孙淼
- 作品数：42 被引量：38H指数：4
- 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金：国家科技基础性工作专项引进国际先进农业科技计划“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- ALV-J研究进展
- 禽白血病是由反转录病毒科禽白血病病毒和禽肉瘤病毒群中的病毒感染引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称[1].该病既能水平传播又能垂直传播,可以造成多种类型肿瘤导致死亡,引起生产性能下降和免疫耐受,因此对养禽业危害很大.根据禽白血...
- 孙淼
- 关键词：J亚型禽白血病病毒囊膜蛋白宿主细胞
- 基于小反刍兽疫病毒H蛋白的表达、纯化及其间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2021年
- 为了建立快速、准确的检测小反刍兽疫病毒抗体的方法,试验从GenBank中下载小反刍兽疫病毒结构蛋白H基因序列,并对其进行分析设计,通过基因合成方法得到相应片段,进一步构建重组质粒,将目的片段插入酵母基因组中,利用酵母表达系统表达目的蛋白并纯化,以纯化后的H蛋白作为包被抗原,建立检测小反刍兽疫病毒抗体的间接ELISA方法,并用该方法对40份阴阳性血清和临床189份样品进行检测,将检测结果分别与中和试验和商品化试剂盒的检测结果进行比较。结果表明:成功构建并表达小反刍兽疫病毒H蛋白。基于H蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法对40份阴阳性血清的检测结果与中和试验比较,总符合率为95%(38/40);对临床189份样品的检测结果与商品化试剂盒比较,总符合率为93.12%(176/189)。说明该方法与中和试验及商品化试剂盒检测结果有较好符合度,可以用于小反刍兽疫临床血清抗体的检测及流行病学调查。
- 薛晓茵朱文壮孙淼陈延飞陈建孟赓薛青红
- 关键词：小反刍兽疫病毒酵母表达蛋白纯化间接ELISA符合率
- 猪丁型冠状病毒的分离鉴定与基因分析被引量：5
- 2018年
- 对山东省某养殖场的腹泻病料进行检测,确认为猪丁型冠状病毒(PDCoV)阳性。使用ST细胞分离到一株PDCoV,命名为SD株。全基因序列测定以及与GenBank中其他68株PDCoV全基因序列比对分析以及遗传进化分析结果表明:PDCoV SD株的全基因组(不包括3'poly(A)尾)序列长度为25414个核苷酸(nt),与参考株HKU15-155、CH/Sichuan/S27/2012和CH-HB-2014的核苷酸同源性分别为98.97%、99.06%和99.13%;此外,在nsp2区的1739~1744位(对应于HKU15-44序列)中的6 nt(TTTGAA)缺失和nsp3区的2810~2818位的9 nt(TCGGCAATG)缺失为特征性基因突变;69株PDCoV呈现出明显的地域特征,其中美国与韩国的PDCoV毒株为一个大分支,越南与泰国PDCoV毒株为另一个小分支,中国的23株PDCoV则呈现出4个小分支,充分展现了该病毒的基因多样性。试验可为中国PDCoV的流行病学和诊断研究以及进一步的疫苗开发提供参考。
- 刘怀东孙淼赵炜薛青红魏春霞才学鹏陈瑞刘灿孙晓林
- 关键词：腹泻基因分析
- 鸡传染性贫血病毒VP1、VP2基因的表达及免疫原性研究
- 本试验旨在研究鸡传染性贫血病毒(CIAV)VPI、VP2基因在昆虫细胞Sf21中的表达及其免疫原性鉴定.将鸡传染性贫血病毒VP1、VP2基因分别克隆到转移载体pFastBacHTA中,构建得到pFBH-VP1、pFBH-...
- 徐微李启红李岭孙淼李俊平杨承槐李慧姣
- 关键词：鸡传染性贫血病毒杆状病毒表达VP1VP2免疫原性
- 2株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定被引量：1
- 2023年
- 牛病毒性腹泻是目前危害我国养牛业发展的重要传染病之一,在我国多个省、自治区、直辖市均有流行。对2头疑似感染牛病毒性腹泻病毒的牛血清样本进行检测、分离病原,并根据E2基因序列确定分离株的基因亚型。将2份血清样本经RT-PCR检测为阳性后,接种MDBK细胞,通过连续传代培养并进行间接免疫荧光测定,成功分离到2株非致细胞病变型(NCP)BVDV分离毒株,分别命名为HN和XJ-2。对2个毒株的E2基因进行克隆及序列测定,并与NCBI上登录的BVDV参考毒株E2基因序列进行同源性比较和遗传进化分析。结果表明,XJ-2株、HN株与BVDV1b亚型JL^(-1)株处于同一分支,核苷酸同源性分别为99.4%和99.3%,均属于BVDV1b亚型。对新疆、河南两地XJ-2和HN株的分离鉴定,可为我国BVDV的分子流行病学研究和防控提供数据参考。
- 秦义娴陈晓春刘丹孙淼薛青红吴华伟高金源高月异
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒同源性比较遗传进化分析
- 牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎可视化基因芯片检测方法的建立被引量：14
- 2019年
- 针对现有牛病病原检测方法指标单一,操作复杂的现状,拟建立一种可高效检测牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎的基因芯片技术。根据已公布的各病原核酸序列,设计引物和探针。利用多重PCR方法扩增目的片段,扩增产物与探针特异性杂交,芯片反应显色后肉眼观察进行检测结果判定。优化反应条件、建立检测方法,同时对检测方法的灵敏度、可重复性、特异性、保存期等进行评价。结果显示,该基因芯片检测方法单一病原灵敏度检测可达1.0×10^(-6) ng/μL,混合病原灵敏度检测可达1.4×10^(-5) ng/μL;各病原间无交叉反应,检测健康牛血清、组织,牛流行性热病毒也均无响应;针对同一阳性质控品,芯片重复率达100%。保存期试验表明,芯片在2～8℃至少可保存6个月。检测30份临床样本,结果与标准方法结果一致。实验建立的方法具有高通量、高灵敏度、高特异性等特点,可在3 h内完成同时对七种牛重要疫病的检测,在牛群疫病诊断、净化及流行病学调查等方面有良好的应用前景。
- 魏春霞孙淼赵炜陈延飞刘怀东张敏李岭陈建才学鹏曾巧英薛青红
- 关键词：牛布鲁氏菌病炭疽副流感传染性鼻气管炎
- 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的原核表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2023年
- 为建立检测牛病毒性腹泻病毒抗体的间接ELISA检测方法,利用大肠杆菌表达系统成功表达E2蛋白并纯化,利用纯化后的蛋白作为包被抗原,用方阵法对影响ELISA试验的各个因素进行优化,并进行特异性、敏感性和重复性试验。确定E2抗原最佳包被浓度为1μg/mL,最佳血清稀释度为1∶40,最佳封闭液为1%明胶,最佳血清作用方式为37℃作用30 min,酶标抗体的最佳作用方式为1∶2000稀释、37℃作用30 min;最佳底物作用时间为室温20 min,阳性临界值为OD 450nm≥0.255。与血清中和试验和商品化试剂盒进行比较,总符合率分别为98%和96%,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%。该方法与其它常见牛病毒阳性血清均无交叉反应。本研究成功建立了间接ELISA方法,为进一步用于大批量牛血清样本的抗体检测和流行病学研究奠定了基础。
- 孙丹黄小洁薛麒秦义娴高月异孙淼刘丹
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白原核表达间接ELISA方法
- 小反刍兽疫病毒反向遗传学研究进展被引量：1
- 2022年
- 小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的山羊、绵羊等小反刍动物的急性、高度接触性传染病。反向遗传学是在获得生物基因信息的基础上,对基因进行突变、缺失等操作,进而研究基因变化对表型的影响。本文综述了包括PPRV在内的单股负链RNA病毒反向遗传学的最新研究进展,以期为PPRV及同科属病毒的反向遗传操作系统的建立提供新的思路。
- 王煜孙淼陈延飞刘伟洁薛青红
- 关键词：小反刍兽疫病毒反向遗传学
- 一种分泌抗小反刍兽疫病毒F蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用
- 本申请公开了一种分泌抗小反刍兽疫病毒F蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用。本申请中杂交瘤细胞株为2D10‑F‑PPRV，保藏编号为CGMCC No.45615，该单克隆抗体可用于检测PPRV，特异性强，抗体滴度高...
- 薛青红高月异高金源秦义娴孙淼陈延飞
- 一种对多种牛的疫病进行联检的基因芯片以及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸序列，以及用于对牛的疫病进行检测的基因芯片，其包括反应孔板，其中在每个反应孔中点样针对多种牛的疫病的核酸序列、阳性对照、阴性对照和空白对照；本发明另外涉及包括该基因芯片的检测试剂盒。
- 薛青红孙淼才学鹏陈建陈延飞李岭
- 文献传递
