潘晓梅
- 作品数：7 被引量：24H指数：3
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省科技重大专项计划中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪干扰素-γ基因的表达、纯化及活性分析被引量：2
- 2009年
- 依照猪IFN-γ基因序列设计引物,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a,构建pET-30a-pIFN-γ重组表达载体,转化入寄主菌BL21(DE3),经PCR、双酶切、测序鉴定正确后,用IPTG进行诱导表达,可溶性的表达产物分别经镍柱和Sephadex-G100纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化,然后进行SDS-PAGE、Western-blot分析,并用细胞病变抑制法进行重组猪IFN-γ活性测定.结果表明:试验得到了高纯度的重组pIFN-γ,且纯化的重组猪IFN-γ蛋白具有较高的干扰病毒复制的活性,对PRV的活性为2.0×103U.mg-1,而对标准O型口蹄疫病毒的活性为2.56×105U.mg-1.
- 潘晓梅窦永喜骆学农刘琼张冬峰岳城才学鹏
- 关键词：蛋白纯化活性分析
- 重组猪干扰素-γ的体外抗弓形虫作用被引量：2
- 2008年
- 在体外以不同剂量的重组猪IFN-γ刺激PK15细胞和猪腹腔巨噬细胞,观察了其对弓形虫入侵细胞和在细胞内增殖的影响。结果表明,随着重组猪IFN-γ剂量的增大,巨噬细胞的抗弓形虫作用逐渐增强,而不同浓度的重组猪IFN-γ对弓形虫入侵PK15细胞均无明显影响。推测重组猪IFN-γ可激活巨噬细胞抑制弓形虫的入侵和增殖,并与剂量有关;同时说明IFN-γ在非吞噬细胞内与在巨噬细胞内的作用不同。
- 潘晓梅窦永喜岳城才学鹏
- 关键词：刚地弓形虫PK15细胞腹腔巨噬细胞
- 猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2008年
- 采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115。采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot分析重组蛋白的表达情况。结果显示,TsCL-1与GenBank登录的TsCL的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.8%和100%,与肝片吸虫和大片吸虫组织蛋白酶氨基酸的同源性为76.3%。TsCL-1基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物的分子质量为42 ku左右;Western-blot分析表明,表达产物具有反应原性。
- 刘琼骆学农郭爱疆郑亚东潘晓梅岳城才学鹏
- 关键词：猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶毕赤酵母
- 绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因orf118的克隆及序列分析被引量：5
- 2008年
- 从甘肃景泰疑似羊痘患病绵羊的皮肤组织中提取基因组DNA,利用PCR技术,克隆糖蛋白orf118基因.比较分析表明,该基因由516个核苷酸组成,编码171个氨基酸,相对分子质量为19500,其碱基组成极不平衡,其中A+T含量占72.48%,G+C含量仅占27.52%.甘肃景泰株orf118基因同绵羊痘病毒TU-V02127株之间的核苷酸同源性最高达99.8%,氨基酸的同源性为100%;与疙瘩皮肤病病毒肯尼亚株和山羊痘病毒G20-LKV株之间的同源性分别为96.5%和94.8%.结构预测结果显示,orf118蛋白为分泌蛋白,具有2个N键连结糖基化位点和1个跨膜区.以上结果表明,orf118蛋白在不同的绵羊痘病毒流行株之间非常保守,具有潜在的疫苗和诊断价值.
- 张冬峰郑亚东骆学农王晓霞陈轶霞李辉侯俊玲潘晓梅刘琼景志忠岳城才学鹏
- 关键词：绵羊痘病毒糖蛋白PCR
- 猪干扰素-γ的表达、纯化及生物学活性研究
- 干扰素-γ(Interferon-gamma，IFN-γ)是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子，主要由活化的T细胞和NK细胞产生。IFN-γ对机体免疫系统具有强大的调节作用，是机体发挥免疫功能、清除体内病原体...
- 潘晓梅
- 关键词：猪Γ干扰素分离纯化生物学活性
- 文献传递
- 猪干扰素-γ的研究进展被引量：12
- 2008年
- 干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)是在特定的诱生剂作用下,由机体自身产生的一种维持机体自我稳定的防御性物质,是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,主要由活化的T细胞和NK细胞产生。由于其免疫调节、抗病毒和抗肿瘤的独特作用,在动物传染性疾病的预防和治疗中具有广阔的应用前景。对猪干扰素-γ产生、分子结构、检测、生物学活性及作用机制以及应用等方面做以下简要综述。
- 潘晓梅窦永喜才学鹏
- 关键词：分子结构生物学活性
- 猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性被引量：1
- 2008年
- 依照猪IFN-γ(pIFN-γ)成熟蛋白基因序列设计引物,将已扩增的pIFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了GST-pIFN-γ融合表达载体,该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了筛选和优化,筛选出最佳诱导表达条件后大量诱导表达,可溶性的表达产物经GST琼脂糖凝胶亲和纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化。经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实得到了高纯度的融合蛋白,该蛋白的分子质量为42ku。选择FMDV和PRV两种不同的病毒(RNA病毒和DNA病毒)进行GST-pIFN-γ抗病毒活性测定。结果表明,GST-pIFN-γ融合蛋白可有效抑制这两种病毒引起的细胞病变,其对FMDV的抑制作用远远大于对PRV的抑制。对GST-pIFN-γ融合蛋白的稳定性及机体毒副作用的研究表明,该pIFN-γ的稳定性有较大提高,而毒副作用大大降低。
- 窦永喜翟军军李健潘晓梅景志忠才学鹏
- 关键词：IFN-Γ基因蛋白纯化生物学活性
