徐夏红
- 作品数：20 被引量：25H指数：3
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- 心肌急性梗死对骨髓及外周血心肌转录因子Nkx2-5的影响
- 2006年
- 目的观察小鼠心肌梗死后,骨髓及外周血单核细胞心肌特异性转录因子Nkx2-5的变化。方法用大剂量异丙肾上腺素(10 mg/kg)连续注射3天造成小鼠心肌急性缺血性梗死模型,第3天注射后30 min,通过眼球摘除法取外周血,分离双后肢股骨、胫骨,冲洗骨髓腔得骨髓液,经密度梯度离心分离出骨髓及外周血单核细胞,正常组同心肌缺血梗死组。通过细胞Western blotting分析,比较正常组和心肌梗死组骨髓及外周血单核细胞中心肌特异性转录因子Nkx2-5的变化。结果正常骨髓单核细胞中存在Nkx2-5的表达,正常外周血单核细胞中Nkx2-5无表达;心肌梗死后骨髓及外周血Nkx2-5表达均明显增加,同正常组比较有统计学意义,P<0.05。结论正常骨髓中无需培养或诱导即存在表达Nkx2-5的单核细胞,在心肌急性梗死后向外周血动员增加。
- 徐志伟徐夏红董红燕张中明
- 关键词：单核细胞NKX2-5
- 低氧反应元件对缺血心肌转染人血管内皮生长因子165基因表达的调控作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察低氧反应元件（HRE）对低氧、复氧心肌细胞及缺血心肌转染人血管内皮生长因子165（hVEGF165）基因表达的调控作用。方法分离新生SD大鼠心肌细胞，采用不同氧条件进行培养；建立猪心肌缺血-复灌动物模型，将在HEK293T细胞包装后获得的rAVV-9HRE-hVEGF165病毒分别转染心肌细胞及动物缺血心肌。取培养心肌细胞及培养液，另取缺血区心肌组织，采用细胞免疫荧光法、酶联免疫吸附试验（ELISA）及Western blot方法分别测定hVEGF砌蛋白表达；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定hVEGF165 mRNA表达；Ⅷ因子染色，计数缺血心肌新生血管变化。结果病毒转染率为87％；心肌细胞A、B及E组培养液中hVEGF165蛋白含量显著升高（P〈0．01），细胞免疫荧光hVEGF165蛋白染色呈阳性；RT-PCR检测显示，心肌细胞A、B及E组可见484bp目的条带；在动物整体水平，与转基因缺血组比较，转基因复灌组hVEGF165 mRNA及蛋白表达显著减弱（P〈0．01），心肌毛细血管密度亦减少。结论HRE作为氧敏感基因调控开关能有效地调控缺血心肌转染hVEGF165基因的表达。
- 董红燕姜波张中明王伟张宜乾徐夏红
- 关键词：低氧反应元件血管内皮生长因子心肌基因表达
- 低氧反应元件调控缺血心肌转染hVEGF_(165)基因表达对新生血管的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨动物整体水平下低氧反应元件（HRE）调控缺血心肌转染hVEGF165基因表达对促生血管的影响。方法建立兔心肌缺血动物模型,实验分为转基因组、缺血对照组、载体对照组和假手术组。取缺血区心肌组织,检测心肌组织HIF-1α和hVEGF165表达,应用CD31及α-SMA免疫组化染色测定缺血心肌新生血管密度变化。结果心肌缺血早期,伴随内源性HIF-1α表达增加,hVEGF165mRNA及蛋白表达相继升高,缺血4～6周至高峰（P〈0.01）,缺血12周,hVEGF165表达下调至缺血前水平。缺血12周,转基因组CD31（＋）血管密度显著高于缺血对照组（P〈0.01）;但是,与缺血前相比,缺血12周,转基因组α-SMA（＋）血管密度显著低于缺血前水平（P〈0.01）。结论HIF-1α-HRE对缺血心肌转染hVEGF165表达发挥了有效的正相调控作用,有效地促进缺血心肌毛细血管生成。但hVEGF165作为促血管生成早期调节因子,其促生血管的结构尚不完整。
- 董红燕王强张中明袁延亮张宜乾徐夏红
- 关键词：低氧反应元件基因调控心肌细胞
- HRE调控缺血心肌转染hVEGF165基因表达对新生血管的影响
- 目的:探讨低氧反应元件(HRE)调控缺血心肌转染hVEGF165基因表达对新生血管的影响。方法:建立兔缺血心脏动物模型,实验分为4组:Ⅰ组(缺血转基因组);Ⅱ组(缺血对照组);Ⅲ组(空载体对照组)和Ⅳ组(假手术组)。取缺...
- 董红燕王强张宜干徐夏红张中明
- 碱性成纤维细胞生长因子对脑室下层神经元前体细胞的影响
- 2000年
- 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对离体培养的生后大鼠前脑脑室下层 (SVZ)神经元前体细胞增殖、分化的影响。方法 取体重 10 0～ 15 0g雄性SD大鼠SVZ细胞进行离体培养 ,培养液分别为NeurobasalMedium/B2 7和NeurobasalMedium/B2 7+bFGF。倒置显微镜下观察其生长变化的形态学特征 ,并作细胞计数 ;免疫细胞化学染色观察其神经化学性质。结果 ①培养液中添加bFGF者 ,其SVZ源神经细胞的数目明显多于未添加bFGF者 ;②在该 2种培养液条件下 ,SVZ源神经元前体细胞都能分化为成熟神经元 ,且其中的大多数神经元是γ-氨基丁酸能神经元 ,只有少量神经元是谷氨酸能或多巴胺能神经元。结论 ①bFGF能促进离体培养的生后大鼠SVZ源神经元前体细胞的增殖 ;②在特定的培养条件下 ,生后大鼠SVZ源神经元前体细胞能分化为不同性质的神经元。
- 高殿帅徐夏红张凤真王德广王婷董红燕张光毅
- 关键词：神经元前体细胞细胞培养BFGF
- 不同分离方法对人胚胎脑海马区神经干细胞体外生长的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 比较不同分离方法对人胚胎脑海马区神经干细胞生长的影响。方法 取胎龄 8～ 12周药物流产的人胚胎脑 ,分别用胰蛋白酶消化法和机械分离法分离海马区细胞 ,均以 10 6个细胞 /ml接种到含人表皮生长因子 (h -EGF)、人碱性成纤维细胞生长因子 (h -bFGF)和人白细胞抑制因子 (h -LIF)的基础培养液中培养 ,以含1%胎牛血清 (FBS)的DMEM/F12和多聚鸟氨酸诱导分化 ,免疫细胞化学鉴定。结果 胰蛋白酶消化组和机械分离组分离到的活细胞分别占各自细胞总数的 4 8.2 %和 6 1.7% (P <0 .0 5 ) ;7天后 ,两组均形成许多直径从几十到几百个微米不等的细胞球 ,但机械分离组的细胞球数目明显多于胰蛋白酶消化组。取细胞球诱导分化及免疫细胞化学染色鉴定 ,细胞分别呈RNA -结合蛋白、β-Ⅲ管蛋白、胶质原纤维酸性蛋白和半乳糖脑苷脂免疫细胞化学反应阳性。结论 人胚胎脑海马区有神经干细胞存在 ,离体培养时能分裂增殖 ,并能被诱导分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。机械分离法可以获得更多的活细胞 ,原代培养易形成较多的细胞球。
- 姚瑞芹朱海兵徐铁军张凤真徐夏红
- 关键词：人胚胎神经干细胞免疫细胞化学胰蛋白酶细胞培养
- 新生儿溶血症心肌细胞超微结构特征及线粒体内元素分析被引量：1
- 1993年
- 应用电镜及电镜X射线显微分析技术,对一例新生儿溶血症心肌细胞进行了超微结构形态观察并对其线粒体作了元素分析。结果表明,该例心肌细胞病理形态改变明显。线粒体内可见绒球样电子致密体,X射线元素分析证明,该结构中含有大量的氯,而仅含极少量的钙。作者对该异常结构的形成机理及氯沉积的原因进行了讨论。
- 董红燕于红丽徐夏红张中明
- 关键词：新生儿溶血症心肌超微结构
- 抗C5b-9复合物抗血清对大鼠ATS性肾炎病变的抑制作用
- 2000年
- 给大鼠注射抗胸腺细胞血清(ATS)复制系膜增生性肾小球肾炎即ATS性肾炎(ATSN)模型。同时应用兔抗大鼠补体C5b-9复合物抗血清进行处理，然后定期观察各组大鼠24h尿蛋白总量、肾小球内细胞总数、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达及肾小球内C5b-9复合物的沉积情况。结果发现，用C5b-9抗血清处理的ATSN组上述各项指标均较未用C5b-9抗血清处理的ATSN组低。提示：抗鼠C5b-9复合物抗血清对大鼠ATSN病变有抑制作用。
- 王迎伟徐夏红高丰光汤仁仙何球藻秦慧莲
- 关键词：系膜增生性肾小球肾炎补体
- 低氧诱导因子在兔慢性缺血心肌中的表达趋势被引量：1
- 2010年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）在兔缺血心肌的表达趋势。方法建立兔缺血心肌动物模型,于冠状动脉结扎前及术后第2、4、6、8、10、12周取各组动物缺血区心肌组织,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（Q-RT-PCR）法测定心梗区HIF-1αmRNΑ的表达;应用免疫组化及West-ern Blot法测定HIF-1α蛋白表达。结果与非缺血组相比,兔心肌缺血早期HIF-1α表达水平显著增高（P〈0.01）,HIF-1αmRNA及蛋白分别于第2及第4周达到高峰,持续约24周后,于第8周再次升高,并随之开始持续缓慢降低,但在缺血后第12周仍高于正常心肌表达量。结论HIF-1α的表达与心肌梗死区氧供关系密切,在心肌缺血早期,高表达HIF-1α参与了维持氧稳态及对低氧代谢的适应,在慢性缺氧期,随着HIF-1α调控多种下游靶基因表达,增加组织氧供使其表达渐显著降低。
- 徐夏红王强董红燕姜波张中明
- 关键词：低氧诱导因子心肌缺血基因表达
- 急性心肌缺血对骨髓Nkx2-5^+心脏祖细胞的动员作用(英文)被引量：1
- 2009年
- 骨髓源性Nkx2-5+心脏祖细胞(bone marrow-derived Nkx2-5+ cardiac progenitor cells)具有高度特异性分化为心肌细胞的潜能,在病理状态下可能参与内源性心肌修复。但在器官缺血、特别在急性心肌缺血病理状态下,该细胞如何被动员的机制尚不清楚。本研究在观察Nkx2-5+心脏祖细胞在骨髓中分布特征的基础上,分析急性心肌缺血对骨髓源性Nkx2-5+心脏祖细胞的动员作用,探讨其细胞动员的可能机制。分别建立小鼠急性心肌缺血及脑、后肢急性缺血动物模型。采用纳米金-银免疫标记透射电镜、免疫荧光标记及分子生物学等检测方法,观察骨髓Nkx2-5+心肌祖细胞的定位及其形态学特征;检测急性心肌缺血后外周血Nkx2-5+细胞比例变化、缺血不同时段骨髓及外周血中Nkx2-5蛋白表达的变化;比较不同器官缺血对Nkx2-5+心脏祖细胞的动员作用;应用SDF-1/CXCR4通路特异性阻断剂AMD3100,分析SDF-1在急性心肌缺血后对Nkx2-5+心脏祖细胞动员作用的影响。结果显示:Nkx2-5+心脏祖细胞呈散在分布于骨髓血窦旁。与对照组相比,急性心肌缺血后,外周血Nkx2-5+心脏祖细胞比例显著增加(P<0.01)。心肌缺血早期(1d),外周血Nkx2-5蛋白表达显著增加(P<0.01),并可持续7d;而此间,骨髓中Nkx2-5蛋白表达立即升高,随后则降低。应用AMD3100阻断剂后,心肌缺血组外周血Nkx2-5蛋白表达受到明显抑制(P<0.05)。脑、后肢缺血后,外周血Nkx2-5蛋白表达显著少于急性心肌缺血组(P<0.01),而与对照组相比无显著差异。上述结果提示,生理状态下,骨髓中存在Nkx2-5+心脏祖细胞亚群;急性心肌缺血对骨髓Nkx2-5+心脏祖细胞具有显著的动员作用,且该动员作用具有显著的器官特异性,SDF-1/CXCR4通路在该动员作用中发挥了重要的趋化作用。
- 董红燕徐志伟张中明于红丽徐夏红
- 关键词：骨髓NKX2-5动员心肌缺血
