冯迎春
- 作品数:27 被引量:66H指数:5
- 供职机构:四川农业大学更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划国家科技部科技人员服务企业行动项目成都大熊猫繁育研究基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 斑点叉尾鮐α-干扰素基因的克隆和原核表达
- 根据GENBANK中发表的斑点又尾鲴干扰素基因序列设计一对引物,采用RT-PCR在斑点叉尾鮐淋巴细胞中克隆出了α-干扰素基因。序列分析显示与已发表的序列同源性在96.5%以上。同时将基因连接到原核表达载体PET-32A(...
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- 关键词:Α-干扰素原核表达基因克隆
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- 斑点叉尾鮐生长激素基因的克隆、进化分析
- 以提取的斑点叉尾鲴脑垂体总RNA为模板,用OLIGO(DT)作为引物逆转录(RT)出CDNA后以生长激素的特异引物进行PCR扩增,成功扩增出其生长激素基因。将此基因克隆于PMD18-T VECTOR并经质粒PCR和XHO...
- 颜其贵冯迎春林涛冯婷于辉李华
- 关键词:生长激素基因克隆进化分析
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- 猪“高热病”源嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因的克隆和系统发育分析被引量:1
- 2009年
- 根据NCBI中已报道的嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,对两株来源于猪"高热病"病料中的疑似嗜麦芽窄食单胞菌PSM-5、PSM-6进行PCR扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,并转化到DH5α中。抽取质粒模板,进行PCR和双酶切鉴定并测序,从分子水平上予以鉴定。两株菌的16S rDNA基因扩增片段的核苷酸序列(GenBank登录号为GQ267816和GQ267817)与已经报道的嗜麦芽窄食单胞菌分离株的16S rDNA序列的相似性均在96.78%以上,最高达99.93%。本试验对通过16S rDNA鉴定嗜麦芽窄食单胞菌提供一定参考,同时对猪"高热病"的诊断治疗奠定细菌学方面的基础,对其发病机制的探讨提供依据。
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- 关键词:嗜麦芽窄食单胞菌基因克隆分子分析
- 一起特种野猪蓝耳病继发猪链球菌感染的诊疗体会
- 2009年
- 2009年7月,四川某特种野猪养殖场发生一起以厌食、呼吸困难、胸膜粘连为主要特征的传染病。经流行病学调查、临床症状观察、尸体剖检和实验室诊断,确诊为蓝耳病继发猪链球菌感染。根据诊断结果采取了积极的防制措施,取得较好效果,大大减少了经济损失。
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- 关键词:特种野猪蓝耳病链球菌
- 猪痢疾的实验室诊断被引量:4
- 2010年
- 猪痢疾(Swine Dysentery,SD)又称血痢,是一种主要感染生长育肥期猪、以黏液性出血性结肠炎为主要特征的肠道传染病。SD的病原是猪痢疾短螺旋体(Brachyspira hyodysenteriae B.hyodysenteriae),最早是1921年在美国发现,但直到1972年才认定其病原为呈强β-溶血的厌氧的肠道螺旋体,被命名为猪痢疾密螺旋体,1991年将其归入蛇形螺旋体属,现将其归入短螺旋体属,为该属中对猪具有肠致病性的重要成员,
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- 关键词:猪痢疾肠道传染病蛇形螺旋体密螺旋体育肥期结肠炎
- 山羊痘病毒PCR/酶切检测方法的建立被引量:2
- 2011年
- 为了建立一种快速的山羊痘检测方法,根据山羊痘病毒基因组保守区T3A/T3C基因设计了1对引物,以山羊痘病毒DNA为模板进行PCR扩增并连接到pMD18-T载体进行序列测定,测序结果显示片段长491 bp,与已报道的山羊痘病毒对应序列进行比对,同源性高达98%。特异性和灵敏性试验及PCR产物的酶切位点分析表明,该引物特异性好,敏感性强。本研究建立的山羊痘病毒PCR/酶切检测方法可应用于山羊痘病毒感染的临床诊断。
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- 关键词:山羊痘病毒PCR酶切
- 一起育肥猪急性死亡病例的诊治被引量:2
- 2010年
- 本文采用RT-PCR方法从某规模化养殖场育肥猪急性死亡病例病料中检测猪瘟病毒(CFSV)、蓝耳病病毒(PRRSV)、圆环病毒(PCV)、乙脑病毒(JEV)、伪狂犬病毒(PRV),并进行细菌的分离,采用16s RNA对所分离的致病菌进行鉴定,鉴定结果为病猪为猪瘟病毒、蓝耳病病毒混合感染同时继发猪丹毒杆菌感染,药敏试验结果显示分离的致病菌对青霉素、头孢噻肟和先锋霉素V高度敏感。根据结果制定出相应的防治措施,经过处理后,病情得到良好的控制。
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- 关键词:RT-PCR病原检测药敏试验
- 山羊地方性鼻内肿瘤病毒ENTV cDNA文库的构建及功能基因的初步表达
- 地方性鼻内肿瘤病是一种以呼吸道鼻内粘膜分泌型上皮细胞发生致瘤性转化为特征的接触性传染病,主要发生于山羊和绵羊,其临床症状主要表现为连续性鼻漏、呼吸困难、眼球突出、颅骨变形、面部肿大、喷嚏、打鼾和极度消瘦。除澳大利亚和新西...
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- PRRS检测技术的研究进展被引量:2
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征是引起母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道症状及死亡为主要特征的一种高度接触性传染病。及时发现、准确检测对本病的防治和彻底根除有重要意义,除病毒分离、鉴定的经典方法外,随着分子生物学的发展,对该病的检测已深入到分子水平,本文针对各种检测技术研究进展做一综述。
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- 关键词:PRRSVELISA
- 山羊地方性鼻内肿瘤病毒SC株gag基因分子克隆与原核表达被引量:1
- 2012年
- 克隆山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV)的群抗原基因gag,并通过原核表达系统对gag进行表达研究。参照GenBank中收录的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)gag基因序列设计1对特异引物,以地方性鼻内腺癌(ENA)山羊鼻内分泌物中病毒RNA为模板,RT-PCR扩增获得目的片段,并将产物连接到pMD18-T载体获得阳性克隆(pMD18-gag)并测序。根据gag基因的ORF设计1对表达用引物进行亚克隆,并将ORF重组到pET-32,重组质粒转化至宿主菌Rostta中,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE分析,纯化表达产物,通过ELISA初步分析产物的反应原性。结果显示:克隆获得长2 249 bp的核酸序列(GenBank:HM104174),含有完整的ORF,与已报道的ENTV-2 gag基因的同源性高达87%,氨基酸水平上的同源性高达96.4%。表达产物大小约87 ku,与理论推理一致。采用ELISA方法检测表达产物未能与ENA阳性血清发生特异性反应。结果表明:gag基因在原核系统pET-32/Rostta中得到表达,表达产物与ENA阳性血清不具反应原性。
- 何桦冯迎春颜其贵张国俊张霞
- 关键词:山羊GAG基因原核表达