黄筱钧 作品数:14 被引量:57 H指数:4 供职机构: 湖北民族大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 湖北省高等学校省级教学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 环境科学与工程 轻工技术与工程 更多>>
流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg的构建与细胞转染研究 被引量:1 2015年 目的设计并构建含分子内佐剂的流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg,初步研究其在HEK293T细胞中的转染效率。方法通过生物信息学软件设计并合成了含分子内佐剂的流感病毒多表位基因CTB-Eg,将其插入真核载体pEGFP-C2中,获得了重组质粒pEGFP-C2/CTB-Eg;用脂质体法转染HEK293T细胞,通过荧光显微镜观察和PCR法检测其转染效率。结果成功构建了真核表达质粒pEGFP-C2/CTB-Eg,且该重组质粒能在HEK293T细胞中瞬时转染,转染效率在50%~70%之间。结论本研究成功设计、构建了CTB-Eg融合基因,其在HEK293T细胞中转染效率较高,为流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg在小鼠体内的抗病毒作用研究奠定了坚实基础。 寇静远 潘兴 李婉宜 邝玉 周琳琳 杨靖 石新丽 陆顺顺 黄筱钧 邓昭敏 秦臻 王保宁 李明远关键词:流感病毒 多表位基因 霍乱毒素B亚单位 甲型流感病毒和肺炎链球菌协同感染动物模型的建立 研究背景:甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)感染所致的严重病例及死亡病例大多数是由于合并或继发了细菌感染,其中肺炎链球菌(Streptococcus Pnuemoniae,SP)是流感后继发性细菌... 秦臻 黄筱钧 罗俊 游江舟 王红仁 李明远甘草体外抗呼吸道合胞病毒的作用及机制 被引量:10 2015年 目的探讨甘草体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用及初步机制。方法采用细胞病变效应(CPE)和MTT法,测定细胞半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为对照,评价甘草抗RSV的效果。结果甘草在体外既能抑制RSV的增殖,又能直接杀伤RSV,阻断RSV的感染。甘草的TC50=3.21 mg/ml,IC50=0.273 mg/ml,TI=11.76。甘草比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大,抗RSV作用与利巴韦林相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论甘草使用安全,在体外对RSV有明显的抑制作用。 黄筱钧关键词:甘草 呼吸道合胞病毒 抗病毒作用 神经免疫、毒品滥用和神经艾滋病 被引量:1 2014年 从人群总体感染和风险来看,毒品滥用人群HIV感染率高。共用注射器、注射器未消毒及不安全性行为[1],这些危险因素均会增加吸毒者感染HIV的风险。冰毒和摇头丸等新型毒品可使人异常兴奋,产生欣快感,增强性欲望,极易发生不安全性行为和群体淫乱,也增加了感染HIV的风险[1]。人们很早就推测,滥用毒品是HIV感染的重要辅助因素,HIV感染和毒品滥用之间可能存在协同效应[2-3]。但由于存在吸毒人群的登记制度不全、 黄筱钧 李宁 侯炜关键词:毒品滥用 神经免疫 HIV感染率 艾滋病 不安全性行为 共用注射器 成瘾药物滥用、人类免疫缺陷病毒感染及神经艾滋病 被引量:3 2016年 成瘾药物滥用主要影响机体的中枢神经系统,产生躯体和(或)精神依赖,引起慢性复发性脑病,严重影响患者的身心健康。获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是人感染人类免疫缺陷病毒(HIV)后导致免疫缺陷,并发一系列机会性感染及肿瘤,严重者可导致死亡的综合征。虽然高效抗逆转录病毒疗法已在减轻患者痛苦、延长患者寿命等方面取得了一定的效果, 黄筱钧 侯炜关键词:人类免疫缺陷病毒 成瘾药物 桑叶乙醇提取物体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用 被引量:12 2014年 目的:研究桑叶体外对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:采用细胞培养技术,将51.2 g·L^-1桑叶液(70%乙醇提取物)倍比稀释后与密度为1.0×104/m L Hep-2细胞作用72 h,观察细胞病变效应(CPE),通过MTT法测定半数中毒浓度(TC50)。不同浓度桑叶液、Hep-2细胞与0.01 m L 100 TCID50RSV作用1,2 h后,测定其半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为阳性对照,评判桑叶抗RSV效果。结果:桑叶质量浓度在0.01-12.8 g·L^-1,对RSV的抑制率表现出量效关系,TC506.56 g·L^-1,IC501.015 g·L^-1,TI 6.46。桑叶体外有抗RSV作用,比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大(P〈0.05)。结论:桑叶对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒。 黄筱钧关键词:桑叶 呼吸道合胞病毒 抗病毒作用 重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究 被引量:4 2015年 目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内佐剂序列ctB,按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,即为BIB序列。人工合成之后,插入原核表达质粒pET28a(+)中,构建pET28a(+)/ctB-ureI-ureB〔pET28a(+)/BIB〕重组质粒。经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定正确后,将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。BIB工程菌经乳糖诱导表达后,SDS-PAGE检测重组蛋白BIB的表达情况,并对其N端氨基酸序列和相对分子质量进行测定,Western blot对其进行抗原性鉴定。结果原核表达质粒pET28a(+)/BIB经双酶切和测序鉴定构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量33×103处有一条明显条带,其N端氨基酸序列和相对分子质量与设计序列100%一致,Western blot结果显示BIB可以与抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)小鼠血清及鼠抗CTB单抗产生特异性反应。结论成功构建了幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌,该工程菌表达的BIB蛋白抗原性良好。 王保宁 潘兴 黄筱钧 周永君 祝捷 高礼珍 牛晓娟 李婉宜 李明远 王红仁关键词:多表位疫苗 尿素酶B亚单位 霍乱毒素B亚单位 车前草对呼吸道合胞病毒体外抑制作用的研究 被引量:8 2015年 目的研究车前草醇提液体外对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应(CPE),测定细胞半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),评判车前草抗RSV作用。结果车前草体外有抗RSV作用,浓度在0.0625~8.0 g/L呈量效关系。车前草的TC50=4.57 g/L,IC50=0.285 g/L,TI=16.04。车前草与利巴韦林抗RSV作用差异无统计学意义(P〉0.05),但比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大。结论车前草在Hep-2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制病毒的吸附和增殖,又能直接杀死病毒。 黄筱钧 张朝贵关键词:车前草 呼吸道合胞病毒 抗病毒作用 医学微生物学实验教学的改革与思考 2014年 传统的医学微生物学实验教学模式不能适应医学人才培养的需要,从改变教学理念、优化教学内容、丰富教学方法、完善考核体系等方面进行大胆改革,才能调动学生参与实验的积极性,有利于培养学生的思考能力、实践能力和创新能力。 黄筱钧关键词:医学微生物学 实验教学 教学改革 自噬和凋亡在甲型流感病毒和肺炎球菌协同感染小鼠模型中作用的初探 被引量:2 2016年 目的 建立甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)和肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,SP)协同感染小鼠模型,在该模型中初步探索自噬和凋亡的发生情况.方法 将IAV和SP以不同顺序感染Balb/c小鼠,观察其体重变化和死亡率,检测其肺部IAV和SP滴度、病理改变情况,建立IAV ~ SP协同感染动物模型.使用免疫组化法检测自噬特征蛋白LC3及凋亡特征蛋白Caspase-3的表达情况.结果 IAV~SP组第二次感染后24 h时小鼠肺部IAV和SP滴度最高,死亡率也明显高于其他各组,48 h病理改变也最为严重.免疫组化结果显示IAV感染早期(24 h~48 h)LC3蛋白表达出现峰值,Caspase-3缓慢上升;晚期(72 h~96 h)Caspase-3蛋白表达出现峰值,而LC3蛋白表达逐渐下降.结论 本研究成功建立了1AV~ SP协同感染动物模型,模型鼠中自噬先于凋亡发生,为进一步研究自噬和凋亡在IAV~ SP协同感染中的作用奠定了基础. 秦臻 王红仁 黄筱钧 罗俊 游江舟 李婉宜 杨远 周琳琳 李明远关键词:甲型流感病毒 肺炎链球菌 自噬 凋亡