文艳君
- 作品数：63 被引量：77H指数：4
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RAS/ERK和PI3K/Akt串线信号网络的敏感性分析研究
- 2012年
- 建立了一个包含RAS/ERK(extracellular signal-regulated kinase)和PI3K/Akt信号通路的生化反应网络,采用基于LHS(Latin Hypercube sampling)抽样的多参数敏感性分析方法计算了网络参数变化对于ERK活化的影响,分析了PI3K/Akt信号通路的引入对RAS/ERK信号通路敏感性分布的影响.研究结果表明,K14,K17,K21,Km23,V26,Km27,K29',K31,K33',K37',K42',Kcat43,K46'Km52,K52'等是ERK信号的敏感参数.与此前单独的ERK通路参数敏感性研究结果相比,发现了在Ras上游有敏感性参数存在,能够为抑制ERK,PI3K/Akt联合通路提供新的靶点寻找策略.
- 董珂文艳君
- 关键词：系统生物学PI3K/AKT
- 脂质体-IP10复合物对小鼠4T1乳腺癌的治疗作用被引量：1
- 2009年
- 目的用1,2-二油酰-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)脂质体包裹pcDNA3.1-γ干扰素诱导蛋白-10(IP10)制备脂质体质粒DNA复合体即Lip-IP10,观察其对抗小鼠4T1乳腺癌的原位瘤及肺转移瘤的治疗作用,并探讨其作用机制。方法建立4T1乳腺癌模型,将36只荷瘤小鼠随机分为生理盐水(NS)组、脂质体-pcDNA3.1复合物(Lip-null)组和脂质体-IP10复合物(Lip-IP10)组,尾静脉给药,观察各组肿瘤体积、肺转移结节数及小鼠生存期。原位瘤进行CD31染色,测定微血管密度(MVD)。结果与两对照组比较,Lip-IP10组的肿瘤体积明显较小(P<0.05),肺转移结节显著减少(各组中位数为NS组45个,Lip-null组40个,Lip-IP10组3个,P<0.05),生存期延长(P<0.05),CD31染色结果显示,Lip-IP10组的肿瘤MVD值较低(NS组44.25±5.51,Lip-null组43.45±4.21,Lip-IP10组21.50±5.41,P<0.05)。结论静脉给予Lip-IP10复合体可抑制小鼠4T1乳腺癌的原位瘤及肺转移瘤,其作用机制与IP10抑制肿瘤血管生成有关。
- 唐清清石薇律慧敏彭星辰文艳君
- 关键词：阳离子脂质体乳腺癌基因治疗
- 水泡口炎病毒基质蛋白对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究水泡口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)基质蛋白(matrix protein,M蛋白)对鼠CT26结肠癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其对结肠癌治疗的可行性和意义。方法采用脂质体转染技术将已构建的水泡口炎病毒基质蛋白(VSV-M)重组真核表达质粒pcDNA3.1-M转入CT26细胞,Western blot检测M蛋白体外表达;采用噻唑蓝(MTT)法检测M蛋白质粒对CT26肿瘤细胞增殖的影响;碘化丙锭(PI)染色检测CT26肿瘤细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术定量观察104个细胞中亚G1期细胞所占比例。结果重组质粒转染CT26细胞后,Western blot检测到了M蛋白体外表达;倒置显微镜下观察到细胞形态学的改变;MTT检测到重组质粒转染CT26细胞48 h后生长明显抑制,与对照组相比抑制率达76.4%,差异有统计学意义(P<0.05);PI染色检测到CT26细胞凋亡核改变;流式细胞术检测到M蛋白诱导了CT26细胞的凋亡,凋亡率达80.2%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论VSV-M蛋白真核表达质粒pcDNA3.1-M导入小鼠结肠癌细胞CT26后诱导了细胞凋亡,对结肠癌具有治疗意义。
- 赵菊梅刘涛魏于全文艳君吴扬
- 关键词：细胞凋亡结肠癌基因治疗
- 鸡Tie-2受体胞外片段的原核表达及目的蛋白免疫原性的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 研究鸡 Tie- 2受体胞外片段 (配体结合域 )的原核表达以及目的蛋白对小鼠的抗原性。方法 用 PCR方法从既往构建的包含鸡 Tie- 2受体胞外段基因的表达质粒扩增目的片段 ,进而构建 PQE原核表达载体并诱导其目的蛋白的表达 ,将目的蛋白进一步纯化、复性并免疫小鼠 ,获得抗血清 ,用 EL ISA和 Western blotting检测抗血清中抗体的存在。结果 经酶切分析及测序鉴定表明获得了鸡 Tie- 2受体胞外目的片段的 PQE原核表达载体 ,能高效表达目的蛋白 ,将其免疫小鼠可产生抗重组蛋白的抗体。结论 用原核表达的方式可成功的获得鸡Tie- 2受体胞外目的片段的蛋白 。
- 罗彦田聆吴扬李秋刘继彦胡兵宿静梅何秋明刘成文魏于全文艳君
- 关键词：TIE-2受体原核表达抗体血清
- 抑制表皮生长因子受体基因表达的pSIREN-Shuttle RNAi表达载体的构建
- 2006年
- 目的:构建抑制表皮生长因子受体(EGFR)基因表达的RNA干扰(RNAi)质粒表达载体pSI-REN-Shuttle-EGFR。方法:化学合成3条编码短发夹RNA序列的、特异靶向EGFR基因的寡核苷酸链,各69个碱基,退火,克隆到RNAi-Ready pSIREN-Shuttle载体的人源U6启动子的下游,重组构建RNAi质粒,3种载体转染人鼻咽癌细胞株(CNE),用RT-PCR分析pSIREN-Shuttle-EGFR载体对EGFR基因的mRNA表达抑制效果。结果:重组构建的pSIREN-Shuttle-EGFR载体经插入基因片段序列分析,表明69个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致。CNE细胞EGFR基因的mRNA被明显抑制。结论:RNAi质粒表达载体介导对EGFR基因的RNA干扰可能是鼻咽癌干预治疗的一种有效手段。
- 栾建刚梁传余文艳君李炯
- γ干扰素诱导蛋白-10的硫氧还基因融合表达、纯化及生物活性检测被引量：1
- 2005年
- γ干扰素诱导蛋白-10是由γ干扰素刺激单核细胞、内皮细胞等所诱导产生趋化T淋巴细胞的一类分泌性糖蛋白。本研究PCR扩增人与鼠γ干扰素诱导蛋白-10的成熟蛋白编码区,克隆到硫氧还载体pET-32(a)进行诱导表达。SDS-PAGE分析显示:在IPTG诱导下,人与鼠的γ干扰素诱导蛋白-10表达量约占目标总蛋白的25.3%,主要以包含体的形式存在,可溶性成分约占目标总蛋白的20%。将可溶性蛋白以S-Tag亲和层析柱进行纯化,纯化的蛋白质纯度约为90%的γ干扰素诱导蛋白-10。通过趋化性分析,证实重组表达的人与鼠γ干扰素诱导蛋白-10在100ng/ml浓度下对激活的T淋巴细胞具有趋化活性。
- 李刚田聆魏于全文艳君肖飞姚兵张伶张汝梅开
- 关键词：基因融合生物活性
- 乙肝病毒x蛋白及其编码基因在制备治疗肝癌的药物中的用途
- 本发明属于疾病基因治疗领域。涉及乙肝病毒X蛋白基因(HBx)在制备治疗肝癌及肝癌并发症的药物中的用途。本发明的技术方案是提供乙肝病毒X蛋白基因(HBx)及其编码的蛋白在制备治疗肝癌及肝癌并发症的药物中的用途。本发明将将乙...
- 魏于全李玉华文艳君赵霞杨莉
- 文献传递
- 糖化重组生存素腺病毒疫苗抗肿瘤作用的实验研究被引量：2
- 2007年
- 背景与目的:生存素在调控细胞凋亡和有丝分裂过程中起着重要作用,在正常分化的组织中不表达或表达极低,而在胚胎组织和大部分肿瘤组织中广泛表达,而这一特点为恶性肿瘤的基因治疗提供了很好的靶标。本研究制备糖化重组生存素腺病毒疫苗,观察其抗肿瘤作用并探讨其作用机制。方法:将重组生存素腺病毒和甘露聚糖在氧化条件下偶联,同时建立小鼠结肠癌和Lewis肺癌模型,以糖化重组生存素腺病毒疫苗治疗荷瘤小鼠,观察肿瘤体积和小鼠生存时间。对小鼠肿瘤组织作TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡。为了检测疫苗的保护作用,预先以糖化重组生存素腺病毒疫苗免疫接种小鼠,或合用抗CD4、CD8和NK单克隆抗体阻断相应的淋巴细胞亚群,再接种肿瘤,观察小鼠肿瘤生长情况。结果:糖化重组生存素腺病毒疫苗治疗组小鼠肿瘤生长受到明显抑制,无明显不良反应发生,小鼠的生存时间明显延长,肿瘤细胞凋亡明显增加。同时,糖化重组生存素腺病毒疫苗能诱导小鼠产生抗肿瘤免疫,这一免疫反应依赖于CD4和CD8淋巴细胞,也部分依赖于NK细胞。结论:糖化重组生存素腺病毒疫苗能诱导机体产生特异性的主动免疫反应,诱导肿瘤细胞凋亡,具有明确的抗肿瘤作用,值得进一步研究。
- 李秋文艳君吴扬罗彦卢铀
- 关键词：生存素疫苗肿瘤
- 非洲爪蟾VEGF肿瘤疫苗治疗小鼠纤维肉瘤的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨非洲爪蟾VEGF肿瘤疫苗免疫抗小鼠纤维肉瘤的作用。方法:采用BALB/c小鼠建立MethA小鼠纤维肉瘤模型。实验肿瘤小鼠随机分成3个治疗组:非洲爪蟾VEGF(xVEGF)组、小鼠VEGF(mVEGF)组、生理盐水对照(NS)组。观察小鼠肿瘤生长、生存率和治疗的毒副反应,并检测抗自身mVEGF抗体、肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:xVEGF组肿瘤明显小于mVEGF组或NS对照组(P<0.05),xVEGF组小鼠生存率也明显高于mVEGF组或NS对照组(P<0.01)。WesternBlot检测发现异种蛋白质疫苗免疫的小鼠体内产生了抗自身mVEGF抗体,xVEGF组肿瘤MVD明显低于mVEGF组或NS对照组(P<0.01)。结论:非洲爪蟾VEGF疫苗治疗可诱导纤维肉瘤小鼠产生抗自身VEGF免疫反应及抗肿瘤作用。
- 牛挺向兵黄杰文艳君田聆贾永前刘霆魏于全
- 关键词：血管内皮细胞生长因子免疫治疗
- 增强人波形蛋白表达可降低肝癌细胞的增殖和侵袭能力被引量：2
- 2008年
- 目的探讨波形蛋白（VIM）对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法构建VIM基因质粒载体pcDNA3．1-VIM，将VIM基因稳定转染人肝细胞癌HepG2细胞株，通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot测定VIM的表达，分别用细胞增殖实验和标准的被覆基质胶侵袭小室，测定癌细胞的增殖活性和侵袭程度。结果DNA序列分析和限制性核酸内切酶消化证实重组载体已正确克隆，建立的细胞株HepG2-pV在RNA和蛋白水平均稳定高表达VIM。HepG2-pV细胞增殖能力降低（P〈0．05），软琼脂集落形成率为35．9％±3．9％，明显低于空质粒对照细胞（HepG2-P）和HepG2细胞（均P〈0．05）。HepG2-pV组侵袭细胞数为17±4，明显低于HepG2-P组和HepG2组（均P〈0．05）。结论在体外增强肝癌细胞VIM表达，可以降低其恶性表型。
- 李祖茂文艳君杨洪斌覃纲田聆邓洪新文彬
- 关键词：波形蛋白增殖
