郑翔宇
- 作品数：11 被引量：40H指数：4
- 供职机构：河南省中医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省科技厅自然科学基金更多>>
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- 下调lncRNA NONRATT021972调控TLR4对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应被引量：4
- 2021年
- 目的关于lncRNA NONRATT021972在糖尿病中表达上调对胰岛β细胞影响的研究较少。文中旨在探讨下调lneRNA NONRAT021972调控Toll样受体4(TLR-4)对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症因子表达的影响。方法将胰岛β细胞NIT-1分成对照组(正常培养的胰岛β细胞)、模型组(用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理)、sh-NC组(转染shRNA control,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)、sh-NONRATT021972组(转染sh-NON-RATT021972,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)。PCR方法检测NONRATTO21972.TLR4和TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达;CCK8实验检测细胞增殖活性变化;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Westernblot检测C-Caspase-3.C-Caspase-9、TLR4、TNF-α、IL-6、1L-1β蛋白表达。在胰岛β细胞中分别将NONRATT021972 shRNA、阴性对照载体和NON-RATT021972 shRNA.TLR4过表达载体共转染,用含有25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理,分为sh-NON-RATT021972+NC组(共转染NONRATT021972 shRNA和空载体,高糖高脂诱导)和sh-NONRATT021972+TLR4组(共转染NONRATT021972 shRNA和TLR4过表达载体,高糖高脂诱导)。Westerm blot检测C-Caspase-3、C-Caspase-9、TLR4,TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达。结果与对照组胰岛β细胞中NONRATTI021972表达水平(1.00±0.11)比较,模型组(2.47±0.12)明显升高(P<0.001);与sh-NC组NONRATT021972表达水平(2.45±0.23)比较,sh-NONRATT021972组(1.12±0.16)明显降低(P<0.001)。与对照组比较,模型组胰岛β细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-NONRATT021972组胰岛β细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中C-Caspase-3.C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与sh-NONRATT021972+NC组比较,sh-NONRATT021972+TLR4组胰岛β细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)
- 郑翔宇付宗强张艳敏郭伟胜
- 关键词：胰岛Β细胞糖脂毒性TOLL样受体4炎症
- Notch3蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义
- 近一个世纪以前,Notch在果蝇中的发现打开了研究由Notch信号通路介导和影响细胞生长的大门.Notch信号通路与血管生成、肿瘤生长和进展的基本步骤密切相关,同时在肿瘤侵袭转移中起着重要作用.Notch信号通路与肿瘤的...
- 郑翔宇
- 关键词：非小细胞肺癌生物标志物
- 沉默Bmi-1表达对A549细胞增殖和侵袭转移作用
- 目的：原癌基因Bmi-1是多梳基因家族中的一员，能调节正常干细胞和肿瘤干细胞的自我更新能力。近年来发现其在多种恶性肿瘤中表达上调。本研究选择高表达Bmi-1基因但缺乏INK4a/ARF位点的肺腺癌细胞系A549作为研究对...
- 郑翔宇
- 关键词：A549细胞细胞增殖细胞侵袭转移肿瘤细胞
- 文献传递
- siRNA沉默Bmi-1表达对肺腺癌A549细胞侵袭能力的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察Bmi-1基因沉默对A549细胞增殖和侵袭影响并初步探讨其机制。方法根据四条针对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)序列,将其瞬时转染到A549细胞中,选择最有效的一条链并构建到逆转录病毒真核表达载体p SUPERretro-Neo中,形成重组载体,然后将其稳定转染至A549细胞中,构建了稳定转染Bmi-1-shRNA的A549细胞。应用MTT实验检测Bmi-1-siRNA对A549细胞体外增殖的影响;Transwell小室观察其对A549侵袭能力的影响;RT-PCR和明胶酶谱法分别观察siRNA对A549细胞MMP-2/MMP-9表达及活性的影响。结果 Bmi-1 siRNA能够抑制A549细胞的增殖能力和侵袭能力,Bmi-1 siRNA能够抑制A549细胞MMP-2/MMP-9的表达和活性。结论 Bmi-1 siRNA对A549细胞侵袭能力的抑制和MMP-2/MMP-9的活性降低有关。
- 刘丹丹郑翔宇刘奔刘纯青王艺芳赵宝霞孟秀香
- 关键词：肺腺癌SIRNABMI-1基因
- Bmi-1-siRNA对肺腺癌A549细胞体内外增殖能力的影响被引量：6
- 2013年
- 背景与目的:原癌基因Bmi-1是多梳基因家族中的一员,能调节正常干细胞和肿瘤干细胞的自我更新能力。近年来发现其在多种恶性肿瘤中表达上调。本文旨在观察Bmi-1基因沉默对肺腺癌A549细胞体内外增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:根据本实验室设计的4条针对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)序列,选择一条已经证实最有效的序列作为靶序列和一条随机序列作为阴性对照,构建重组逆转录病毒siRNA表达载体并将其转染入A549细胞中;应用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测对Bmi-1基因的沉默效果;应用MTT比色法、台盼蓝拒染法及平板克隆形成实验检测Bmi-1-siRNA对A549细胞体外增殖的影响;利用流式细胞仪分析各组细胞的细胞周期;通过裸鼠腋窝皮下接种各组细胞,观察Bmi-1-siRNA对A549细胞在裸鼠体内的致瘤能力的影响;Western blot检测PTEN、p-AKT、cyclin D1、P21、P27蛋白表达。结果:Bmi-1-siRNA有效地沉默了Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达;沉默Bmi-1基因的表达能够抑制A549细胞的体内外增殖能力,使干扰组细胞的细胞周期阻滞于G1期;沉默Bmi-1基因的表达后,干扰组细胞中PTEN、P21、P27蛋白增加,p-AKT、cyclin D1蛋白表达降低。结论:Bmi-1-siRNA通过使细胞周期阻滞于G1期来抑制肺腺癌A549的体内外增殖能力,这种抑制作用涉及cyclin D1和p-AKT表达下降以及P21/P27和PTEN的表达上调。
- 郑翔宇朱杰王艺芳刘纯青刘奔杨春辉刘丹丹孟秀香
- 关键词：肺腺癌小干扰RNABMI-1基因
- Bmi-1-siRNA抑制肺腺癌SPC-A1细胞的增殖及其机制被引量：7
- 2014年
- 背景与目的:Bmi-1(B-cell specific moloneymurine leukemiavirus insertion site 1)基因是多梳基因家族的重要成员之一,主要通过调控INK4a/ARF位点来调节细胞的增殖和衰老。本研究旨在探讨Bmi-1-siRNA对具有INK4a/ARF位点的肺腺癌SPC-A1细胞生长和增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:①本实验选用已确定有效的siRNA序列进行病毒包装,构建反转录病毒si-Bmi-1 pSUPERretro-neo,然后感染到SPC-A1细胞中,建立稳定表达Bmi-1-siRNA的肺癌细胞株。②利用RT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)技术分析Bmi-1基因在Bmi-1-siRNA转染后SPC-A1细胞中表达情况。③利用台盼蓝拒染法、MTT法、平板克隆形成实验和裸鼠实验,分析Bmi-1-siRNA对SPC-A1细胞体内外增殖能力的影响。④利用流式细胞术分析SPC-A1各组细胞的周期分布。⑤利用Western blot法分析增殖通路相关分子:p16INK4a、p53、Cyclin D1、PTEN和Ser473p-Akt等蛋白表达情况。结果:反转录病毒介导的Bmi-1-siRNA被转染后,有效抑制了SPC-A1细胞中Bmi-1基因的转录和表达,抑制了SPC-A1细胞的体内外增殖能力(P<0.01),并使转染组细胞阻滞在G1期[(64.6±1.2)%,P<0.05]。沉默Bmi-1基因后,与对照组细胞相比,p16INK4a、p53和Akt蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),Cyclin D1和Ser473p-Akt表达水平下降(P<0.01),PTEN表达水平上调(P<0.01)。用PTEN抑制剂处理转染组细胞后,Bmi-1和Ser473p-Akt蛋白表达得以重塑。结论:Bmi-1-siRNA通过将肺腺癌SPC-A1细胞周期阻滞于G1期来抑制肿瘤细胞增殖,这种抑制作用可能不依赖于p16INK4a来调控Cyclin D1的表达,进而参与调控肿瘤细胞增殖。
- 王艺芳刘奔刘纯青郑翔宇刘丹丹朱杰杨春辉孟秀香
- 关键词：BMI-1基因肺腺癌细胞增殖
- 高敏C反应蛋白、心肌肌钙蛋白I和B型钠尿肽联合检测对老年心力衰竭的诊断价值被引量：22
- 2013年
- 近年来心力衰竭发病率、死亡率、致残率正在逐年增加^[1,2]。人们一直在努力寻找能够对心力衰竭进行快速、准确诊断和预后评估的生化指标。高敏C反应蛋白（hs-CRP）在发生炎症和创伤时明显升高，对心肌损伤的早期诊断和预后有一定的临床参考价值；心肌肌钙蛋白I（cTnI）有高度的心肌特异性，可作为各种原因所致心肌损伤的确诊性标志；B型钠尿肽（BNP）有利尿和扩张血管的效应，当心室扩张或负荷增加时，它的分泌量也随之升高”0。本文通过对心力衰竭患者进行hs．CRP、cTnI和BNP联合检测，对其在心力衰竭患者诊断和预后中的应用价值进行探讨。
- 郑翔宇鲁会田李永伟
- 关键词：心力衰竭CTNIBNP
- 沉默Bmi-1表达对A549细胞增殖和侵袭转移的作用
- 目的:原癌基因Bmi-1是多梳基因家族中的一员,能调节正常干细胞和肿瘤干细胞的自我更新能力。近年来发现其在多种恶性肿瘤中表达上调。本研究选择高表达Bmi-1基因但缺乏INK4a/ARF位点的肺腺癌细胞系A549作为研究对...
- 郑翔宇
- 关键词：A549细胞BMI-1基因增殖
- 文献传递
- Bmi-1基因与肿瘤侵袭转移
- Bmi-1(B-cell specific moloney murine leukemia virus insertion site1)基因是荷兰癌症中心是Haupt Y等(1)1991年在鼠淋巴瘤细胞中发现的,属于Pc...
- 郑翔宇
- 关键词：恶性肿瘤病理机制BMI-1基因细胞转移细胞侵袭
- 肝X受体激动后对人肝癌细胞SMMC-7721 Warburg效应和细胞侵袭力的影响被引量：1
- 2019年
- 目的:研究肝X受体(LXRs)激动后对人肝癌细胞SMMC-7721 Warburg效应的调节作用及侵袭能力的影响。方法:体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,分为对照组和实验组,实验组采用LXRs激动剂T0901317干预SMMC-7721细胞,对照组仅常规培养。分别在干预后12、24、48 h采用MTT法检测SMMC-7721细胞的活力,流式细胞术检测SMMC-7721细胞周期的改变,葡萄糖氧化酶法检测SMMC-7721细胞葡萄糖摄取水平,比色法检测细胞乳酸水平,Transwell小室法检测SMMC-7721细胞的侵袭能力,蛋白质印迹法检测己糖激酶(HKI)、磷酸果糖激酶(PFKP)、丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙酮酸脱氢酶(PDH)水平。在干预后2、3、4周采用软琼脂集落形成实验检测克隆形成率评价细胞恶性转化。结果:MTT实验结果显示,SMMC-7721细胞活力实验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。SMMC-7721细胞周期实验组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。SMMC-7721细胞集落形成能力实验组显著低于对照组(P<0.05)。SMMC-7721细胞葡萄糖的消耗水平和乳酸产生水平实验组均显著低于对照组(均P<0.05)。SMMC-7721细胞的侵袭能力实验组著低于对照组(P<0.05),SMMC-7721细胞中糖酵解关键酶HKI、PFKP、PK、LDH、PDH水平实验组均显著低于对照组(均P<0.05)。结论:激动LXRs受体可以抑制肝癌细胞SMMC-7721的Warburg效应,抑制其侵袭。
- 郑翔宇付宗强李永伟
- 关键词：肝X受体糖酵解人肝癌细胞
