郝岗平
- 作品数:53 被引量:394H指数:12
- 供职机构:泰山医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:山东省自然科学基金国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- PMI基因作为选择标记的植物表达载体构建及转化白花丹参体系的建立
- 2014年
- 目的:构建含有大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因并替换潮霉素抗性(hygromycin,hyg)基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,同时建立以PMI/甘露糖为筛选标记的白花丹参转基因体系。方法:首先从大肠杆菌Escherichia coli DH5α中克隆PMI基因,然后以PMI基因替换植物表达载体pCAMBIA1305中的hyg基因,构建了以PMI基因为选择标记基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,并用电击转化方法导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404中,用叶片浸染法转化白花丹参。结果:在白花丹参MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1固体分化培养基中附加20 g·L-1甘露糖和10 g·L-1蔗糖为碳源的选择压力下,pCAMBIA1305-PMI的转化率为23.7%,对再生植株用PCR检测证实了PMI基因的导入。结论:建立了以PMI-甘露糖为选择系统的白花丹参转基因体系,可应用于后续目的基因的转化奠定了基础。
- 陶如张友灿方茜史仁玖李艳玲黄璐琦郝岗平
- 关键词:甘露糖白花丹参
- 拟南芥抗旱转录因子CBF4基因区域的核苷酸多样性及其分子进化分析被引量:10
- 2004年
- 以生长于不同气候条件下的 17个拟南芥核心生态型为材料 ,分析了它们的抗旱转录因子CBF4基因区域的序列多态性。结果表明 :拟南芥CBF4基因区域具有高密度的单核苷酸多态性 (SNP)和插入缺失 (Indel) ,多态性频率为每 35 8bp一个SNP ,每 14 3bp一个Indel,基因非编码区的多态性是编码区的 4倍 ;在编码区 ,SNP的频率为每 96 4bp一个SNP ,其中发现 2 5av、2 0 3av和 2 4 4av 3个生态型CBF4基因区域 10 34位 (以GenBank登录号AB0 15 4 78序列第 196 96位的核苷酸为 1)碱基变化 :G T ,引起第 2 0 5位氨基酸变化 :gly val。核苷酸多样性统计分析显示 ,该基因内部大范围内存在连锁不平衡 (linkagedisequilibrium ,LD) ,5′端非编码区有一个重组。与拟南芥等的研究结果类似 ,选择压力对不同的区域作用不同。 3′端非编码区核苷酸多样性程度最高 ,是平衡性选择的结果 ,编码区核苷酸变化符合中性突变假说 ,而
- 郝岗平郝岗平吴忠义曹鸣庆Dominique Brunel黄丛林黄丛林
- 关键词:拟南芥
- 蛋白质内含肽的研究进展被引量:1
- 2002年
- 蛋白质内含肽是能够自我剪接的一段多肽链.它的发现不仅在理论上丰富了遗传信息翻译后加工的内容,而且在蛋白质纯化的实践方面有着广泛的应用前景.主要对蛋白质内含肽的剪接机制、结构特征、核酸内切酶活性以及应用方面的研究进展作一概述.
- 郝岗平杨清
- 拟南芥抗旱候选基因的SNP及其与抗旱性状的相关性分析以及ATHK1基因的功能研究
- 该研究以生长于不同生态气候条件下的32个拟南芥核心生态型为材料,分析了它们的抗旱指标和综合抗旱性,同时通过直接测序法分析了抗旱转录因子CBF4,组氨酸蛋白激酶ATHK1和ABA合成关键酶基因NCED3的单核苷酸多态性(S...
- 郝岗平
- 关键词:拟南芥抗旱性状渗透感受器
- 一种便携式空气微生物采样器固定台
- 本实用新型公开了一种便携式空气微生物采样器固定台,包括底盘、底盘竖直的螺接有一支撑杆、所述支撑杆的顶端可拆卸的连接有一采样器托盘,所述采样器托盘上安装有一微生物采样器,所述底盘与所述支撑杆连接处设有一采样器放置槽,所诉底...
- 邱玉玉李晓霞翟静于爱莲张忠郝岗平曹连宝
- 文献传递
- 泰山白花丹参干叶片高质量DNA的提取被引量:35
- 2006年
- 目的为了从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较了4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。CTAB-freeBuffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和VC防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNAA260/A280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。
- 郝岗平边高鹏张媛英
- 关键词:改良CTAB法
- 不同生长期马齿苋ω-3脂肪酸及矿物质元素含量分析被引量:7
- 2010年
- 马齿苋(Portulaca oleracea L.)为马齿苋科一年生肉质草本植物,是我国卫生部划定的药食同源植物之一,具耐盐、耐旱、耐热、对光照要求不严格等生长特性,我国各地均有分布。研究表明,马齿苋含大量维生素、不饱和脂肪酸、矿物质元素和丰富的柠檬酸、苹果酸、氨基酸、去甲肾上腺素、多巴胺、强心苷、蒽醌类、香豆素、黄酮、生物碱等多种活性成分,具有降血脂、降血糖、抗衰老、消炎抑菌、增强免疫等保健功能。
- 史仁玖苗苗李艳玲王建美郝岗平
- 关键词:马齿苋Ω-3脂肪酸矿物质元素
- 独蒜兰乙酸乙酯萃取物通过内源性线粒体通路诱导白血病K562细胞和HL-60细胞凋亡被引量:3
- 2018年
- 目的:探讨独蒜兰乙酸乙酯萃取物对人慢性粒细胞白血病K562细胞和急性髓性白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响以及诱导凋亡的途径。方法:采用XTT法、台盼蓝拒染法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和Western blot法研究不同浓度独蒜兰乙酸乙酯萃取物对上述2种白血病细胞增殖、凋亡、细胞周期和凋亡相关蛋白表达等方面的影响。结果:独蒜兰正丁醇萃取物对K562细胞活力几乎没有抑制作用,而乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞的活力和增殖。乙酸乙酯萃取物对于HL-60细胞作用24 h的半数抑制浓度(IC_(50))为(42.14±2.54)mg/L,对于K562细胞的IC_(50)为(51.28±3.12)mg/L。Annexin V-FITC/PI和DAPI染色结果显示,乙酸乙酯萃取物呈剂量依赖性诱导2种细胞凋亡,且50 mg/L的乙酸乙酯萃取物作用后K562细胞的凋亡率为33.1%,而HL-60细胞的凋亡率为63.1%,说明HL-60细胞对乙酸乙酯萃取物更加敏感,伴有典型的细胞核凋亡形态学改变。PI染色结果显示HL-60细胞和K562细胞都被阻滞于G_2期。Western blot结果显示,随着药物浓度的升高,细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达降低,而促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3和活化的多腺苷二磷酸核糖聚合酶的表达逐渐升高,内源性线粒体凋亡的特征胞浆中细胞色素C和凋亡诱导因子表达也逐渐升高。结论:独蒜兰乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞增殖,并通过触发内源性线粒体凋亡通路诱导这2种细胞凋亡。
- 郝岗平郝佳丽李悦赵法兴张媛英蒋汉明杨中法
- 关键词:白血病细胞凋亡
- 泰山产丹参内生真菌的分离鉴定和多样性分析被引量:12
- 2012年
- 目的从泰山产的白花丹参和紫花丹参根、茎、叶和花组织中分离到内生真菌。方法采用微生物形态学观察结合ITS序列分析鉴定分离到的内生真菌,并分析其生物多样性。结果从泰山野生紫花丹参、栽培紫花丹参和白花丹参的根、茎、叶和花中共分离出53株内生真菌,分属于9属,分布最广的类群是链格孢属(Alternaria),占总菌株的43.4%;其次是Leptodontidium sp(13.2%)和镰刀菌属(Fusarium)(11.3%)。各组织获得菌株数量比例最大的分别为野生紫花丹参根和茎部(15.38%)以及栽培白花丹参根部(13.46%)。泰山白花丹参和紫花丹参根、茎和花中分离到的菌株类群和数量明显多于叶。有的内生真菌表现出一定的宿主或组织专一性。结论泰山白花丹参和紫花丹参间以及丹参不同组织内生真菌在数量和种群组成上均存在差异,具有丰富的物种多样性,可作为产生与宿主植物相关的次生代谢产物的重要来源。
- 李艳玲史仁玖王健美苗苗张显忠郝岗平
- 关键词:内生真菌多样性
- 丹参注射液处理动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞相关基因表达的变化被引量:3
- 2005年
- 目的:观察经丹参注射液处理的动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞与病理组未经处理的同类细胞基因表达的差异。方法:实验于2004-03/2005-02在泰山医学院生物化学与分子生物学研究室完成。18只Wistar大鼠随机分为2组:病理模型组和丹参注射液处理组,每组9只。两组均以50万U维生素D/kg体质量的总剂量分3d灌胃,每天喂高脂饲料15g/只,连续30d。同时丹参注射液处理组按1.5mL/(kg.d)体质量,腹腔注射丹参注射液15d。30d后应用DDRT-PCR技术分析丹参注射液处理动脉粥样硬化大鼠胸主动脉细胞基因表达的差异,并用反向Northern证实,计数统计处理后细胞表达上调和下调的基因数量。结果:纳入18只大鼠均进入结果分析。①大鼠胸主动脉mRNA的差异显示分析:大鼠胸主动脉细胞总RNA经DDRT-PCR分析,60对引物进行PCR反应,有32对引物组合中发现有差异片段,个别的引物组合扩增出2~3条差异带,共发现重复性较好的差异条带37条,其中4条在丹参注射液处理细胞中表达较强,其余在病理组细胞中特异表达或表达较强。②mRNA差别显示技术分离差异片段的克隆、序列分析及同源性比较:在29个阳性克隆中有21个克隆与已知基因序列高度同源,13个目前认为与动脉粥样硬化发病有关;;另外8个克隆为未知基因的序列。③病理组和丹参注射液处理组大鼠胸主动脉细胞mRNA的反向Northern分析:丹参注射液处理动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞出现一些表达上调和下调的基因片段。上调基因有Apobec-1结合蛋白基因、ERP72、nitricoxidesynthase2和Gpx1;;下调的基因有胸腺素β4、FGFRI原癌基因伴随蛋白、ICAM-1、endothelin2、c-myc和TNF-α。结论:对29个阳性克隆中有21个克隆与已知基因序列高度同源,其中13个目前认为与动脉粥样硬化发病有关,将其各取约300ng的DNA产物,结果显示1、4、8和13号基因在丹参注射液处理组大鼠�
- 郝岗平史仁玖张媛英
- 关键词:丹参注射液动脉粥样硬化基因表达