薛青红
- 作品数：112 被引量：222H指数：10
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家攀登计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪增生性肠炎研究进展被引量：7
- 2006年
- 猪增生性肠炎是由胞内劳森氏菌引起的猪的接触性传染病,本文介绍了其病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化以及实验室诊断等方面的研究现状。
- 刘燕薛青红
- 关键词：猪增生性肠炎胞内劳森氏菌
- 外源性马立克氏病病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
- 2023年
- 【目的】为解决现有兽用生物制品外源性马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)检验方法灵敏度低、检测时间长、鉴别性不强的问题,研究分别建立MDV血清1型(MDV serotype 1,MDV 1)和MDV血清3型(MDV serotype 3,MDV 3)毒株的实时荧光定量PCR检测方法,用于禽用生物制品纯净性控制。【方法】从NCBI下载MDV 1、MDV血清2型(MDV serotype 1,MDV 2)和MDV 3各毒株UL19序列,进行核苷酸和氨基酸序列比对分析;分别针对MDV 1 CVI988毒株、MDV 3 FC126毒株的UL19设计特异性引物和相应的Taqman探针,建立实时荧光定量PCR检测方法;分别构建相应的重组质粒作为阳性标准品,建立标准曲线,并评价所建立方法基因拷贝数检测的灵敏度;分别对其他禽用病毒类生物制品、毒种、MDV 2 SB-1毒株UL19的全长质粒及生产原材料(SPF鸡胚尿囊液、胚体、尿囊膜、鸡胚成纤维细胞)进行检测,评价检测方法的特异性;分别对600、60、6、0.6、0.06、0.006、0.0006 PFU的CVI988毒株和FC126毒株进行检测,评价所建立方法检测活病毒粒子的灵敏度;分别以不同稀释度的阳性标准品质粒为模板,进行3次重复性检测,计算变异系数,分析所建立检测方法的可重复性。【结果】MDV UL19在同一血清型内核苷酸和推导的氨基酸同源性达99.99%,具有很高的保守性,在不同血清型间核苷酸同源性只有约75%,推导的氨基酸同源性只有约85%;分别建立了MDV 1和MDV 3两种实时荧光定量PCR检测方法;MDV 1检测方法标准曲线的扩增效率E=98.8%,相关系数R^(2)=0.992,标准曲线方程Y=-3.351X+38.828(Y=Ct,X=lg(拷贝数)),MDV 3检测方法标准曲线的扩增效率E=95.0%,相关系数R^(2)=0.998,标准曲线方程Y=-3.447X+36.496(Y=Ct,X=lg(拷贝数));所建立的两种检测方法特异性好,MDV 1或MDV 3毒株扩增曲线良好,其他禽用病毒类生物制品、毒种、MDV 2 SB-1毒株UL19的全长质粒及生产原材料未出现特异性扩增曲线;灵敏度高,M
- 苏佳赵炜刘丹王嘉白洪旭吴华伟薛青红陈晓春
- 关键词：马立克氏病病毒实时荧光定量PCR外源病毒
- 牛结节性皮肤病病毒(NMG株)基因组DNA标准物质的研制被引量：2
- 2024年
- 为提高牛结节性皮肤病病毒(LSDV)核酸检测结果的准确性,本研究通过病毒核酸提取及质量检测、分装,制备LSDV NMG株基因组DNA标准物质。通过荧光定量PCR(qPCR)检测外源病毒评价其纯净性;采用液滴式数字PCR(ddPCR)方法检测LSDV ORF101基因的拷贝数以评估该标准物质的均匀性、稳定性并与9家实验室协作标定;进一步采用qPCR方法对该标准物质试用。结果显示,本研究制备的标准物质不存在外源病毒污染;组内和组间无显著性差异,均匀性好;标准物质于-20℃稳定保存6个月,4℃稳定保存7d,25℃稳定保存24 h;标准物质ORF101基因最终定值为(8.6±1.3)×10~3拷贝/μL;可以用于qPCR检测。综上,该标准物质定值准确,均匀性好,不仅可以用于LSDV核酸检测相关实验的质量控制、仪器校准、检测方法评价,还可为研制体外诊断试剂提供物质基础。
- 苏佳白洪旭赵炜王德丽刘伟洁王芳薛青红陈晓春
- 关键词：标准物质定值
- 副流感病毒5型SH蛋白单克隆抗体的制备
- 2021年
- 为获得副流感病毒5型SH蛋白的单克隆抗体,将构建的重组表达质粒pET43a-SH转化BL21(DE3)plys,经IPTG诱导表达、过镍柱纯化后将重组蛋白作为免疫原,免疫8周龄Balb/c雌性小鼠,并按常规方法制备杂交瘤细胞。通过间接免疫荧光方法进行筛选,获得3株杂交瘤细胞株,命名为5B9、3G8、4E11,并进行了培养特性、分泌抗体活性、分泌抗体亚类的鉴定。结果显示:3株细胞株连续传代10代均稳定分泌单克隆抗体,细胞上清液IFA效价稳定,分泌单克隆抗体亚型均为IgG2a。制备并纯化了1株(5B9)单克隆抗体,浓度为4.26 mg/mL,纯度不低于90%,IFA效价不低于1∶2000,与猪牛等常见病毒均无交叉反应。
- 吴华伟刘丹陈晓春高金源邓永秦义娴苏佳黄小洁薛青红陈延飞
- 关键词：单克隆抗体
- 猪源支气管败血波氏杆菌新疆株的分离鉴定及生物学特性研究被引量：1
- 2016年
- 支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica，Bb）是定殖在动物呼吸道黏膜纤毛上皮细胞的一类革兰氏阴性、需氧球杆菌，是引起猪萎缩性鼻炎的重要病原菌。支气管败血波氏杆菌易从患鼻炎的或者肺炎的仔猪或从无明显临床症状的呼吸道疾病的猪群中分离到，也是其他哺乳动物的病原或者潜在病原。在猪群中，断奶前仔猪感染支气管败血波氏杆菌可引起支气管肺炎和萎缩性鼻炎及继发感染其他呼吸道疾病。
- 贺笋薛青红郝成武韩瑞何传雨何海
- 关键词：支气管败血波氏杆菌猪萎缩性鼻炎生物学特性呼吸道疾病支气管肺炎哺乳动物
- 兽用狂犬病灭活疫苗效力检验参考疫苗的研制被引量：1
- 2013年
- 将试制的狂犬病灭活疫苗效力检验参考疫苗分别采用NIH和ELISA方法进行了标定,并组织人员进行了协作标定,确定参考疫苗的效价为5.44IU。对标定后的参考疫苗进行了均一性和稳定性试验,结果参考疫苗的均一性好,在-20℃放置15个月和4℃放置2个月效价稳定,在37℃放置2个月效价大于2.00IU,符合我国和WHO对动物用狂犬灭活疫苗效力的要求。本课题为进一步自主研发检验用标准品提供了试验依据,同时也响应了WHO狂犬病委员会敦促各国研制和标定参考品的要求,填补了我国兽用狂犬病灭活疫苗效力检验标准品的空白。
- 李宁支海兵张伟薛青红李润印春生赵德明
- 关键词：效力检验标准品
- 小反刍兽疫诊断试剂盒
- 本发明涉及小反刍兽疫诊断试剂盒。本发明的检测试剂盒包括基底，以及独立地连接于所述基底上的特定多肽或特定多肽组合。
- 薛青红孙淼陈延飞陈建李岭
- 文献传递
- 犬细小病毒阳性血清的制备、鉴定和初步应用
- 2023年
- 犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)阳性血清在CPV疫苗制品的效力检验、外源病毒检验和鉴别检验中不可或缺,对CPV相关生物制品的质量控制至关重要,为了制备中和抗体效价高、特异性好的CPV阳性血清,试验用CPV DD株免疫健康易感比格犬2只,经4次免疫后采血分离血清,采用微量细胞中和试验法、免疫荧光法和《中国兽药典》三部附录中无菌检验、支原体检验和外源病毒检验法对血清进行鉴定,将该血清应用在犬类疫苗的外源病毒检验和鉴别检验中,建立了CPV间接免疫荧光检测法(IFA)并应用于疫苗的效力检验(病毒含量测定)中。结果表明制备的CPV阳性血清中和抗体效价高达1∶32768,中和指数>10^(6.2),对犬瘟热病毒、犬副流感病毒和犬腺病毒的中和抗体效价均<1∶4,狂犬病病毒中和抗体效价<0.03 IU/mL。用制备的阳性血清对3种CPV相关活疫苗进行外源病毒检验可完全中和10头份的疫苗毒;对2种CPV相关活疫苗进行鉴别检验,结果符合质量标准规定。利用CPV间接免疫荧光检测法对3种CPV相关活疫苗进行病毒含量测定,结果显示建立的IFA方法对3株疫苗株均有交叉免疫反应,与商品化CPV荧光单抗检测灵敏度差异不大。说明CPV阳性血清中和能力强、特异性好,可用于犬用活疫苗外源病毒检验、鉴别检验和效力检验。
- 陈延飞陈建薛青红李岭孙淼
- 关键词：犬细小病毒阳性血清间接免疫荧光法生物制品
- PIV5荧光定量RT-PCR检测方法的建立
- 为建立检测副流感病毒5型(PIV5)的荧光定量RT-PCR方法,针对PIV5 L基因设计筛选出一对特异性引物和探针,对退火温度、引物浓度、探针浓度进行了优化,并进行了敏感性、特异性和重复性试验。结果显示:最适退火温度为5...
- 吴华伟秦义娴陈晓春高金源邓永刘丹苏佳薛青红陈延飞
- 关键词：荧光定量
- 一种抗鸡传染性贫血病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体、试剂或试剂盒及其应用
- 本发明属于兽用生物技术检测领域，具体涉及一种抗鸡传染性贫血病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株、单克隆抗体、试剂或试剂盒及其应用。本发明提供了一株抗鸡传染性贫血病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株CIAV Mab‑VP2‑...
- 刘丹吴华伟侯力丹黄小洁薛麒孔冬妮薛青红邓永陈晓春
