张国平
- 作品数：10 被引量：19H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 豚鼠至大鼠原位肝移植肝下下腔静脉套管方法的改进被引量：2
- 2008年
- 目的探讨豚鼠至大鼠异种原位肝移植中肝下下腔静脉套管的改进方法。方法豚鼠和SD大鼠各40只分别作为供、受体,随机分为实验组和对照组并随机配对。实验组采用改进的肝下下静脉套管方法进行肝下下腔静脉袖套管的安装及吻合,对照组采用常规方法进行肝下下腔静脉袖套管的安装及吻合。比较两组肝下下腔静脉袖套管安装时间、安装成功率、吻合时间、吻合成功率和手术成功率。结果实验组较对照组肝下下腔静脉袖套管安装时间、吻合时间和无肝期明显缩短,袖套安装成功率、吻合成功率和手术成功率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用改进的肝下下腔静脉套管方法进行豚鼠至大鼠原位肝移植,手术成功率高,可用于豚鼠至大鼠原位肝移植实验研究模型。
- 童传明祝葆华林满洲李明意张国平
- 关键词：肝移植异种移植
- TIMP-3基因在肝细胞肝癌中的表达及其意义被引量：1
- 2012年
- 目的研究TIMP-3基因在肝细胞肝癌(human hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达,探讨其在HCC发生发展中的作用及意义。方法应用免疫组化(SP法)和SYBR Green实时荧光定量聚合酶链反应检测30例HCC及对应癌旁组织以及10例正常肝组织中的TIMP-3蛋白及TIMP-3mRNA的表达情况,分析TIMP-3基因的表达与HCC临床病理参数的关系。结果 TIMP-3蛋白明确定位于肝细胞胞质内。TIMP-3mRNA和TIMP-3蛋白在HCC中的表达量分别为明显低于癌旁肝组织和正常肝组织中的表达量,差异有统计学意义(P<0.01)。统计学分析显示,在HCC中TIMP-3基因的低表达与肿瘤分化程度、血清中甲胎蛋白表达水平、是否合并HBV感染等有关(P<0.05),与患者性别等因素无关。结论 TIMP-3基因可能在HCC的发生发展中起着重要作用,其表达有望成为HCC的重要分子生物学指标。
- 苑进凯祝葆华魏娟王坤张国平王蓝天
- 关键词：肝癌PCRTIMP-3免疫组化
- 柴胡皂甙-d对人肝癌HepG2细胞周期的阻滞作用及p27表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察柴胡皂甙-d（SSd）对人肝癌HepG2细胞周期的阻滞作用及对其p27基因表达的影响。方法常规培养人肝癌HepG2细胞至对数生长期，随机分为两组，实验组10mg／L的SSd作用48h，设空白对照；流式细胞术（FCM）检测细胞周期分布；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞p27基因mRNA表达；免疫组织化学SP法检测p27蛋白的表达。结果实验组HepG2细胞G1期百分率为（69．43±3．01）％较对照组（62．83±2．72）％明显增加（P〈0．05），S期细胞百分率为（22．30±0．82）％较对照组（27．23±0．59）％明显减少（P〈0．01）；p27基因mRNA相对表达量（0．566±0．001）较对照组（0．335±0．000）明显增多（P〈0．05）；p27蛋白表达阳性率为（33．9±3．1）％较对照组（21．9±1．7）％亦明显增多（P〈0．01）。结论SSd可导致人肝癌HepG2细胞周期阻滞于G1期，其机制可能与上调p27基因表达有关。
- 祝葆华张国平李明意王兰天苑进凯
- 关键词：柴胡皂甙-DP27细胞周期
- 柴胡皂甙-d对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期的影响被引量：7
- 2009年
- 目的探讨柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响。方法(1)常规培养人肝癌HepG2细胞;(2)噻唑蓝(MTT)实验观察不同质量浓度SSd处理HepG2细胞72 h后以及10mg/L的SSd作用HepG2细胞不同时间对HepG2细胞生长指数的影响;(3)流式细胞术(FCM)检测SSd处理HepG2细胞48h后细胞周期的分布。结果SSd能明显抑制HepG2细胞的增殖,以10mg/L的SSd作用48h的抑制作用最明显。FCM检测显示SSd作用48h后实验组处于S期的细胞数较对照组明显减少(P<0.01)。结论SSd对人肝癌HepG2细胞的体外增殖具有抑制作用,并能使细胞周期中处于S期的细胞数减少。
- 张国平祝葆华王兰天童传明敬敏
- 关键词：柴胡皂甙-DHEPG2增殖细胞周期
- 受体血清“封闭”供肝与眼镜蛇毒因子抑制异种肝移植超急排斥反应的协同作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨受体血清（recipient serum，RS）“封闭”供肝与眼镜蛇毒因子（CVF）抑制肝移植超急性排斥反应（HAR）的协同作用。方法采用改良“双套管法”制作豚鼠→SD大鼠原位肝移植HAR模型。取豚鼠和SD大鼠各24只，分别作为供体和受体。供受体随机配对。移植前采集受体大鼠近交系其他个体血清，灭活补体备用。实验随机分为4组（n=6），受体血清（RS）实验组移植前用0．1oARS的林格氏液（Ringer）“封闭”供肝，CVF实验组受体大鼠在术前24h经尾静脉注射CVF50／μg／kg，另设RS＋CVF联合实验组和Ringer液对照组。采用改良“双套管法”行豚鼠→SD大鼠原位肝移植；观察供肝植入后形态学改变、受体存活时间、移植肝病理损害程度和受体肝功能。结果各实验组大鼠异种供肝植入后均未见明显花斑样改变。各实验组大鼠移植后存活时间较对照组[（45．2±13．9）mini均明显延长（P〈O．05），其中RS＋CVF组大鼠存活时间[（161．5±30．9）mini长于RS组[（88．1±19．7）mini（P〈0．01）或CVF组[（125．2±25．5）mini（P％0．05）。各实验组大鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）均明显低于对照组[（126．1±23．3）U／L3（P〈0．05），RS＋CVF组ALT[（63．2±13．9）U／L3明显低于CVF组[（79．9±18．1）u／L]（P〈O．05）或RS组[（106．1±19．3）U／L]（P〈0．01）。各实验组移植肝血栓、出血、水肿等病理损害（积分）均较对照组明显减轻（P〈O．05），其中RS＋CVF组大鼠移植肝病理损害最轻（P〈0．05）。结论受体血清“封闭”供肝与CVF对肝移植HAR均具有一定的抑制作用，两者具有协同作用。
- 祝葆华童传明蒲荣张国平王兰天李明意
- 关键词：受体血清异种肝移植CVF超急性排斥反应
- FGF21腺病毒表达载体的构建及鉴定
- 2015年
- 目的构建成纤维生长因子21(FGF21)表达载体。方法将FGF21基因克隆到腺病毒穿梭质粒p AdTrack经DH5α感受态菌扩增,Pme I酶切后热激转化到含腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1的BJ5183感受态菌内同源重组,经卡那霉素筛选及Pac I酶切鉴定,并在DH5α菌中扩增得到Ad-FGF21重组腺病毒质粒,再经Pac I酶切线性化后转染到293A细胞包装成重组腺病毒。结果基因测序结果表明成功合成穿梭载体p Ad-Track-FGF21。PCR和酶切鉴定结果证实含FGF21基因的重组腺病毒表达载体构建成功。Ad-FGF21转染293A细胞并制备出高滴度的重组腺病毒。结论利用腺病毒表达载体获得了携带FGF21的重组腺病毒表达载体。
- 严莉莉项丽庞实锋段杏华曹定国梁朋张国平丁银润胡传银郑克勤
- 关键词：腺病毒成纤维细胞生长因子基因治疗
- 柴胡皂甙-d对HepG2细胞恶性表型的逆转作用被引量：6
- 2011年
- 目的探讨柴胡皂甙-d（SSd）对人肝癌细胞株HepG2细胞恶性表型的逆转作用及其机制。方法常规培养HepG2细胞至对数生长期，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法观察SSd不同浓度、作用不同时间对HepG2细胞增殖情况的影响。实验组选择10mg／L的SSd作用HepG2细胞48h，Giemsa染色法观察细胞形态学改变；化学发光法测定细胞上清液中甲胎蛋白（AFP）浓度；放射免疫法检测细胞上清液中白蛋白浓度；transwell小室实验观察细胞迁移率；RT—PCR检测p27基因mRNA表达。并与空白对照组做比较。数据在多组间比较采用随机分组单因素方差分析，在两组间比较采用t检验。结果10mg／L的SSd作用48h，对HqoG2细胞的生长抑制最明显（F=266．06，P〈0．01）。实验组HepG2细胞形态倾向于正常分化，形态变小、变圆，核变小、变圆或卵圆形，核／质比例缩小。与对照组比较，实验组穿膜细胞数明显减少[（50．60±4．04）个与（41．00±4．64）个，t=-7．32，P〈0．01）；细胞上清液中自蛋白含量明显增多[（24．7±2．8）×10-3g／L与（31．1±4．9）×10-3g／L，t=7．83，P〈0．051；AFP含量明显减少[（118．2±15．6）×10^3μg／L与（70．3士5．7）×10^3μg／L，t=-10．72，P〈0．01]。实验组p27基因mRNA的相对表达量明显多于对照组（t=22．00，P〈0．05）。结论SSd对人肝癌细胞株HepG2细胞恶性表型具有明显的逆转作用，其机制可能与SSd上调HepG2细胞p27基因mRNA表达使其进入分化过程有关。
- 祝葆华蒲荣张国平李明意王兰天苑进凯
- 关键词：恶性表型柴胡皂甙-DP27
- 虎耳草素对长春新碱诱导的神经病理性疼痛的影响被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨虎耳草素对长春新碱诱导的神经病理性疼痛的影响及其作用机制。方法：利用长春新碱致神经病理性疼痛模型小鼠,腹腔注射虎耳草素100 mg/kg,通过行为学实验测试机械性缩足反射阈值；生化检测氧化应激相关指标丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）的表达；ELISA 检测炎症因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-1β的表达；原子吸收光谱检测钙离子浓度的变化。结果：虎耳草素能够显著地抑制长春新碱诱导的神经病理性疼痛（CNP）模型小鼠机械性痛觉过敏,且能改善 CNP 小鼠高氧化应激状态和降低 CNP 小鼠 TNF-α、IL-1β的表达水平及钙离子浓度。结论：虎耳草素拮抗 CNP,且该作用机制可能与其抑制氧化应激、降低炎症因子 TNF-α、IL-1β的表达及钙离子浓度有关。
- 胡传银张国平陈小萍曹定国梁朋
- 关键词：神经病理性疼痛氧化应激炎症因子钙离子
- 人核迁移蛋白shRNA慢病毒载体的构建及转导
- 2012年
- 目的:通过绿色荧光蛋白(GFP)标记,构建可示踪的人核迁移蛋白(hNUDC)慢病毒RNA干扰载体,并实现其对靶细胞的转导。方法:通过分子克隆技术将人核迁移蛋白的发夹RNA(shNUDC-F)克隆至慢病毒表达载体中,构建成靶向针对hNUDC的RNA干扰载体,通过磷酸钙转染法,将获得的慢病毒高纯度质粒转染进低次代293T细胞中进行包装,通过高速离心收获慢病毒颗粒,经滴度测定后,对Dami巨核细胞进行转导实验。用显微镜观察转导效率,用Westernblot检测RNA干扰效果。结果:慢病毒携带的shNUDC-F片段对Dami巨核细胞能高效转导,并使其内源hNUDC基因发生基因沉默,干扰效果较好。结论:成功构建出慢病毒hNDUC RNA干扰载体,并在293T细胞中实现包装并成功转入Dami细胞。
- 庞实锋廖霞郑克勤周汝滨梁朋曹定国张国平李文荣
- 关键词：慢病毒RNA干扰发夹RNA巨核细胞
- 受体血清“封闭”供肝预防异种肝移植超急性排斥反应被引量：1
- 2011年
- 目的探讨受体血清“封闭”供肝对异种肝移植超急性排斥反应（hyperacuterejection，HAR）的预防作用。方法取豚鼠和sD大鼠各20只，分别作为供体和受体，供受体随机配对；移植前采集受体大鼠近交系其他个体血清，45℃水浴灭活补体备用；实验组（n=10）术前用0．1％受体血清（recipientserum，RS）的Ringer液“封闭”供肝，对照组（n=10）仅用Ringer液灌洗供肝；采用改良“双套管法”行豚鼠、sD大鼠原位肝移植，观察供肝植人后形态学改变、受体存活时间、术后1h存活率，HE染色法检测移植肝微血栓、出血和肝细胞水肿等病理损害积分；检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）评价肝功能。结果两组大鼠供体异种肝移植时间和无肝期比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；对照组受体大鼠供肝充盈缓慢，灌注不均，实验组供肝充盈迅速，灌注较均匀；实验组受体大鼠术后存活时间和术后1h存活率较对照组均明显增加（P〈0．01），移植肝微血栓、间质出血（积分）较对照组明显减轻（P〈0．01），肝细胞水肿无明显差异（P〉0．05）；血清丙氨酸转氨酶（ALT）较对照组明显下降（P〈0．05）。结论受体血清“封闭”供肝对异种肝移植HAR具有一定的抑制作用，是预防器官移植HAR的潜在方法之一。
- 祝葆华童传明郭伟韬李明意张国平王兰天
- 关键词：肝移植移植物排斥受体血清
