）、基质金属蛋白酶（MMP）-3、MMP-9等基因在结直肠癌发生发展中的意义。方法收集新鲜结直肠癌组织标本及其对应癌旁组织标本各30例，采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测MALAT1、COX-2、β—catenin、MMP-3、MMP-9的mRNA表达水平，并与患者性别、年龄、癌胚抗原（CEA）、细胞免疫因子（CIM和CD8）、临床分期、肿瘤侵袭转移程度等进行相关性分析。结果MALAT1、COX-2、β—catenin、MMP-9在癌组织和癌旁组织中的表达差异均有统计学意义（P〈0．05），MMP-3则无统计学意义（P〉0．05）。MALAT1、COX-2、MMP-9和β-catenin在癌组织中的表达量分别是癌旁组织表达量的2．22倍、1．86倍、2．16倍、0．58倍（P〈0．01）。MALAT1（癌／癌旁）的表达差异与β—catenin（癌／癌旁）的表达差异呈负相关（r=-0．346，P=0．030），MMP-9（癌／癌旁）的表达差异与13-catenin（癌／癌旁）的表达差异则呈正相关（r=0．312，P=0．047）。COX-2（癌／癌旁）与MMP-9（癌／癌旁）在男女患者之间的差异均有统计学意义（P=0．047；P=0．018）；COX-2（癌／癌旁）在CEA上升与未见改变的患者之间的差异也有统计学意义（P=0．021）。结论MALAT1、COX-2、MMP-9、β—catenin在结直肠癌的发生发展中有重要意义，而MMP-3无重要参考价值；MALAT1和β-catenin的负相关性及MMP-9和β-eatenin的正相关性说明其在结直肠癌的发生发展中存在-定的相互作用关系；COX-2（癌／癌旁）和MMP-9（癌／癌旁）在男女患者中的差异提示二者影响男女患结直肠癌的概率；检测COX-2可在-定程度上辅助肿瘤标志物CEA对结直肠癌的诊断。
- 季青周宁刘宣殷佩浩秦建民李琦
- 关键词：环氧化酶2Β连环素基质金属蛋白酶3
- 中医药治疗幽门螺杆菌相关性胃病研究进展被引量：47
- 2012年
- 幽门螺杆菌(Hp)是一种革兰氏阴性微需氧菌,可定植于人体胃黏膜,与胃炎、消化性溃疡、胃癌等发生发展密切相关。近年来,中医研究工作者发现中医药在根除Hp感染、治疗幽门螺杆菌相关性胃病方面有独到优势,文章对中医药治疗幽门螺杆菌相关性胃病研究进展作一简要综述。
- 吴琼周宁李琦
- 关键词：中医药幽门螺杆菌
- 中医药防治幽门螺杆菌相关性胃病的研究进展被引量：25
- 2012年
- 查阅近几年国内外文献,对中医药抗幽门螺杆菌的实验研究相关文献进行整理并分析。检索万方医学数据库、中国知网(CNKI)和西文生物医学期刊数据库的38篇文献,将中药抗Heticobacter pylori的体外实验、体内实验的研究进展做一总结,并分析其机制。以往的研究从有效成分的筛选、抑菌浓度实验、抗菌机制研究和中医药对幽门螺杆菌感染动物模型的疗效研究,逐步扩展到细胞分子水平的观察。在今后的实验中还应紧密结合中医理论指导,合理选择中药和复方,规范动物模型制作和辨证分型,并严谨实验设计,才能更好的说明问题,以期为中医药防治幽门螺杆菌相关性胃病的更深入研究及临床应用奠定基础。
- 周宁吴琼孙健李琦
- 关键词：幽门螺杆菌胃病体内外实验
- COX-2介导MDR1/P-gp调控人结肠癌细胞多药耐药的研究被引量：11
- 2011年
- 背景与目的:肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致临床上结直肠癌化疗失败的重要原因之一,环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)过表达与肿瘤多药耐药的发生密切相关,但其引起多药耐药的作用机制尚不清楚。本研究通过调节人结肠癌HCT8/V多药耐药细胞COX-2的表达,以探讨COX-2对人结肠癌细胞多药耐药性的影响及其对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的调控作用。方法:应用COX-2基因重组慢病毒载体和COX-2特异性抑制剂NS-398(20μmol/L)上调及抑制人结肠癌HCT8细胞和多药耐药细胞HCT8/V的COX-2的表达,MTT法检测COX-2对HCT8和HCT8/V细胞化疗药敏感性的影响,Real-time PCR(RFQ-PCR)、Western blot等方法检测多药耐药基因MDR1和P-gp的表达。结果:人结肠癌耐药细胞HCT8/V对多种化疗药具有耐药性,其COX-2、MDR1 mRNA和P-gp的表达水平明显高于HCT8细胞(P<0.01)。感染COX-2过表达慢病毒(COX-2-GFP-Lentivirus)后,HCT8细胞对长春新碱的半数抑制浓度(IC50)由(18.2±7.1)μg/mL上升至(122.5±13.4)μg/mL长春新碱(t=11.9,P<0.01),MDR1 mRNA和P-gp的表达水平显著增加(P<0.01);抑制COX-2表达后,HCT8/V细胞对VCR的半数抑制浓度IC50由(191.1±18.2)μg/mL下降至(32.2±7.5)μg/mL(t=14.0,P<0.01),MDR1 mRNA和P-gp的表达水平分别下降了53.3%和42.5%(P<0.01)。结论:COX-2通过介导MDR1/P-gp的表达调控人结肠癌细胞多药耐药,抑制COX-2过表达对于逆转结肠癌多药耐药具有重要意义。
- 隋华周利红刘宣殷佩浩周宁王炎王炎范忠泽孙珏
- 关键词：结肠癌多药耐药P-糖蛋白环氧化酶-2重组慢病毒
- 健脾解毒方抑制幽门螺杆菌诱导的人胃癌细胞血管生长因子表达的研究
- 目的：探讨健脾解毒方(Jianpijiedufang,JPJDF)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)诱导胃癌细胞血管生长因子(Vascular endothelial growth ...
- 刘宁宁周宁孙珏刘宣王师英李琦
- 关键词：幽门螺杆菌胃癌血管生长因子血管生成素-2成纤维细胞生长因子健脾解毒方
- 中药防治胃癌血管新生机制的研究进展被引量：8
- 2012年
- 抑制胃癌血管新生已成为胃癌防治的研究热点。中医药对胃癌血管新生的作用研究已取得很大进展,诸多文献阐述了中药通过多种调控因子来实现对胃癌肿瘤血管的抑制作用,文章就不同血管生成调控因子进行分类,对近几年来中药防治胃癌血管新生的实验研究作一综述。
- 周宁李琦
- 关键词：中药胃癌血管内皮生长因子血管新生
- 益气活血方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的干预作用被引量：4
- 2013年
- 目的观察益气活血方对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法采用随机、对照进行实验研究,SD大鼠48只,随机分为3组,即假手术组、模型组、益气活血组。每组16只。除假手术组不插线外,其余两组制备大鼠大脑中动脉阻断缺血再灌注模型(MACO)。前两组于术前7 d和术后24 h按1 mL/100 g,每日2次的剂量灌喂0.9%氯化钠注射液,益气活血组按等剂量灌喂益气活血汤药。参考Zea Longa的5分制评分标准。假手术组,模型组,益气活血组分别在于再灌注1、3、6、24 h进行评分,观察比较各组各时间点的神经功能缺损积分;采用光镜对假手术组,模型组,益气活血组进行大鼠脑组织形态学结果进行观察,观察比较脑组织含水量;脑组织中的ATP酶(ATPase)、超氧化物歧化酶(SOD),一氧化氮合酶(NOS)的活性,丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量变化。结果与模型组相比,益气活血方组能明显减轻神经功能缺损及脑含水量,使得缺血区脑组织损伤的形态学结构有明显改善,且能提高缺血侧脑组织中ATPase、SOD活性降低NOS的活性两组之间差异有统计学意义(P<0.05),并能降低MDA、NO的含量,但两组之间没有显著性差异(P>0.05)。结论益气活血方有比较好的整体疗效,能够改善神经功能,减轻脑水肿,通过不同的作用环节,阻断脑缺血再灌注后的瀑布性损害反应,具有保护脑缺血再灌注损伤的作用。
- 黄太权易春涛褚怡雯汤庆丰付如珍周宁
- 关键词：益气活血方脑缺血再灌注中医药治疗
