刘琼
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国农业科学院兰州兽医研究所所长基金甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2008年
- 采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115。采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot分析重组蛋白的表达情况。结果显示,TsCL-1与GenBank登录的TsCL的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.8%和100%,与肝片吸虫和大片吸虫组织蛋白酶氨基酸的同源性为76.3%。TsCL-1基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物的分子质量为42 ku左右;Western-blot分析表明,表达产物具有反应原性。
- 刘琼骆学农郭爱疆郑亚东潘晓梅岳城才学鹏
- 关键词：猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶毕赤酵母
- 绵羊痘病毒甘肃流行株糖蛋白基因orf118的克隆及序列分析被引量：5
- 2008年
- 从甘肃景泰疑似羊痘患病绵羊的皮肤组织中提取基因组DNA,利用PCR技术,克隆糖蛋白orf118基因.比较分析表明,该基因由516个核苷酸组成,编码171个氨基酸,相对分子质量为19500,其碱基组成极不平衡,其中A+T含量占72.48%,G+C含量仅占27.52%.甘肃景泰株orf118基因同绵羊痘病毒TU-V02127株之间的核苷酸同源性最高达99.8%,氨基酸的同源性为100%;与疙瘩皮肤病病毒肯尼亚株和山羊痘病毒G20-LKV株之间的同源性分别为96.5%和94.8%.结构预测结果显示,orf118蛋白为分泌蛋白,具有2个N键连结糖基化位点和1个跨膜区.以上结果表明,orf118蛋白在不同的绵羊痘病毒流行株之间非常保守,具有潜在的疫苗和诊断价值.
- 张冬峰郑亚东骆学农王晓霞陈轶霞李辉侯俊玲潘晓梅刘琼景志忠岳城才学鹏
- 关键词：绵羊痘病毒糖蛋白PCR
- 牛环形泰勒虫血源细胞的生物反应器培养——营养物质消耗及代谢产物积累对细胞生长繁殖的影响
- 2009年
- 本文探讨了牛环形泰勒虫血源细胞活疫苗生产工艺中,营养物质消耗及代谢产物积累对血源细胞在生物反应器批培养中生长的影响。结果表明,牛环形泰勒虫血源细胞在生物反应器中接种5.0×105cells/ml,经60h细胞培养密度达到最大值2.19×106cells/ml。接种后在48h内,细胞生长迅速,未经生长适应期,就直接进入对数生长期;但培养到36h,葡萄糖就基本耗尽,48h后氨浓度上升,使得细胞生长的稳定期非常短暂,仅有12h;随后,细胞培养密度开始下降;96h,氨的积累量达到峰值270.52mg/l,细胞的生长受到明显的抑制,活性迅速下降,细胞生长进入衰亡期。到168h,细胞活力仅有5.91%。可见本次批培养中,营养物质葡萄糖初始浓度(2017.67mg/L)不足,而谷氨酰胺初始浓度可能(2.6mmol/L)偏高。
- 王延吴芬芳刘琼薛英黄炯
- 关键词：活疫苗细胞培养生物反应器
- 猪干扰素-γ基因的表达、纯化及活性分析被引量：2
- 2009年
- 依照猪IFN-γ基因序列设计引物,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a,构建pET-30a-pIFN-γ重组表达载体,转化入寄主菌BL21(DE3),经PCR、双酶切、测序鉴定正确后,用IPTG进行诱导表达,可溶性的表达产物分别经镍柱和Sephadex-G100纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化,然后进行SDS-PAGE、Western-blot分析,并用细胞病变抑制法进行重组猪IFN-γ活性测定.结果表明:试验得到了高纯度的重组pIFN-γ,且纯化的重组猪IFN-γ蛋白具有较高的干扰病毒复制的活性,对PRV的活性为2.0×103U.mg-1,而对标准O型口蹄疫病毒的活性为2.56×105U.mg-1.
- 潘晓梅窦永喜骆学农刘琼张冬峰岳城才学鹏
- 关键词：蛋白纯化活性分析
- 猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因的表达
- 囊虫病是由猪带绦虫的幼虫猪囊尾蚴感染猪或人而引起的人畜共患病，半胱氨酸蛋白酶(C!ysteine protease)广泛地存在于人类、寄生虫等多种动物体内。由于寄生虫半胱氨酸蛋白酶在宿主寄生虫相互关系上起着重要作用，并且...
- 刘琼
- 关键词：囊尾蚴寄生虫人畜共患病
- 文献传递
