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流式细胞术在微核实验中的应用被引量：2: 2010年; 微核实验检测终点明确、结果重复性好且易于开展,是广泛应用的遗传毒理学检测方法。由于微核的产生是小概率事件,而常规的人工显微镜计数方法即耗时、费力,且受主观因素影响较大,越来越难以满足大量遗传毒性评价任务的要求。流式细胞术作为一种高通量的快速自动化方法成为微核研究的一个重要方向。本文将对流式细胞仪检测体内微核的技术优化、方法验证及实际应用等最新进展进行综述,并对该技术在体外微核检测上的推广和广泛的实际应用前景进行展望。; 周长慧常艳王征王庆利林海霞; 关键词：流式细胞术微核实验红细胞

三色流式细胞术在啮齿类微核试验中的应用研究: 目的采用疟原虫生物标准品调校的三色流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测遗传毒物和非遗传毒物诱导的小鼠和大鼠外周血中微核(micronucleus,MN)的灵敏度和特异性,并与常规显微镜检小鼠和大鼠骨髓M...; 周长慧王征王庆利常艳; 文献传递

大鼠Pig-a基因突变试验高通量方法的建立和验证: 目的体内Pig-a基因突变试验是近年来新开发的一种基因突变试验方法，该试验具有诸多优点，有望成为管理遗传毒理学的试验方法。之前建立的基础型方法具有良好的重复性，但其灵敏度有待进一步的提升。本研究作为国际联合验证的一部分...; 张铭周长慧黄鹏程涂宏刚常艳王征; 关键词：高通量

基于八腔室玻片的染色体畸变初筛方法的建立与验证被引量：1: 2011年; 目的:为简化传统体外染色体畸变试验工序并减少受试物用量,建立基于八腔室玻片的染色体畸变初筛方法。方法:首先利用环磷酰胺(CP)和丝裂霉素C(MMC)作为阳性模式药物,分别建立CP作用6 h(+S_9)和MMC作用24 h(-S_9)的八腔室玻片的染色体畸变试验方法。再用于检测5个已知遗传毒性物质苯并芘[B(a)P]、2-氨基蒽(2-AA)、甲基磺酸甲酯(MMS)、乙基磺酸甲酯(EMS)、依托泊苷(Eto)和2个非遗传毒性药物氨苄青霉素钠(AS)和氯化钠(SC)在±S_9两个条件下的染色体畸变效应,验证该法的灵敏度和特异性。结果:CP和MMC分别在±S_9活化系统中染色体结构畸变率呈浓度依赖性增加,与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。在验证试验中,B(a)P和2-AA在+S_9系统中呈染色体畸变阳性,与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);MMS、EMS和Eto的染色体畸变率呈浓度依赖性增加(±S_9结果均为阳性),与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);而2个已知非遗传毒性药物(AS和SC)在±S_9系统中均呈阴性结果。结论:通过上述物质的验证表明,八腔室玻片染色体畸变试验是一种简单、快速、有效的遗传毒性初筛方法。; 周长慧王征常艳林海霞; 关键词：染色体畸变

大鼠Pig-a基因突变试验高通量方法的建立和验证: 目的体内Pig-a基因突变试验是近年来新开发的一种基因突变试验方法,该试验具有诸多优点,有望成为管理遗传毒理学的试验方法。之前建立的基础型方法具有良好的重复性,但其灵敏度有待进一步的提升。本研究作为国际联合验证的一部分,...; 张铭周长慧黄鹏程涂宏刚常艳王征; 关键词：高通量

基于三色流式细胞术的小鼠外周血微核试验方法的建立被引量：5: 2011年; 目的:为克服传统显微镜检微核(micronucleus,MN)方法耗时、费力、主观等缺点,建立基于CD71、CD61荧光抗体和碘化丙啶(cyclophosphamidr,PI)的三色流式细胞术(flow cytometry,FCM)研究小鼠外周血微核的自动化检测方法。方法:经口单次给予小鼠0、20、40和80mg/kg环磷酰胺(CP),于不同时间点收集外周血;另一批小鼠给予CP40mg/(kg·d)经口灌胃,连续染毒5d,分别于给药前和每次给药后24h收集外周血。采用-80℃甲醇固定血细胞,CD71、CD61荧光抗体、RNA酶和PI孵育血细胞,以疟原虫感染的红细胞作为生物标准物调校FCM后,对CP诱导的小鼠外周血中含MN的CD71^+网织红细胞(reticulocytes,RET)进行检测。结果:单次染毒后48h MN-RET达峰值,且MN-RET呈现明显的剂量依赖性增加(r=0.984 9,P<0.01);重复染毒5d,FCM监测的MN-RET染毒2d后达到稳态水平。FCM检测的MN-RET峰值和稳态水平与常规显微镜观察的骨髓微核率有良好的相关性(r=0.9212,P<0.01)。结论:FCM小鼠外周血微核法稳定可靠,可以作为常规显微镜小鼠骨髓阅片法的替代方法,用于小鼠体内微核试验。; 周长慧王征王庆利杨琛懋常艳; 关键词：CD71 流式细胞仪网织红细胞微核环磷酰胺

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王征