朱捷
- 作品数：51 被引量：91H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- RNA干扰（RNAi）与DNAzyme抑制SARS病毒研究
- SARS病毒的流行给人类带来了巨大困扰,SARS病毒的发病机制还不十分清楚,这就为SARS病毒的防治研究带来了很大的困难,目前还没有针对SARS病毒的有效治疗方法和疫苗。但由于对不同SARS病毒株的基因序列已经测出,这就...
- 郑晓飞王京燕付汉江梅柱中朱捷孙志贤
- 文献传递
- mda-7/IL-24腺病毒对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的抑制作用研究被引量：1
- 2006年
- 目的构建mda-7/IL-24腺病毒,检测其对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响。方法将mda-7/IL-24cDNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,在大肠杆菌BJ5183中将重组病毒穿梭质粒和骨架质粒重组。在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,用PCR方法鉴定后,通过TCID50法测定病毒滴度。用滴度为50pfu/细胞的重组腺病毒Ad·mda-7/IL-24感染NCI-H446细胞72h后,经MTT实验检测其对细胞增殖的影响,并用Westernblot方法检测mda-7/IL-24在NCI-446中的表达。结果核酸序列测定和PCR鉴定表明成功构建Ad·mda-7/IL-24;TCID50法测定扩增的腺病毒滴度为2×1010pfu/ml。Ad·mda-7/IL-24在NCI-H446细胞中表达MDA-7/IL-24,MTT检测表明Ad·mda-7/IL-24明显抑制NCI-H446细胞生长,抑制率为21·37%。结论重组腺病毒Ad·mda-7/IL-24能显著抑制NCI-H446细胞增殖,为研究mda-7/IL-24的作用机制及将其用于小细胞肺癌的基因治疗提供了条件。
- 马群风江红刘锟朱捷郑晓飞
- 关键词：白细胞介素24重组腺病毒小细胞
- 血浆miRNA快速制备方法建立和优化被引量：1
- 2014年
- 目的建立并优化用于血浆microRNA(miRNA)检测分析的miRNA快速提取方法。方法使用含表面活性剂的提取液和加热方法提取血浆miRNA,采用RNA酶抑制剂抑制RNA降解,利用检测miRNA的poly(A)加尾、逆转录反应和实时定量PCR法检测血浆miRNA表达水平,评估方法的可行性。结果成功建立了提取液和加热提取miRNA一步法,实时定量PCR结果表明该方法具有良好的扩增特异性、可重复性,方法稳定可靠。结论提取液和加热一步法简便、快速、低成本,血浆用量少,为临床血浆miRNA检测分析提供了一种新的技术方法。
- 李函蔚钟一然付汉江铁轶朱捷李桂英郑晓飞
- 关键词：血浆微RNA
- 抑制端粒酶活性脱氧核酶寡核苷酸结构及用途
- 本发明涉及合成的非天然存在的具有核糖核酸内切酶活性的寡核苷酸化合物,该化合物含有其序列定义了一个脱氧核酶催化区的寡核苷酸和其序列能够与人端粒酶催化亚基mRNA内预定的靶序列杂交的寡核苷酸。脱氧核酶催化区可以得自“10－2...
- 郑晓飞朱捷孙志贤
- 文献传递
- mRNA氧化损伤检测方法的优化及p53 mRNA氧化损伤分析被引量：4
- 2013年
- 目的建立并优化检测真核细胞mRNA氧化损伤的方法——反转录阻断-双引物扩增法,检测p53 mRNA氧化损伤。方法建立非细胞体系和细胞体系mRNA氧化损伤模型,提取RNA并反转录成cDNA,根据所检测mRNA的5'端和3'端各设计一对引物,以cDNA为模板进行实时定量PCR。结果非细胞体系和细胞体系氧化处理组GAPDH和p53 mRNA的氧化损伤程度均明显高于对照组,且随着过氧化氢浓度增加RNA氧化损伤增强;同时一定限度内降低反转录酶用量能提高检测灵敏度。结论本研究建立并优化的RNA氧化损伤检测方法能检测特定mRNA对氧化的敏感性及损伤程度,为分析相关疾病造成的RNA氧化损伤以及探索其发病机制和治疗方法提供了技术支持。
- 马春花铁轶付汉江刘斌邢瑞云朱捷丁勇郑晓飞
- 关键词：RNAP53MRNA
- miR-195重组腺病毒表达载体构建及在细胞中的表达
- 2008年
- 目的:利用AdEasy系统构建miR-195的腺病毒表达载体,为研究miR-195的功能提供条件。方法:将miRNA-195前体序列从已构建的pcDNA-miR-195载体中克隆进穿梭载体pAdTrack-CMV,通过与骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中高效同源重组,获得完整的重组腺病毒质粒。利用HEK293细胞包装并扩增重组腺病毒Ad-195。Ad-195感染肺癌细胞A549后,利用miRNA的定量RT-PCR技术检测Ad-195在细胞中表达miR-195情况。随后荧光素酶报告基因实验证明,Ad-195表达的miR-195能够作用于BCL2基因上预测的miR-195靶位点。结果:实时定量PCR检测显示,Ad-195感染肺癌细胞A549后,miR-195表达水平有显著的上调。结论:miR-195的腺病毒表达载体构建成功,能够用于在细胞内过表达具有生物学功能的miR-195。
- 张浩明付汉江铁轶朱捷邢瑞云汪成富郑晓飞
- 关键词：微RNA腺病毒科质粒A549
- 串联MS2衣壳蛋白和MS2特异结合RNA表达载体构建及应用
- 2012年
- 目的构建体内研究RNA-蛋白相互作用的表达载体。方法利用MS衣壳蛋白可与MS2结合位点(MS2bs)RNA特异性结合的特点,通过设计特异引物,构建pcDNA3.0-Flag-2XMS2和pcDNA3.0-12XMS2bs表达载体,以及表达MEG3非编码RNA的表达载体pcDNA3.0-MEG3V1-12XMS2bs。共转染细胞,进行RNA免疫沉淀,所得RNA进行实时定量PCR分析验证。结果成功构建了pcDNA3.0-Flag-2XMS2和pcDNA3.0-12XMS2bs表达载体,实时定量PCR结果表明,与对照相比能明显富集MEG3V1非编码RNA分子。结论成功构建了体内研究RNA-蛋白质相互作用的表达载体,为RNA-蛋白相互作用研究提供了新的技术方法。
- 蒋太峰付汉江刘珊珊金英花朱捷李恩民郑晓飞
- 关键词：RNA结合蛋白
- RNAi抑制apobec-1基因表达对NF1编辑的影响
- 对多发性神经纤维细胞瘤(neurofibromatosis type 1,NF1)的研究发现mRNA的转录后修饰-RNA编辑的异常能导致细胞的癌变。在恶性多发性神经纤维瘤细胞中,neurofibromin mRNA中编码...
- 孙芳付汉江铁轶江红朱捷郑晓飞
- 文献传递
- 过表达MDA-7/IL-24蛋白的亚细胞定位被引量：1
- 2006年
- 目的了解标签蛋白GFP的位置对过表达的MDA-7/IL-24融合蛋白亚细胞定位的影响。方法分别构建在MDA-7/IL-24 cDNA的5'端和3'端带有GFP-tag的重组表达质粒pEGFP-C1-mda-7/IL-24和pEGFP-N3-mda-7/IL-24,瞬时转染猴胚肾Cos7细胞,48h后用Hoechst 33258染核,在荧光显微镜下观察GFP-MDA-7/IL-24融合蛋白在Cos7细胞的亚细胞分布。结果测序表明重组质粒pEGFP-C1-mda-7/IL-24和pEGFP-N3-mda-7/IL-24构建正确;分别转染Cos7细胞后,在氨基端带有GFP-tag的MDA-7/IL-24融合蛋白表达阳性细胞中,绿色荧光均匀分布于胞浆和胞核,但在羧基端带有GFP-tag的MDA-7/IL-24融合蛋白表达阳性细胞中,绿色荧光则分布于核膜外侧和胞浆。结论GFP-tag位置的不同对过表达融合蛋白MDA-7/IL-24的亚细胞定位有显著的影响。
- 马群风江红刘锟朱捷郑晓飞
- 关键词：绿色荧光蛋白
- hTERT启动子调控caspase3基因的特异性表达及其抑癌作用被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨端粒酶催化亚基(hTERT)启动子调控caspase3(半胱天冬酶3)基因在端粒酶阳性肿瘤细胞中表达的特异性及在体内外的抑癌作用。方法:构建hTERT启动子调控的caspase3基因的真核表达载体,通过RT PCR、瞬时转染、MTT法、流式细胞术和动物实验方法,检测hTERT启动子调控caspase3基因表达对肿瘤细胞生长的影响。结果:hTERT启动子调控caspase3基因在端粒酶阳性肿瘤细胞HepG2中有明显表达,而在正常人胚肺成纤维细胞(humanembryoniclungfibroblast,HEL)中未见表达;caspase3表达能对端粒酶阳性肿瘤细胞HepG2、HeLa、Glc和A549细胞的增殖产生明显抑制作用,抑制率为10.5%～37.9%;同时也可以诱导HepG2、HeLa、Glc和A549细胞发生凋亡,凋亡率为15.39%～35.19%;而对端粒酶阴性的正常细胞HEL没有明显的影响。动物实验结果显示,hTERT启动子调控的caspase3基因转染对HepG2细胞的体内增殖具有抑制作用。结论:hTERT启动子调控的caspase3基因表达载体是一种有应用潜力的肿瘤基因治疗载体。
- 杨义军朱捷付汉江孙志贤郑晓飞
- 关键词：转染端粒酶催化亚基启动子
