史仁玖
- 作品数：50 被引量：329H指数：10
- 供职机构：泰山医学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金山东省中医药科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 白花丹参顺式还原酮加双氧酶基因的克隆、分子特征和表达调控分析被引量：4
- 2011年
- 目的:获得白花丹参参与乙烯和多胺合成的顺式还原酮加双氧酶(acireductone dioxygenase,ARD)基因(命名为SmARD)序列,并进行生物信息学分析和初步的表达特性研究。方法:利用全长cDNA文库技术,从两年生白花丹参根中获得目的基因SmARD序列。利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找该基因的开放读码框,prosite分析蛋白质的基本结构域。用半定量RT-PCR检测其在白花丹参幼苗根、茎、叶和成花中的表达情况。结果:得到688 bp的SmARD基因全长序列。具有一个591 bp的开放读码框,编码196个氨基酸,预测蛋白质相对分子质量23.27 kDa。使用预测的SmARD蛋白序列在NCBI中进行蛋白保守域分析,发现SmARD与ARD/ARD′家族具有很高的同源性。半定量RT-PCR表明,SmARD在白花丹参幼苗根、茎、叶和成花等组织中均有转录水平的表达,但是在根部表达最强。水分亏缺处理3 d,150 mmol.L-1NaCl处理1 d,4℃低温处理1 d和100μmol.L-1ABA处理1 d均抑制SmARD的表达,100μmol.L-1茉莉酸甲脂(MJ)和10μmol.L-1乙烯利(ETH)处理1 d诱导SmARD的表达。结论:首次得到白花丹参的顺式还原酮加双氧酶(ARD)基因序列,为其参与白花丹参响应逆境和次生代谢产物合成的信号调节功能研究奠定了基础。
- 郝岗平王健美史仁玖张显忠
- 关键词：白花丹参
- 红曲霉-丹参双向固态发酵工艺条件优化被引量：5
- 2018年
- 以红曲霉为菌种,以发酵产物中莫纳克林K和丹参酮ⅡA含量为指标,采用单因素实验和正交实验优化红曲霉-丹参双向固态发酵工艺。结果表明,最佳发酵工艺条件为:发酵基质配比1∶1、发酵基质初始含水量120%、发酵基质pH值5、装料量20g、接种量40%、发酵温度28℃、发酵时间20d,在此条件下,发酵产物中莫纳克林K含量为1.69mg·g^(-1)、丹参酮ⅡA含量为1.32mg·g^(-1)。
- 侯衍英刘文忠李存能高利李泽宇张显忠史仁玖
- 关键词：红曲霉丹参固态发酵
- PMI基因作为选择标记的植物表达载体构建及转化白花丹参体系的建立
- 2014年
- 目的:构建含有大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因并替换潮霉素抗性(hygromycin,hyg)基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,同时建立以PMI/甘露糖为筛选标记的白花丹参转基因体系。方法:首先从大肠杆菌Escherichia coli DH5α中克隆PMI基因,然后以PMI基因替换植物表达载体pCAMBIA1305中的hyg基因,构建了以PMI基因为选择标记基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,并用电击转化方法导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404中,用叶片浸染法转化白花丹参。结果:在白花丹参MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1固体分化培养基中附加20 g·L-1甘露糖和10 g·L-1蔗糖为碳源的选择压力下,pCAMBIA1305-PMI的转化率为23.7%,对再生植株用PCR检测证实了PMI基因的导入。结论:建立了以PMI-甘露糖为选择系统的白花丹参转基因体系,可应用于后续目的基因的转化奠定了基础。
- 陶如张友灿方茜史仁玖李艳玲黄璐琦郝岗平
- 关键词：甘露糖白花丹参
- 药用植物泰山四叶参DNA提取方法的研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨不同DNA提取方法对泰山四叶参DNA质量的影响。方法对提取的DNA进行紫外光谱分析、总DNA电泳及RAPD分析。结果不同方法提取的DNA质量及产率存在显著差异。结论结果表明改良CTAB法和改良SDS法较好。
- 史仁玖王桂龙宫元伟郝岗平王德才
- 关键词：基因组DNADNA提取方法
- 白花丹参丙酮酸脱羧酶基因的克隆和表达分析被引量：3
- 2013年
- 目的获得白花丹参丙酮酸脱羧酶(SmPDC)全长基因,分析该基因在白花丹参不同组织部位,以及缺氧胁迫处理后的该基因表达差异。方法利用cDNA文库筛选获得SmPDC基因全长,利用半定量RT-PCR,分析SmPDC基因在白花丹参不同部位的表达情况,及缺氧处理条件下的表达情况。结果获得的SmPDC基因由2 190个核苷酸组成,编码605个氨基酸,蛋白相对分子质量约6.485×104,等电点pI 5.49;半定量RT-PCR检测,该基因在丹参的根中表达量最高,其次是茎和叶;缺氧胁迫处理会诱导该基因的表达,随胁迫时间延长表达量逐渐增加。结论白花丹参SmPDC基因是PDC家族新成员,其功能与植物耐缺氧代谢途径有关。
- 史仁玖常正尧王健美王德才
- 关键词：白花丹参丙酮酸脱羧酶基因克隆RT-PCR
- 银杏幼嫩茎段培养诱导愈伤组织及其细胞学研究被引量：18
- 2003年
- 将银杏幼嫩茎段培养于含NAA和BA的MS和改良MS培养基中获得球型胚.培养基类型对愈伤组织的诱导和分化有明显影响,MS培养基优于DCR培养基.所有的MS和改良MS培养基上有胚性细胞的分化.在含有4mg/L的NAA的MS和改良MS培养基中,有三细胞和四细胞的原胚出现,并在MS+2mg/LNAA+0.1mg/LBA的培养基中观察到球形胚的分化.
- 郝岗平杜希华史仁玖张松贺张慧娟杨清
- 关键词：银杏幼嫩茎段离体培养愈伤组织细胞学
- 高质量的丹参叶片DNA的提取方法研究被引量：5
- 2005年
- 目的从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。此法包括:CTAB-free buffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和Vc防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNA OD260/OD280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。
- 郝岗平张媛英史仁玖
- 关键词：DNA
- 蒽酮-硫酸法测定海藻糖含量显色条件的改进被引量：18
- 2009年
- 采用传统的蒽酮-硫酸法定糖时,海藻糖的最大吸收峰有误差。为了准确地测定海藻糖含量,对影响波长测定的因素进行了系统分析。结果表明,硫酸浓度、蒽酮试剂加入量以及显色时间都对海藻糖的最大吸收波长有影响,并发展了三种蒽酮比色方法。采用这三种方法,海藻糖溶液均在625nm处有最大吸收值,在10～100μg/mL范围内呈线性关系,且稳定性好,结果准确。
- 李艳玲张显忠苗苗史仁玖刘锦华
- 关键词：蒽酮-硫酸法海藻糖最大吸收波长
- 中药生物技术研究性实验教学模式探索与实践被引量：3
- 2010年
- 中药生物技术实验教学中,以培养学生的创新能力为目标,对实验教学内容、教学方法和手段、实验考核方法进行了改革创新,构建了中药生物技术研究性实验教学模式。
- 史仁玖苗苗李艳玲张显忠
- 不同生长期马齿苋ω-3脂肪酸及矿物质元素含量分析被引量：7
- 2010年
- 马齿苋（Portulaca oleracea L.）为马齿苋科一年生肉质草本植物,是我国卫生部划定的药食同源植物之一,具耐盐、耐旱、耐热、对光照要求不严格等生长特性,我国各地均有分布。研究表明,马齿苋含大量维生素、不饱和脂肪酸、矿物质元素和丰富的柠檬酸、苹果酸、氨基酸、去甲肾上腺素、多巴胺、强心苷、蒽醌类、香豆素、黄酮、生物碱等多种活性成分,具有降血脂、降血糖、抗衰老、消炎抑菌、增强免疫等保健功能。
- 史仁玖苗苗李艳玲王建美郝岗平
- 关键词：马齿苋Ω-3脂肪酸矿物质元素
