杨春辉
- 作品数：15 被引量：39H指数：4
- 供职机构：大连医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重楼皂苷D对人慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的抑制作用及其机制被引量：1
- 2017年
- 目的 探讨重楼皂苷D对人慢性粒细胞白血病细胞株K562增殖的抑制作用及其机制.方法 选用浓度为0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.2、2.4μmol/L重楼皂苷D作用于K562细胞24 h,用CCK-8法检测重楼皂苷D对K562细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测重楼皂苷D对K562细胞凋亡以及细胞周期分布的影响;Western blot方法检测相关蛋白的表达.结果 重楼皂苷D可显著抑制K562细胞增殖,24 h的半数有效抑制浓度（IC50）为（0.9±0.1）μmol/L.流式细胞术检测结果显示,浓度为0.9μmol/L重楼皂苷D作用于K562细胞12、24 h后,细胞早期凋亡率较对照组的（2.05±0.45）%分别提高到（11.46±1.51）%、（28.87±2.35）%,差异有统计学意义（F=38.637,P＜0.05）.重楼皂苷D能够显著下调bcl-2、CDK1、cyclin B1、bcr-abl融合蛋白的表达,上调Bax、细胞色素C、活化的caspase-3以及p21的表达（均P＜0.05）.此外,重楼皂苷D能够将细胞周期阻滞在G2/M期（F=42.355,P＜0.05）.结论 重楼皂苷D能够明显抑制慢性粒细胞白血病K562细胞增殖,其作用机制可能是诱导细胞凋亡及促进细胞周期阻滞.
- 官永海蔡虹杨春辉
- 关键词：细胞周期K562细胞
- 异土木香内酯通过caspase依赖凋亡途径抑制K562/A02细胞增殖被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨异土木香内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02增殖抑制及凋亡诱导作用。方法:选用异土木香内酯0、6.25、12.5、25、50和100μmol/L分别处理K562/A02细胞12、24和48 h,用CCK-8法测定异土木香内酯对K562/A02细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测异土木香内酯对K562/A02细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)、活性氧(reactive oxygen species)及细胞凋亡(apoptosis)的影响;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:异土木香内酯能够明显抑制K562/A02细胞增殖,其作用24 h的IC_(50)值约为(15±1.42)μmol/L(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,0、10、15、20μmol/L异土木香内酯作用24 h后,细胞凋亡率分别为(1.35±0.52)%、(18.07±4.03)%、(27.53±3.01)%和(34.99±4.91)%(P<0.05),同时线粒体膜电位逐渐降低,分别为(96.42±3.59)%、(74.25±6.91)%、(60.97±5.69)%和(31.28±4.95)%;此外,也伴随着细胞内活性氧的增加,分别为(5.03±1.43)%、(17.55±3.85)%、(32.09±3.23)%和(44.38±5.92)%。异土木香内酯能够明显下调BCL-2的表达,上调BAX、cytochrome C、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表达。结论:异土木香内酯对K562/A02细胞具有明显的增殖抑制作用,其作用可能是通过caspase依赖的线粒体途径诱导细胞凋亡而实现的。
- 官永海张小旦蔡虹杨春辉
- 关键词：异土木香内酯白血病凋亡线粒体途径
- Bmi-1-siRNA对肺腺癌A549细胞体内外增殖能力的影响被引量：6
- 2013年
- 背景与目的:原癌基因Bmi-1是多梳基因家族中的一员,能调节正常干细胞和肿瘤干细胞的自我更新能力。近年来发现其在多种恶性肿瘤中表达上调。本文旨在观察Bmi-1基因沉默对肺腺癌A549细胞体内外增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:根据本实验室设计的4条针对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)序列,选择一条已经证实最有效的序列作为靶序列和一条随机序列作为阴性对照,构建重组逆转录病毒siRNA表达载体并将其转染入A549细胞中;应用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测对Bmi-1基因的沉默效果;应用MTT比色法、台盼蓝拒染法及平板克隆形成实验检测Bmi-1-siRNA对A549细胞体外增殖的影响;利用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期;通过裸鼠腋窝皮下接种各组细胞,观察Bmi-1-siRNA对A549细胞在裸鼠体内的致瘤能力的影响;Western blot检测PTEN、p-AKT、cyclin D1、P21、P27蛋白表达。结果:Bmi-1-siRNA有效地沉默了Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达;沉默Bmi-1基因的表达能够抑制A549细胞的体内外增殖能力,使干扰组细胞的细胞周期阻滞于G1期;沉默Bmi-1基因的表达后,干扰组细胞中PTEN、P21、P27蛋白增加,p-AKT、cyclin D1蛋白表达降低。结论:Bmi-1-siRNA通过使细胞周期阻滞于G1期来抑制肺腺癌A549的体内外增殖能力,这种抑制作用涉及cyclin D1和p-AKT表达下降以及P21/P27和PTEN的表达上调。
- 郑翔宇朱杰王艺芳刘纯青刘奔杨春辉刘丹丹孟秀香
- 关键词：肺腺癌小干扰RNABMI-1基因
- Bmi-1-siRNA抑制肺腺癌SPC-A1细胞的增殖及其机制被引量：7
- 2014年
- 背景与目的:Bmi-1(B-cell specific moloneymurine leukemiavirus insertion site 1)基因是多梳基因家族的重要成员之一,主要通过调控INK4a/ARF位点来调节细胞的增殖和衰老。本研究旨在探讨Bmi-1-siRNA对具有INK4a/ARF位点的肺腺癌SPC-A1细胞生长和增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:①本实验选用已确定有效的siRNA序列进行病毒包装,构建反转录病毒si-Bmi-1 pSUPERretro-neo,然后感染到SPC-A1细胞中,建立稳定表达Bmi-1-siRNA的肺癌细胞株。②利用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)技术分析Bmi-1基因在Bmi-1-siRNA转染后SPC-A1细胞中表达情况。③利用台盼蓝拒染法、MTT法、平板克隆形成实验和裸鼠实验,分析Bmi-1-siRNA对SPC-A1细胞体内外增殖能力的影响。④利用流式细胞术分析SPC-A1各组细胞的周期分布。⑤利用Western blot法分析增殖通路相关分子:p16INK4a、p53、Cyclin D1、PTEN和Ser473p-Akt等蛋白表达情况。结果:反转录病毒介导的Bmi-1-siRNA被转染后,有效抑制了SPC-A1细胞中Bmi-1基因的转录和表达,抑制了SPC-A1细胞的体内外增殖能力(P<0.01),并使转染组细胞阻滞在G1期[(64.6±1.2)%,P<0.05]。沉默Bmi-1基因后,与对照组细胞相比,p16INK4a、p53和Akt蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),Cyclin D1和Ser473p-Akt表达水平下降(P<0.01),PTEN表达水平上调(P<0.01)。用PTEN抑制剂处理转染组细胞后,Bmi-1和Ser473p-Akt蛋白表达得以重塑。结论:Bmi-1-siRNA通过将肺腺癌SPC-A1细胞周期阻滞于G1期来抑制肿瘤细胞增殖,这种抑制作用可能不依赖于p16INK4a来调控Cyclin D1的表达,进而参与调控肿瘤细胞增殖。
- 王艺芳刘奔刘纯青郑翔宇刘丹丹朱杰杨春辉孟秀香
- 关键词：BMI-1基因肺腺癌细胞增殖
- 木香烃内酯通过JAK/STAT通路抑制K562细胞增殖研究被引量：3
- 2020年
- 目的:探讨木香烃内酯对慢性髓系白血病细胞系K562细胞的增殖抑制作用及机制。方法:采用CCK-8法检测木香烃内酯对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率及活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot检测相关蛋白的表达。结果:木香烃内酯能够明显抑制K562细胞增殖,其24 h半数有效抑制浓度(IC50)约为(15.70±2.13)μmol/L(P<0.05);15μmol/L木香烃内酯分别作用K562细胞0、24和48 h均能够诱导K562细胞凋亡,凋亡率由(1.77±0.59)%分别增加到(17.68±2.84)%、(30.65±4.54)%(P<0.05);木香烃内酯能够明显增加细胞内ROS的水平,由(3.52±1.08)%分别增加到(23.56±3.52)%,(36.68±4.22)%(P<0.05);木香烃内酯能够显著降低BCL-2、p-JAK2、p-STAT3的表达,上调BAX、细胞色素C、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP的表达水平。结论:木香烃内酯能够通过JAK/STAT信号通路诱导K562细胞凋亡,从而抑制其细胞增殖。
- 姜杰蔡虹曲杰杨春辉
- 关键词：木香烃内酯JAKSTATK562
- 异土木香内酯通过bcr-abl-STAT5信号通路抑制慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/A02增殖被引量：1
- 2017年
- 目的 探讨异土木香内酯对慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/A02增殖的抑制作用及其机制.方法6.25、12.5、25、50、100μmol/L的异土木香内酯作用于K562/A02细胞24、48 h,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测其对K562/A02细胞的增殖抑制效果;10、15、20μmol/L异土木香内酯作用于K562/A02细胞24 h,流式细胞术检测细胞周期及凋亡;Western blot法检测增殖相关蛋白表达水平.多组间比较采用单因素方差分析.结果异土木香内酯能够显著抑制K562/A02细胞增殖,并呈浓度依赖性（P〈0.05）,作用24 h的半数抑制浓度（IC50）值为（15.001.03）μmol/L;阴性对照组及10、15、20μmol/L异土木香内酯作用后K562/A02细胞凋亡率分别为（2.710.52）%、（19.101.55）%、（27.612.32）%和（32.013.01）%,呈浓度依赖性（F=33.901,P〈0.05）;S期细胞比例分别为（57.802.11）%、（68.622.89）%、（78.443.51）%和（80.612.90）%,呈浓度依赖性（F=51.328,P〈0.05）.异土木香内酯明显降低bcl-2、p-bcr-abl、p-STAT5、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）和细胞周期蛋白A（cyclin A）的表达（P〈0.05）,上调细胞色素C、Bax和p21的表达（P〈0.05）.结论异土木香内酯能够通过bcr-abl-STAT5信号通路抑制K562/A02细胞增殖.
- 蔡虹杨春辉
- 关键词：异土木香内酯
- 去氢木香内酯对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的影响及其机制被引量：3
- 2019年
- 目的探讨去氢木香内酯对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞增殖的影响及其机制。方法用不同浓度去氢木香内酯作用于对数生长期的K562细胞,采用瑞特-吉姆萨染色观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期、凋亡情况及细胞表面分化抗原CD14和CD11b表达,蛋白质印迹法检测JAK-STAT通路、细胞凋亡及细胞周期相关蛋白表达。结果不同浓度(4.0、6.0、8.0、10.0、12.0μmol/L)去氢木香内酯作用24h均能抑制K562细胞增殖,与对照组比较,差异有统计学意义(F=109.510,P<0.05)。5.0、10.0μmol/L去氢木香内酯作用24h后,K562细胞凋亡率分别为(16.1±3.8)%、(29.6±4.3)%,较对照组的(3.1±0.5)%升高(F=83.255,P<0.05)。5.0、10.0μmol/L去氢木香内酯作用24h后,K562细胞的G2/M期细胞比例分别为(17.0±3.2)%、(28.8±3.9)%,较对照组的(9.1±2.3)%升高(F=161.598,P<0.05);S期细胞比例分别为(48.1±3.9)%、(61.0±5.4)%,较对照组的(39.6±3.6)%升高(F=192.356,P<0.05)。2.5、5.0μmol/L去氢木香内酯作用72h后,K562细胞的CD14表达率分别为(28.6±3.9)%、(41.1±4.4)%,较对照组的(3.1±0.5)%升高(F=132.811,P<0.05);K562细胞的CD11b表达率分别为(42.4±5.0)%、(61.2±5.7)%,较对照组的(4.2±1.1)%升高(F=179.553,P<0.05)。去氢木香内酯能够降低JAK2、STAT5、cyclinE、CDK2、cyclinA、CDC25C、cyclinB1、CDK1及bcl-2蛋白表达,上调p21及bax蛋白的表达。结论去氢木香内酯能够抑制慢性粒细胞白血病K562细胞增殖,可能是通过细胞周期阻滞、诱导凋亡及分化而实现的。
- 蔡虹杨春辉
- 关键词：去氢木香内酯细胞周期细胞分化白血病
- 土木香内酯通过调节细胞周期相关蛋白的表达抑制慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562／ADR增殖被引量：1
- 2015年
- 目的研究土木香内酯对慢性粒细胞白血病（CML）耐药细胞株K562／ADR增殖、周期分布以及周期相关蛋白的影响。方法选用0、1．0、2．0、4．0、6．0、8．0、10．0μmol／L土木香内酯作用K562／ADR细胞12、24、48h，四甲基偶氮唑蓝（MTr）比色法检测土木香内酯对K562／ADR细胞的增殖抑制率，流式细胞术检测土木香内酯对K562／ADR细胞周期分布的影响，Westernblot检测周期相关蛋白的表达。结果土木香内酯能够显著抑制K562／ADR细胞增殖，半数抑制浓度为5．0μmol／L。流式细胞术检测结果显示，不同浓度（0、2．5、5．0、7．5μmol／L）的土木香内酯能够使K562／ADR细胞周期阻滞在G2／M期，G2／M期细胞比例由（15．8±1．7）％分别提高到（21．0±2．4）％、（26．4±2．7）％、（30．1±3．9）％（P〈0．05）。土木香内酯能够明显降低CDKl、CyclinBl的表达，上调周期抑制蛋白p21的表达。此外，土木香内酯能够有效地抑制bcr-abl融合蛋白的表达水平。结论土木香内酯可能通过调节细胞周期相关蛋白的表达介导K562／ADR细胞G2／M期阻滞，抑制细胞的增殖。
- 杨春辉蔡虹孟秀香麻彤辉
- 关键词：土木香内酯白血病细胞周期
- Bmi-1基因与肿瘤多药耐药性的关系被引量：1
- 2013年
- 肿瘤干细胞不仅是肿瘤细胞恶性增殖的来源，也是肿瘤化疗抵抗和复发的根源。肿瘤干细胞对多种化疗药物耐受是基于其干细胞特性。Bmi-1基因是调控干细胞自我更新和增殖活性的关键因素，和多种恶性肿瘤的发生密切相关。众多研究结果显示，Bmi-1基因可上调ABE转运蛋白的表达量、抑制细胞凋亡，通过多种途径介导肿瘤的多药耐药性。本文就Bmi-1基因与肿瘤多药耐药性关系研究进展进行综述。
- 张超杨春辉孟秀香
- 关键词：BMI-1基因肿瘤干细胞多药耐药性
- 去氢木香内酯对K562增殖的抑制作用及其机制被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨去氢木香内酯对慢性髓系白血病细胞系K562细胞的增殖抑制作用及其机制。方法:应用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测相关蛋白的表达。结果:CCK-8检测结果显示,4、6、8、10、12μmol/L去氢木香内酯能够明显抑制K562细胞增殖,作用24 h抑制率分别为(24.32±3.05%)、(42.91±3.89%)、(46.35±4.93%)、(77.06±5.42%)、(89.04±4.25%),对照组为(2.08±0.27%),差异有统计学意义(P<0.05);5、10μmol/L去氢木香内酯能够诱导K562细胞凋亡,与对照组相比凋亡率由(2.73±0.46%)分别增加到(14.43±2.52%)、(31.71±3.58%)(P<0.05);去氢木香内酯能够使细胞周期阻滞在G2/M期,G2/M期细胞比例由(8.53±1.71%)分别增加到(17.42±2.72)、(31.79±4.38%)(P<0.05);去氢木香内酯能够显著抑制BCL-2、CyclinB1、CDK1、BCR/ABL、STAT5、STAT3等的表达,上调BAX、p21的表达水平。结论:去氢木香内酯通过BCR/ABL-STAT信号通路抑制K562细胞增殖,诱导K562细胞凋亡。
- 蔡虹杨春辉何晓琳
- 关键词：去氢木香内酯细胞凋亡BCR/ABLK562细胞
