张媛英
- 作品数:36 被引量:273H指数:9
- 供职机构:泰山医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金博士科研启动基金山东省中医管理局资助课题更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 何首乌提取物对人乳腺癌细胞脂肪酸合酶的抑制研究被引量:5
- 2004年
- 目的 研究何首乌提取物对人乳腺癌MCF7细胞脂肪酸合酶 (fattyacidsynthase,FAS)的抑制作用。方法 MTT法测定人乳腺癌MCF7细胞增殖速度 ,采用超速离心技术部分纯化人乳腺癌MCF7细胞FAS。不同浓度何首乌提取物与FAS相互作用不同时间后 ,加入底物 ,用分光光度法观察何首乌提取物对FAS的抑制作用。结果 何首乌提取物对人乳腺癌MCF7细胞的增殖有一定的抑制作用。人乳腺癌MCF7细胞FAS被部分纯化 ,三种浓度何首乌提取物 (0 .1,0 .5 ,1g/L)与FAS在催化前相互作用 0、5和 10min ,对FAS活性的抑制率分别为 2 4 .6 0 %、2 7.30 %、and 4 2 .75 % (0 .1g/L) ;4 3.5 0 %、5 0 .30 %、and 94 .0 3% (0 .5 g/L) ;98.6 0 %、97.30 %and 97.0 5 % (1g/L)。结论 何首乌提取物对人乳腺癌MCF7细胞FAS具有抑制作用 ;作用强度既依赖于抑制剂浓度 。
- 张媛英张凤珍孙凌云王宪泽
- 关键词:人乳腺癌细胞提取物何首乌脂肪酸合酶底物
- 泰山白花丹参干叶片高质量DNA的提取被引量:35
- 2006年
- 目的为了从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较了4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。CTAB-freeBuffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和VC防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNAA260/A280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。
- 郝岗平边高鹏张媛英
- 关键词:改良CTAB法
- 何首乌活性成分——二苯乙烯苷的研究进展被引量:26
- 2008年
- 徐杰周文聪张媛英
- 关键词:何首乌二苯乙烯苷理化性质生理功能分离纯化
- 独蒜兰乙酸乙酯萃取物通过内源性线粒体通路诱导白血病K562细胞和HL-60细胞凋亡被引量:3
- 2018年
- 目的:探讨独蒜兰乙酸乙酯萃取物对人慢性粒细胞白血病K562细胞和急性髓性白血病HL-60细胞增殖及凋亡的影响以及诱导凋亡的途径。方法:采用XTT法、台盼蓝拒染法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色和Western blot法研究不同浓度独蒜兰乙酸乙酯萃取物对上述2种白血病细胞增殖、凋亡、细胞周期和凋亡相关蛋白表达等方面的影响。结果:独蒜兰正丁醇萃取物对K562细胞活力几乎没有抑制作用,而乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞的活力和增殖。乙酸乙酯萃取物对于HL-60细胞作用24 h的半数抑制浓度(IC_(50))为(42.14±2.54)mg/L,对于K562细胞的IC_(50)为(51.28±3.12)mg/L。Annexin V-FITC/PI和DAPI染色结果显示,乙酸乙酯萃取物呈剂量依赖性诱导2种细胞凋亡,且50 mg/L的乙酸乙酯萃取物作用后K562细胞的凋亡率为33.1%,而HL-60细胞的凋亡率为63.1%,说明HL-60细胞对乙酸乙酯萃取物更加敏感,伴有典型的细胞核凋亡形态学改变。PI染色结果显示HL-60细胞和K562细胞都被阻滞于G_2期。Western blot结果显示,随着药物浓度的升高,细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达降低,而促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-3和活化的多腺苷二磷酸核糖聚合酶的表达逐渐升高,内源性线粒体凋亡的特征胞浆中细胞色素C和凋亡诱导因子表达也逐渐升高。结论:独蒜兰乙酸乙酯萃取物能显著抑制K562和HL-60细胞增殖,并通过触发内源性线粒体凋亡通路诱导这2种细胞凋亡。
- 郝岗平郝佳丽李悦赵法兴张媛英蒋汉明杨中法
- 关键词:白血病细胞凋亡
- 番茄Lehsp23.8启动子的热诱导表达调控序列鉴定被引量:1
- 2009年
- 番茄线粒体小分子热激蛋白(Lehsp23.8)启动子是典型的热诱导启动子。为了研究热激条件下该启动子的调控序列,本研究将不同长度的Lehsp23.8启动子序列与gus基因融合,构建5′缺失植物表达载体。然后用农杆菌介导法转化烟草,PCR及Southern blotting结果表明融合基因已经整合到烟草基因组中。GUS组织化学染色结果表明:不同长度Lehsp23.8启动子转基因植株热激处理后,在幼苗根、茎、叶以及花和果实中均表现出GUS活性,只是染色强弱有差异。叶片中GUS荧光活性测定结果表明:在热激处理条件下,565bp的Lehsp23.8启动子介导的GUS表达最强;而255bp的Lehsp23.8启动子介导的GUS表达最弱。说明Lehsp23.8启动子中255bp的序列即能满足该启动子的热激表达,-565bp~-255bp之间存在明显的增强子元件,而-871bp~-565bp之间的片段具有一定的抑制作用。
- 伊淑莹翟静徐华张媛英
- 关键词:番茄启动子GUS
- 丹参注射液处理动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞相关基因表达的变化被引量:3
- 2005年
- 目的:观察经丹参注射液处理的动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞与病理组未经处理的同类细胞基因表达的差异。方法:实验于2004-03/2005-02在泰山医学院生物化学与分子生物学研究室完成。18只Wistar大鼠随机分为2组:病理模型组和丹参注射液处理组,每组9只。两组均以50万U维生素D/kg体质量的总剂量分3d灌胃,每天喂高脂饲料15g/只,连续30d。同时丹参注射液处理组按1.5mL/(kg.d)体质量,腹腔注射丹参注射液15d。30d后应用DDRT-PCR技术分析丹参注射液处理动脉粥样硬化大鼠胸主动脉细胞基因表达的差异,并用反向Northern证实,计数统计处理后细胞表达上调和下调的基因数量。结果:纳入18只大鼠均进入结果分析。①大鼠胸主动脉mRNA的差异显示分析:大鼠胸主动脉细胞总RNA经DDRT-PCR分析,60对引物进行PCR反应,有32对引物组合中发现有差异片段,个别的引物组合扩增出2~3条差异带,共发现重复性较好的差异条带37条,其中4条在丹参注射液处理细胞中表达较强,其余在病理组细胞中特异表达或表达较强。②mRNA差别显示技术分离差异片段的克隆、序列分析及同源性比较:在29个阳性克隆中有21个克隆与已知基因序列高度同源,13个目前认为与动脉粥样硬化发病有关;;另外8个克隆为未知基因的序列。③病理组和丹参注射液处理组大鼠胸主动脉细胞mRNA的反向Northern分析:丹参注射液处理动脉粥样硬化大鼠前后胸主动脉细胞出现一些表达上调和下调的基因片段。上调基因有Apobec-1结合蛋白基因、ERP72、nitricoxidesynthase2和Gpx1;;下调的基因有胸腺素β4、FGFRI原癌基因伴随蛋白、ICAM-1、endothelin2、c-myc和TNF-α。结论:对29个阳性克隆中有21个克隆与已知基因序列高度同源,其中13个目前认为与动脉粥样硬化发病有关,将其各取约300ng的DNA产物,结果显示1、4、8和13号基因在丹参注射液处理组大鼠�
- 郝岗平史仁玖张媛英
- 关键词:丹参注射液动脉粥样硬化基因表达
- 轻度修饰低密度脂蛋白诱导内皮细胞基因差异的表达(英文)
- 2005年
- 背景:研究表明,轻度修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的形成有关,除了具有蓄积低密度脂蛋白作用外还有很强的生物学活性,可在培养细胞及动物体内诱导巨噬细胞集落刺激因子等多种生物活性物质的表达。目的:采用差异显示-聚合酶链反应技术研究轻度修饰低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞的基因表达差异,为进一步阐明轻度修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化的关系奠定基础。设计:重复测量设计。单位:泰山医学院。材料:实验于2003-07/2004-07在泰山医学院基础研究所完成。人脐静脉内皮细胞培养基为M199,在37℃,50mL/L的CO2条件下培养。细胞生长到融合状态时,培养基中加入轻度修饰低密度脂蛋白,至终浓度为400mg/L,诱导处理30h。方法:用差异显示反转录-聚合酶链反应技术分析轻度修饰低密度脂蛋白诱导下人血管内皮细胞的基因表达差异,并用反向Northern分析证实差异显示基因片段。主要观察指标:①内皮细胞mRNA的差异显示分析。②差异片段的克隆、序列分析及同源性比较。③诱导与非诱导小鼠肝脏mRNA的反向Northern分析。结果:轻度修饰低密度脂蛋白诱导下人血管内皮细胞出现一些上调和下调的基因片段。上调基因有胸腺素β4、FGFRI原癌基因伴随蛋白、FK506结合蛋白、rTSβ蛋白和细胞间粘附分子1;下调的基因有Apobec-1结合蛋白1、细胞色素B561和ERP72。结论:用差异显示反转录-聚合酶链反应方法证实在体外轻度修饰低密度脂蛋白可诱导人脐静脉内皮细胞一些基因的表达水平变化,引起轻度修饰低密度脂蛋白血管内皮细胞发生病理变化,最终导致动脉粥样硬化斑块的形成。
- 张凤珍张媛英翟静孙凌云蒋汉明顾洪雁
- 关键词:内皮细胞基因差异表达
- 硝苯地平对自发性高血压大鼠血管内皮细胞的保护作用(英文)
- 2005年
- 背景:研究表明,硝苯地平能够改善血管内皮细胞功能,而对于其扩张血管的机制,目前仍在进一步的研究中。目的:观察硝苯地平控释剂对自发性高血压大鼠(SHR)一氧化氮(NO)及诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的影响。设计:以实验动物为研究对象的观察对比研究。单位:一所医学院的动物实验中心。材料:本实验于2002-04/2002-05在山东大学医学院动物实验中心完成。实验动物为近交SHR大鼠21只,体质量(300±20)g,由山东大学医学院实验动物中心提供,清洁级。随机分为3组,即对照组、正常剂量组、低剂量组,每组7只。方法:对照组、正常剂量组和低剂量组分别灌胃生理盐水10mL/kg、硝苯地平控释剂(拜新同)溶液(0.3g/L)10mL/kg和3mL/kg,1次/d,连续15d。末次给药后摘眼球取血并取大鼠心、肺分别测定血清NO和iNOS的含量。主要观察指标:各组大鼠的NO含量、iNOS活性比较。结果:灌胃15d后,正常剂量组的NO含量与对照组、低剂量组比较,差异均有显著性意义(P<0.01);正常剂量组心、肺组织块中iNOS活性降低,与对照组和低剂量组比较差异均有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。结论:硝苯地平可在降低血压的同时,提高血清NO的含量,并且能对抗血压增高所造成的iNOS的活性增强(或二者互为因果)。
- 张媛英高琳琳李福荣
- 关键词:一氧化氮一氧化氮合酶
- 火鸡疱疹病毒繁殖非必须基因重组病毒用转移载体的构建被引量:2
- 2002年
- 目的 构建用于基因工程疫苗制作的火鸡疱疹病毒 (HVT)外源基因转移用载体。方法 利用PCR技术 ,从感染火鸡疱疹病毒的鸡胚成纤维细胞 (CEF)基因组中成功地扩增出火鸡疱疹病毒的繁殖非必须基因 US基因 ,将该PCR产物克隆进PGEM T载体中 ,利用末端平滑化技术和连接反应 ,把报告基因LacZ基因插入到US基因中。结果 构建出了用于制作重组HVT病毒的转移载体。结论 本研究以LacZ作为报告基因 ,成功的将其插入到US基因中 。
- 张凤珍郝岗平边高鹏史仁玖张媛英孙凌云
- 关键词:火鸡疱疹病毒
- 拜新同对自发性高血压大鼠内皮保护功能的研究
- 2004年
- 目的:观察拜新同(硝苯地平控释剂)对自发性高血压大鼠(SHR)一氧化氮(NO)及诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法:取SHR大鼠21只,随机分为生理盐水组、拜新同正常剂量组及其低剂量组,每天灌胃一次,连续15d,未次给药后摘眼球取血并取大鼠心、肺分别测定血清NO和iNOS的含量。结果:灌胃15d后,拜新同正常剂量组的NO含量为(135±7.7)umol/L,与生理盐水组(102.3±4.6)umol/L相比,差异有明显显著性(P<0.01);拜新同低剂量组心、肺组织块中iNOS活性降低,为1.15±0.18,差异显著(P<0.05);与拜新同低剂量组(1.77±0.23)相比,差异亦显著(P<0.05)。结论:拜新同组可有效地在降低血压的同时,提高血清NO的含量,并且对抗血压增高所造成的iNOS的活性增强(或二者互为因果)。
- 张媛英高琳琳李福荣
- 关键词:自发性高血压SHR一氧化氮NO