唐奇
- 作品数：53 被引量：55H指数：5
- 供职机构：南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 狂犬病病毒糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫学特性分析被引量：2
- 2015年
- 目的 :利用Bac-To-Bac杆状病毒昆虫细胞表达系统对狂犬病病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein,RVG)基因进行克隆、表达、纯化,并对重组RVG进行免疫学特性鉴定。方法:参照Gen Bank收录的狂犬病病毒CVS-11株RVG基因序列,设计特异性引物,扩增目的基因。RVG基因经Bam HⅠ/KpnⅠ双酶切后定向克隆到p Fast Bac-GP67B载体上,阳性重组转座质粒进一步转化E.Coli DH10Bac感受态细胞,经蓝白斑筛选及PCR鉴定后获得重组穿梭载体r Bacmid-RVG,将其转染至对数生长期的Sf-9昆虫细胞,进行重组RVG的真核表达。His-Trap HP纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。重组RVG免疫小鼠,检测其免疫原性和血清中和活性。结果:用Bac-To-Bac杆状病毒昆虫细胞表达系统表达并纯化了重组RVG,分子量约58 000。经重组RVG免疫后的小鼠血清具有中和活性。结论:重组RVG具有天然RVG的活性,为进一步研制亚单位疫苗及制备筛选中和抗体奠定了基础。
- 王晓蕾陈芳芳袁伟钱国强耿以如张晓杨瑾熊四平陈雅唐奇仇镇宁冯振卿朱进
- 关键词：狂犬病病毒狂犬病病毒糖蛋白纯化抗体
- 人源抗TLR4抗体IgG的制备及其中和特性分析被引量：2
- 2015年
- 目的 :构建全人源抗人Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)抗体轻、重链表达载体,在293Free style细胞中表达并纯化,分析该重组全分子抗体的生物学活性。方法:设计引物扩增全人源抗人TLR4抗体可变区编码序列,将其分别克隆到真核表达载体p FUSE-CHIg-h G1和p FUSE-CLIg-hl中,共转染至293Free style细胞,表达产物用protein A亲和层析柱纯化。应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、Western blot、免疫共沉淀、质谱分析及蛋白芯片检测抗体的免疫学特性,并检测该抗体对人单核细胞淋巴瘤THP1细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α表达的影响。结果:成功构建全人源抗人TLR4抗体真核表达载体,获得的全分子抗TLR4抗体保持了与抗原的结合活性,对THP-1细胞TNF-α表达的抑制率可达85.7%。结论:重组全人源抗TLR4 Ig G保持了与TLR4的结合特异性,并具有明显的中和作用,对炎症治疗具有潜在的应用价值。
- 杨瑾唐奇熊四平蔡炳刚朱旭辉王长军汪茂荣冯振卿朱进
- 关键词：TOLL样受体4中和抗体
- 日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体及其制备方法、应用
- 本发明涉及一种日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体及其制备方法、应用，属于基因工程技术和制备免疫治疗药物领域。本发明是利用基因工程技术制备日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体，应用over...
- 朱进朱晓娟许静唐奇冯振卿管晓虹
- 文献传递
- 杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠ATF3单克隆抗体
- 本发明涉及单克隆抗体，特别涉及一种杂交瘤细胞株WXR分泌的单克隆抗体；一种杂交瘤细胞株WXRCCTCC C201034；一种杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠转录激活因子3(ATF3)的单克隆抗体及其制成试剂盒；本发明不仅为...
- 王迎伟夏梅任琎唐奇邱文
- 中和性抗人巨细胞病毒抗体的制备及表位鉴定
- 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)归属于疱疹病毒乙亚科的巨细胞病毒属,是人类疱疹病毒组中最大的一种病毒,为dsDNA病毒,直径约200 nm,基因组大小为230~240 kbp。人类是H...
- 唐奇
- 关键词：人巨细胞病毒中和性抗体嵌合抗体人源化抗体
- 文献传递
- 人源抗滋养层细胞表面抗原-2基因工程抗体Fab的制备及特性分析被引量：5
- 2010年
- 应用噬菌体抗体库技术制备全人源抗滋养层细胞表面抗原-2(Trop-2)特异性Fab抗体片段.抗体库经细胞筛选和固相抗原筛选,获得特异性的阳性克隆.阳性载体经核酸序列分析后,构建工程菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析,呈现28ku和32ku大小的两条蛋白质条带.Fab分子经流式细胞术、细胞免疫荧光检测,结果表明,Fab能够与BxPc3细胞膜蛋白特异性结合,而与NIH3T3细胞不结合.免疫共沉淀与质谱分析结果表明,该Fab分子能够与Trop-2蛋白特异性结合.免疫组化显示,该抗体可结合胰腺癌细胞膜蛋白,在细胞培养液中加入Fab,能够抑制BxPc3细胞的生长.以上研究结果提示,该抗体有望成为胰腺癌临床影像诊断或治疗的候选分子.
- 林红梁洁张慧林唐奇苏亦平Brian Cao朱进管晓虹
- 关键词：噬菌体抗体库胰腺癌
- 人滋养层细胞表面抗原2在人胰腺癌中的表达及其临床意义被引量：8
- 2011年
- 目的 观察并探讨人滋养层细胞表面抗原2（Trop-2）在人胰腺癌中的表达及其临床意义.方法 用RT-PCR检测8例胰腺癌组织中Trop-2 mRNA的表达,免疫荧光检测人胰腺癌细胞系BxPc3中Trop-2蛋白的表达;免疫组化方法检测Trop-2蛋白在31例人胰腺癌组织及其癌旁组织芯片上的表达情况.统计分析Trop-2的表达与相应临床病理特征之间的关系.结果 胰腺癌组织中Trop-2 mRNA有表达,Trop-2蛋白主要表达在胰腺癌细胞膜上;Trop-2在人胰腺癌旁组织中的阳性表达率为9.7%,胰腺癌中阳性率为87.1%,其阳性表达程度随癌组织分化程度减低而增高（P＜0.01）;Trop-2的表达与患者年龄、性别无关.结论 Trop-2的表达与人胰腺癌的发展及恶性程度有关,可作为临床检测胰腺癌恶性程度标记,也可作为靶向治疗胰腺癌的潜在靶点。
- 仇金荣唐奇林红王忠灿李玉华朱进
- 关键词：胰腺肿瘤基因表达
- 日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体的构建 表达与初步鉴定
- 2009年
- 目的构建和表达日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体,初步鉴定表达产物的活性。方法用overlap PCR法扩增双链抗体基因VH-GGGGS-VL,将双链抗体基因重组入原核表达载体pBAD/gⅢ。表达质粒转化E.coli TOP10F′,左旋阿拉伯糖诱导表达。对表达产物进行分离纯化,ELISA检测纯化蛋白与血吸虫病人血清抗体的结合活性。结果测序证实双链抗体基因正确,构建了双链抗体的原核表达系统,双链抗体在细菌超声上清和沉淀内均有表达,分子量约为34kD。纯化产物经ELISA鉴定,结果表明NP30单特异性双链抗体可与血吸虫病人血清抗体特异性结合。结论构建和表达的日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30单特异性双链抗体具有与亲本单抗相同的结合活性。
- 朱晓娟许静李红顾春艳唐奇李玉华仇镇宁王祝鸣朱进冯振卿管晓虹
- 关键词：日本血吸虫抗独特型抗体蛋白表达
- 人源抗H7N9血凝素中和抗体IgG的制备及鉴定被引量：4
- 2016年
- 目的 :将从全人源Fab噬菌体抗体库筛选获得的抗H7N9血凝素Fab抗体基因进行基因工程改造,以表达全分子抗H7N9血凝素中和抗体Ig G,并验证其对H7N9型禽流感病毒的中和活性。方法:用H7N9型禽流感病毒血凝素筛选全人源Fab噬菌体抗体库,构建全分子Ig G抗体重、轻链表达载体,共转染293 Free Style(293F)细胞,表达并纯化Ig G抗体。应用ELISA及Western blot实验检测抗体免疫学活性,微量中和实验及鸡胚预防保护实验检测其中和活性,血凝抑制试验判断其结合血凝素亚基。结果:成功筛选出1株全人源抗H7N9血凝素Fab抗体基因并构建Ig G真核表达载体。获得的全分子Ig G抗体重、轻链序列正确,并可特异性结合H7N9血凝素。微量中和实验证明其对H7N9型禽流感病毒有良好中和活性,中和滴度为15.6μg/m L。鸡胚预防保护实验显示抗体用量为200μg时可达100%保护率。血凝抑制试验表明其结合血凝素HA2亚基。结论:制备的重组全人源全分子抗H7N9血凝素Ig G抗体可特异性识别H7N9型禽流感病毒血凝素,对H7N9型禽流病毒有显著的中和作用,为进一步研发用于禽流感防治的抗体药物奠定基础。
- 陈雅熊四平唐奇王怡雯耿以如顾慧徐亚如周荧仇镇宁冯振卿朱进
- 关键词：血凝素中和抗体
- 一种可自分泌TLR4 scFv且靶向cMet的嵌合抗原受体修饰的T细胞及其应用
- 本发明提供一种可自分泌TLR4 scFv且靶向cMet的嵌合抗原受体修饰的T细胞及其应用；本发明的T细胞含有识别cMet的嵌合抗原受体的编码序列和具有分泌信号肽的TLR4 scFv抗体的编码序列；本发明的经嵌合抗原受体修...
- 唐奇朱进郭娇娇彭燕冯振卿毛圆常新霞
- 文献传递
