刘敏慧
- 作品数:11 被引量:25H指数:3
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- Mov10蛋白生物学功能研究进展
- 2015年
- Mov10蛋白属于RNA解旋酶超家族-1,是RNA-诱导沉默复合体的组成成分之一。Mov10蛋白在介导miRNA/siRNA基因沉默中有积极的作用,其确切机制尚不清楚。研究证实,Mov10蛋白具有广泛和有效的抗逆转录病毒活性,能在多阶段抑制HIV-1复制,包括病毒产生、Gag蛋白水解程序、逆转录过程;同时也可降低其他逆转录病毒如猿类免疫缺陷病毒、鼠白血病病毒和马传染性贫血病毒的感染性。新近研究发现Mov10在肿瘤中表达升高,推测其与hTERT和端粒相关,参与肿瘤的形成和肿瘤细胞的分化。
- 刘敏慧盛云建傅跃娟陈海君任红汤慧
- 关键词:RNA解旋酶生物学功能RNA干扰
- 补充维生素D在慢性丙型肝炎患者聚乙二醇干扰素联合利巴韦林抗病毒治疗中的作用
- 2017年
- 目的 研究维生素D在慢性丙型肝炎(CHC)患者接受聚乙二醇干扰素α-2b(Peg-IFNα-2b)联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗中的作用。方法本研究为前瞻性随机对照试验,共纳入52例CHC初治患者,随机分为维生素D补充治疗组(A组)、对照组(B组),A组26例患者口服补充维生素D 800 IU/d至Peg-IFNα-2b/RBV抗病毒治疗结束,B组26例患者仅接受Peg-IFNα-2b/RBV抗病毒治疗。检测患者治疗前、治疗4周、12周、24周、48周时HCV RNA水平等指标。结果治疗24周、48周时维生素D补充治疗组病毒学应答率均显著高于对照组(95.8%vs 69.6%,95.8%vs 73.9%,P均<0.05),但两组早期病毒学应答(EVR)无统计学差异(91.7%vs 69.6%,P>0.05)。两组不良事件发生率并无差异(73.1%vs 80.8%,P>0.05)。结论补充维生素D能提高CHC患者Peg-IFNα-2b/RBV抗病毒疗效。
- 刘敏慧陈海君张德和汤慧
- 关键词:慢性丙型肝炎维生素D干扰素利巴韦林
- 白细胞介素10基因修饰的树突状细胞对小鼠肝纤维化的影响
- 徐叶进郭玉香叶宏辉洪巧刘敏慧龚道军付跃娟张赛男卢明
- 研究背景:
肝硬化是一动态演变的过程,肝纤维化是所有慢性肝病晚期发生门脉高压症、肝性脑病的严重并发症的基础,是肝硬化的前期阶段,其病理改变在一定的条件下可被逆转,故从不同发病机理途径进行阻止,进而抑制肝纤维化的发生发展...
- 关键词:
- 关键词:细胞增殖自身免疫性疾病
- 降钙素原联合凝血因子预测肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎预后的研究被引量:10
- 2018年
- 目的 探究降钙素原(PCT)联合凝血因子在评价肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎(SBP)短期预后中的价值.方法 回顾性分析2014年6月至2017年10月金华市中心医院感染科128例肝硬化并发SBP住院患者临床资料.根据患者3个月生存情况,将其分为存活组(n=83)和死亡组(n=45),采用多因素Logistic回归分析影响肝硬化并发SBP的预后因素,计算回归系数作为权重,建立预测指数模型.计算受试者工作曲线下面积(AUC),评价PCT联合凝血因子预测肝硬化并发SBP预后的准确性.结果 单因素分析显示,基线PCT、总胆红素(TBil)、血肌酐(Scr)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶原活动度(PTA)及凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ水平是影响肝硬化并发SBP患者预后的相关因素(P〈0.01).多因素Logistic回归分析显示,PCT、凝血因子Ⅴ和Ⅸ均能独立预测肝硬化并发SBP患者短期预后,其模型为Logit(P)=1.200+0.099×PCT-0.026×凝血因子Ⅴ-0.038×凝血因子Ⅸ,模型的敏感度为0.822,特异度为0.675,AUC为0.829.与经典MELD评分比较,差异无统计学意义(P〉0.05).结论 基于PCT与凝血因子Ⅴ、Ⅸ的预测指数模型能较好的预测肝硬化并发SBP患者的短期生存率,其总体预后的评估能力与MELD评分相仿,但模型简单,计算简便,临床较易掌握.
- 盛棋跃刘敏慧陈海君郭玉香应华永汪建明盛吉芳
- 关键词:因子V因子IX降钙素原肝硬化自发性细菌性腹膜炎预后
- Mov10稳定表达肝癌细胞株的建立及其生物学研究被引量:1
- 2014年
- 目的构建稳定表达Mov10蛋白的HepG2细胞株,探讨Mov10在肝癌细胞增殖和侵袭等生物学行为中的作用。方法将含Mov10基因的真核表达载体pCMV-Mov10-GFP质粒,采用脂质体介导法转染至人肝癌细胞系HepG2,经过G418抗性筛选阳性克隆。采用qPCR、Western blot技术检测Mov10的表达,免疫荧光技术观察稳定株Mov10的细胞分布。通过MTS、平板克隆形成试验、体外侵袭能力检测观察稳定细胞株的增殖情况、克隆形成能力和侵袭能力。结果成功构建了表达Mov10蛋白的稳定细胞株HepG2-Mov10。内源性及外源性Mov10蛋白主要分布于细胞质。稳定细胞株HepG2-Mov10较对照组细胞增殖速度快(P<0.05),体外侵袭能力强(P<0.05)。稳定细胞株HepG2-Mov10、HepG2-GFP和细胞株HepG2的克隆形成能力分别为(56.7±17.3)%、(38.3±12.1)%、(31.3±8.1)%,HepG2-Mov10细胞与后两者间差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建稳定表达Mov10的细胞株HepG2-Mov10,发现Mov10能促进肝癌细胞增殖并提高克隆形成能力和侵袭能力。
- 刘敏慧童师雯盛云建殷文伟彭虹任红汤慧
- 关键词:肝细胞质粒
- 白细胞介素10基因修饰的树突状细胞对肝纤维化小鼠的治疗作用及其机制被引量:7
- 2018年
- 目的 探讨白细胞介素(IL)10基因修饰的树突状细胞(DC)对肝纤维化小鼠的治疗作用及其机制.方法 体外构建IL-10基因修饰的DC(DC-IL-10),流式细胞术检测DC-IL-10表型及功能的变化.6~8周龄健康雄性BALB/c小鼠按随机数字表法随机分成空白对照组(DC组)、肝纤维化组、阴性对照慢病毒转染树突状细胞(DC-mock)处理组和DC-IL-10治疗组.比较各组小鼠肝功能炎症因子、免疫功能变化,以及肝脏组织形态学情况;实时PCR及免疫印迹法研究DC-IL-10对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响及在肝纤维化中的作用.结果 体外实验显示,组间表面分子(主要组织相容性复合物、CD80、CD86)表达差异有统计学意义(F值分别为14.708、22.503、12.595,P值均〈0.05);DC-IL-10组明显降低于DC组和DC-mock组(P值均〈0.05);T淋巴细胞增殖组间比较差异有统计学意义(F=50.295,P〈0.05),DC-IL-10组T淋巴细胞增殖率明显低于DC组和DC-mock组(P值均〈0.001).体内实验显示,DC-IL-10治疗组丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平明显低于肝纤维化组(P值均〈0.05);肿瘤坏死因子(TNF)α、IL-6、IL-1β的表达明显低于肝纤维化组(P值均〈0.05);调节性T细胞(Treg)比例明显高于肝纤维化组(P〈0.05);病理显示肝组织损伤轻于肝纤维化组;Wnt3a、α-平滑肌肌动蛋白、β-连环蛋白mRNA表达量及蛋白表达量均明显低于肝纤维化组(P值均〈0.001).结论DC-IL-10诱导Treg产生免疫耐受,抑制过度的炎症反应,阻断Wnt/β-连环蛋白信号转导通路,进而抑制肝纤维化的进展.
- 徐叶进唐新月杨敏张盛果刘敏慧郭玉香卢明芹
- 关键词:白细胞介素10树突状细胞肝纤维化WNT/Β-CATENIN信号通路调节性T细胞
- Mov10在肝细胞肝癌的表达及其生物学功能初步研究
- 肝细胞肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,约占原发性肝癌的85%-90%,在肿瘤相关死因中位列第三。肝癌的流行病学特征包括时间动态变化,显著的地域、种族和性别差异,存在明确的可预防的危险因素等。由于大部分患者诊断于疾病中晚期...
- 刘敏慧
- 关键词:肝细胞肝癌病理分析生物学功能
- 基于口蹄疫病毒2A片段的多基因共表达质粒的构建及表达被引量:1
- 2014年
- 目的构建基于口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)2A片段的多基因共表达质粒,并在293T细胞中共表达HBx、人Sox2及人c-Myc基因。方法以FMDV 2A自剪切片段连接HBx、Sox2和c-Myc基因编码序列,克隆至载体pEGFP-C1,构建多基因共表达质粒pEGFP-XSM;在脂质体LipofectamineTM2000的介导下,将重组质粒pEGFP-XSM转染293T细胞,同时设空载体组(转染空载体pEGFP-C1)和空白对照组(未转染),转染48 h后,荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达;Real-time PCR和Western blot法分别检测各组293T细胞中HBx、Sox2和c-Myc基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果多基因共表达质粒pEGFP-XSM经酶切和测序鉴定构建正确;空载体组和pEGFP-XSM转染组细胞荧光镜下均可见GFP的表达;pEGFP-XSM转染组中HBx、Sox2和c-Myc基因mRNA的转录水平较空白对照组及空载体组均明显升高(P﹤0.001);pEGFP-XSM转染组可见相对分子质量约48 000的GFP-HBx-2A融合蛋白条带和约38 000的HA-Sox2-2A融合蛋白条带,各组均可见相对分子质量约49 000的c-Myc蛋白条带,pEGFP-XSM转染组c-Myc蛋白的表达水平明显高于空白对照组及空载体组(P﹤0.01)。结论成功构建了多基因共表达质粒pEGFP-XSM,并在293T细胞中实现了HBx、Sox2和c-Myc蛋白的共表达,为进一步深入研究该共表达蛋白在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展中的生物学机制奠定了基础。
- 刘丹清廖勇刘敏慧刘俊英盛云建童师雯汤慧任红
- 关键词:多基因共表达
- Mov10在肝癌中的表达与复发转移的关系及作用机制初探
- 陈海君刘敏慧张戈薛亚东俞世安施红旗林龙张洋汪建明张德
- 该课题以实施根治性手术的原发性肝癌患者为研究对象,检测Mov10在癌组织、外周血的表达水平,术后规律随访,通过生存时间、至复发时间、积累生存率、累计复发率等指标的统计,评估Mov10与肝癌术后复发、转移的关系。同时,采用...
- 关键词:
- 关键词:肝癌预后手术治疗
- 降钙素原联合凝血因子检测预测肝硬化并发自发性腹膜炎预后的研究
- 盛棋跃陈海君刘敏慧郭玉香应华永汪建明付跃娟徐叶进吴
- 自发性细菌性腹膜炎是肝硬化失代偿期的常见的严重并发症之一,具有发病率和死亡率较高。自发性腹膜炎是肝硬化患者的重要的死亡原因,SBP的发生标志着肝病的加重,是肝病急性加重的启动因素之一,有较高的死亡率,与患者基础的肝功能状...
- 关键词:
- 关键词:肝硬化腹膜炎降钙素原抗生素治疗