孙志贤
- 作品数：158 被引量：636H指数：12
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学核科学技术文化科学更多>>
- 烯醇化酶和C-反应蛋白对肺癌的诊断价值
- 1992年
- 从治疗角度出发,肺癌分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)。前者近年来由于化疗的进步,及时确诊、合理治疗,大大改善了预后。目前癌标记物日益增多,但能区别组织类型者甚少。80年代国外开展新型肿瘤标记物神经元特异性烯醇化酶(NSE)
- 纪树国徐可钧王岳松赖进详孙志贤
- 关键词：烯醇化酶C-反应蛋白肺癌肿瘤标记物
- 乳头状甲状腺癌基因PTC1对ATM细胞定位和功能的影响被引量：1
- 2004年
- 背景与目的:ret基因重排活化与乳头状甲状腺癌密切相关,但它致癌的分子机制还不清楚,本文将通过研究DNA双链断裂(double-strandbreaks,DSBs)感应分子毛细血管扩张共济失调症突变蛋白ATM(mutatedinataxiatelangiectasia)与原癌基因Ret重排活化蛋白PTC1的相互作用,探讨ret重排致癌的分子机制。方法:以抗ATM抗体免疫沉淀的ATM为激酶,抗HA抗体免疫沉淀的PTC1的TK结构域为底物,进行体外磷酸化,检测ATM对ret-TK结构域的磷酸化作用;分别分离COS7细胞胞浆和胞核蛋白,研究PTC1过表达对ATM-LZPR定位的影响;用磷酸化p53抗体检测PTC1过表达对p53磷酸化水平的影响;流式细胞术分析PTC1过表达对细胞周期的影响。结果:体外磷酸化实验证明TK可以被ATM体外磷酸化;Western印迹检测发现单独表达LZPR时其在胞浆、胞核均有表达,而PTC1与LZPR共表达后,LZPR结构域仅在胞浆表达;用磷酸化p53抗体检测发现过表达PTC1抑制了ATM对p53的磷酸化作用,引起细胞G1/S期周期阻滞。结论:PTC1可能通过使ATM滞留于胞浆,干扰ATM对p53的磷酸化及其对细胞下游靶基因的转录活化功能,从而使细胞周期检查点机制失控。
- 铁轶毛建平刘斌宋宜董燕孙志贤
- 关键词：乳头状甲状腺癌癌基因ATM细胞定位影响因素
- 辐射诱导Gadd45基因表达作为生物剂量计的实验室评估被引量：2
- 2008年
- 为了考察电离辐照后人外周血中Gadd45基因表达的个体差异,评价Gadd45作为基因表达辐射生物剂量计的实用性,采集了27个健康人外周血进行60Co照射,提取白细胞mRNA,以β-actin作为内对照基因,建立了相对标准曲线法实时定量聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法,并以此方法探索辐照后Gadd45表达的剂量-效应关系。结果表明,0～2.5Gy剂量范围内,Gadd45的mRNA表达水平随照射剂量增加而上调,通过拟合建立了0～2.5Gy剂量范围内,Gadd45/β-actin相对表达量与照射剂量间的剂量-效应直线方程(y=0.216+0.258x,p<0.001,R2=0.650)。发现Gadd45 mRNA表达水平在个体间存在一定差异,应用该剂量-效应直线方程,可以对0～2.5Gy照射剂量范围内的血液照射剂量作相对估算。
- 刘斌董燕宋宜郑晓飞孙志贤
- 关键词：外周血白细胞GADD45
- 人外周血活化淋巴细胞中Survivin蛋白表达的分子机制研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨活化淋巴细胞中Survivin蛋白诱导表达的信号转导通路、分子级联反应和生物效应,揭示Survivin蛋白表达调控的分子机制。方法:用PHA和rhIL-2刺激培养人外周血单个核细胞,附加JAK抑制剂—AG490的处理,以Western blot检测Survivin和相关蛋白的表达;以流式细胞术(FCM)分析细胞周期和细胞分裂增殖。结果:刺激培养的细胞按照时序先后出现的分子和细胞学反应为:Stat3和Stat5磷酸化→CyclinD3、CyclinE蛋白水平上调→细胞进入S期及Survivin蛋白起始表达→细胞有丝分裂及Survivin蛋白表达水平增加。AG490对于上述反应均呈现明显的抑制作用,但对周期抑制蛋白P21和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平没有影响。结论:Survivin蛋白的表达依赖JAK-Stat信号转导通路的早期活化,通过上调CyclinD3和CyclinE周期蛋白水平,启动细胞周期的运行,诱导Survivin蛋白的周期时相依赖性表达,参与细胞有丝分裂与增殖。
- 董燕梅柱中钱俊杰宋宜田宝磊刘斌孙志贤
- 关键词：SURVIVIN蛋白活化淋巴细胞信号转导
- 蛇毒纤维蛋白原水解酶被引量：23
- 1997年
- 蛇毒纤维蛋白原水解酶毛建平孙志贤（军事医学科学院放射医学研究所北京１００８５０）关键词蛇毒纤维蛋白质凝血酶样酶纤溶酶许多蛇毒中含有降解纤维蛋白原或纤维蛋白的酶类，它们作用于高等动物血液循环系统，防止中毒动物血液凝固以利于其它毒素迅速扩散和生效。人类于...
- 毛建平孙志贤
- 关键词：蛇毒纤维蛋白原水解酶
- 流感泰得在小鼠模型中抗流感病毒活性研究被引量：8
- 2000年
- 为了在动物整体水平评价流感泰得 (flutide ,FT)抗流感病毒活性 ,建立了流感病毒感染小鼠实验模型 ,并测定了FT在小鼠模型中的抗病毒活性和对小鼠的急性毒性作用。结果表明 ,流感病毒A 京防 86 1(H1N1)和A 沪防 93 9(H3N2 )在小鼠体内连续传代 6次时即对小鼠具有感染性 ,表现为小鼠体重下降 ,小鼠肺脏湿重增加并能检测到很高的病毒滴度。在小鼠模型中FT具有较高的抗病毒活性 ,表现在FT能明显提高病毒感染小鼠的存活率 ,抑制病毒感染引起的小鼠体重下降和肺湿重增加。当FT剂量为 6.5× 10 -4μmol g和 32 .5× 10 -4μmol g滴鼻给药时 ,小鼠存活率分别提高30 %和 5 0 % (P <0 .0 5 ) ;给药途径对FT抗病毒作用有一定影响 ,静脉注射高于腹腔注射和滴鼻给药 ;当接种剂量为 5 2× 10 -4μmol g时 ,FT对小鼠的生长状态、体重和肺脏湿重等均无影响。以上结果为抗流感病毒反义寡核苷酸药物研究向临床前试验过渡提供了试验依据。
- 陈忠斌王升启孙志贤杨秉呼管伟
- 关键词：流感病毒小鼠模型抗病毒作用
- 毛细血管扩张性共济失调突变蛋白在细胞凋亡过程中被Caspase┐3降解被引量：5
- 1998年
- 新近的研究揭示：ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶在细胞凋亡中起着死亡执行者的重要功能．一些蛋白相继被证明在细胞凋亡中可被ｃａｓｐａｓｅ特异切割，其中参与ＤＮＡ损伤修复过程的聚ＡＤＰ核糖聚合酶（ＰＡＲＰ）以及ＤＮＡ依赖的蛋白激酶（ＤＮＡ－ＰＫ），在细胞凋亡过程中被ｃａｓｐａｓｅ选择性切割具有特殊的功能意义．为探索与ＤＮＡ－ＰＫ催化亚基有较高同源性，含有ｃａｓｐａｓｅ切割位点，且功能上目前也被认为是感受ＤＮＡ损伤和参与信号传导途径的ＡＴＭ（Ａｔａｘｉａｔｅｌａｎｇ－ｉｅｃｔａｓｉａｍｕｔａｔｅｄ）蛋白，是否在凋亡过程中也可被切割而降解？应用体外转录与翻译系统获得ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域，同时通过建立无细胞反应体系获得含ｃａｓｐａｓｅ活性的细胞抽提液，将两者在体外共同保温．结果发现：ＡＴＭ蛋白与ｃａｓｐａｓｅ－３能免疫共沉淀，ＡＴＭ蛋白的ＰＩ３Ｋ结构域可被ｃａｓｐａｓｅ－３特异切割，并观察到辐射诱发细胞调亡中ＡＴＭ蛋白的降解．从而进一步证实了ＤＮＡ损伤修复的抑制，促进细胞凋亡的发生．
- 童新孟祥兵董燕孙志贤
- 关键词：CASPASE-3细胞凋亡DNA损伤修复ATM
- 癌基因突变产物的免疫学诊断与治疗意义被引量：2
- 1993年
- 癌基因与抑癌基因突变产物是目前肿瘤免疫学研究的热点和前沿领域.本文在简介癌基因突变类型的基础上着重就其产物的免疫学诊断与治疗意义进行了阐述和讨论.
- 吕星孙志贤
- 关键词：癌基因免疫学诊断
- 肿瘤细胞辐射抗性的分子基础及增敏措施研究
- 周平坤孙志贤孙伟建安静孙薏魏康隋建丽王林崔玉芳严雨倩王会平夏寿萱
- 技术领域：肿瘤的放射治疗领域。阐述了癌细胞辐射抗性的关键分子基础和主要监测指标为DNA 双链断裂(DSB)修复效率和损伤残留率，DSB关键修复蛋白DNA-PKcs在肿瘤细胞中异常高表达是主要贡献因素。针对DNA-PKcs...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤细胞辐射抗性DNA损伤
- pH敏脂质体对反义寡核苷酸抗流感病毒活性的影响被引量：10
- 1999年
- 为了研究具有临床应用前景的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 脂质体转运系统，以临床药用大豆磷脂为主要原料制备了ｐ Ｈ 敏脂质体，并测定了脂质体体外转染活性、ｐ Ｈ 敏特性、细胞毒性和对 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 抗流感病毒活性的影响 结果发现，批号为 ９８０５１９０３，９８０５１１０２ 和 ９８０５１２０２ 的脂质体具有较高转染活性，但只有ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ 转染活性的 １／５０～１／１００当质粒／脂质体（ Ｗ ／ Ｗ ）为 １∶４～１∶８，转染时间为 ３～５ ｈ，质粒量为 ０５ μｇ，转染后 ２４～４８ ｈ 内检测时转染活性最高 脂质体 ９８０５１２０２ 表现明显 ｐ Ｈ值依赖溶解红细胞膜特性，而脂质体 ９８０５１１０２ 和 ９８０５１９０３ 的 ｐ Ｈ 敏特性不明显 脂质体细胞毒性明显降低，如 ９８０５１９０３、９８０５１１０２ 和 ９８０５１２０２ 的毒性分别是 ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ 毒性的 １／１６、１／８ 和 １／４ｐ Ｈ 敏脂质体 ９８０５１２０２ 具有促进 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 抗流感病毒作用，当 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 浓度为 ０２ μｍ ｏｌ／ Ｌ 时，ｐ Ｈ 敏脂质体 ９８０５１２０２ 使其抗病毒活性提高 ５ 倍，但 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 浓度较高时ｐ Ｈ 敏脂质体对 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ抗?
- 陈忠斌王升启王弘朱宝珍孙志贤
- 关键词：反义寡核苷酸流感病毒抗病毒作用
