赵智
- 作品数：26 被引量：49H指数：5
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 谷氨酸棒杆菌/大肠杆菌穿梭型启动子探测载体构建被引量：3
- 2007年
- 从质粒pXZ10145和pUC19出发,构建了一个谷氨酸棒杆菌/大肠杆菌穿梭载体pAK6。pAK6的大小为5684bp,带有卡那霉素和氨苄青霉素抗性选择标记,以及多克隆位点。在pAK6基础上,构建了以氯霉素乙酰转移酶为报告基因的启动子探测载体pAKC6,pAKC6的大小为6474bp。采用鸟枪法,将经Sau3AI消化的谷氨酸棒杆菌基因组片段连入pAKC6;根据谷氨酸棒杆菌对氯霉素的抗性,从中分离出两个具有启动子功能的插入片段。通过测定报告基因氯霉素乙酰转移酶的活性,对两个启动子片段在谷氨酸棒杆菌中的强度进行了初步的判断;测序后,用启动子预测软件对其结构进行了预测,证实了启动子序列的存在。
- 李开赵智张英姿王宇丁久元
- 关键词：谷氨酸棒杆菌大肠杆菌穿梭载体
- 来源于谷氨酸棒杆菌的启动子及其应用
- 本发明公开了一种启动子，其核苷酸序列是如下1)或2)或3)：1)序列表中序列1所示的核苷酸序列；2)在高严谨条件下与所述1)的核苷酸序列杂交且具有启动子活性的核苷酸序列；3)与所述1)的核苷酸序列具有70％以上的同源性且...
- 丁久元刘桂明李开赵智王宇张英姿
- 文献传递
- L-苏氨酸转运蛋白ThrF及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种L‑苏氨酸转运蛋白ThrF及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质，命名为ThrF蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基...
- 丁久元张英姿王宇赵智
- 文献传递
- 一种来源于谷氨酸棒杆菌的启动子及其应用
- 本发明公开了一种启动子，其核苷酸序列是如下1)或2)或3)：1)序列表中序列1所示的核苷酸序列；2)在高严谨条件下与所述1)的核苷酸序列杂交且具有启动子活性的核苷酸序列；3)与所述1)的核苷酸序列具有70％以上的同源性且...
- 丁久元刘桂明李开赵智王宇张英姿
- 文献传递
- L-苏氨酸转运蛋白ThrG及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种L‑苏氨酸转运蛋白ThrG及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质，命名为ThrG蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基...
- 丁久元张英姿王宇赵智
- 文献传递
- 一种γ-氨基丁酸转运蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种γ-氨基丁酸转运蛋白及其编码基因与应用。本发明提供了一种蛋白，名称为GabP，其编码基因为GabP，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列2所示的氨...
- 丁久元赵智刘双江马温华
- 文献传递
- 谷氨酸棒杆菌10147基因组中启动子活性片段的克隆与分析被引量：8
- 2009年
- 【目的】获得谷氨酸棒杆菌10147基因组中具有启动子活性片段的结构序列,为构建表达载体做准备。【方法】利用启动子探测载体pAKC6,采用鸟枪法克隆经过限制性内切酶Sau3A I完全酶切的谷氨酸棒杆菌10147染色体DNA片段,并测定pAKC6上报告基因编码的氯霉素乙酰转移酶(CAT)的比活力,以筛选有启动子功能的片段。【结果】共克隆到30个具有启动子功能的片段。其中有3个插入片段启动的氯霉素乙酰转移酶比活力大于24 U/mg,插入片段F57启动的CAT比活力为32.50 U/mg;而插入有启动子Ptrc的阳性对照的CAT比活力为26.33 U/mg。【结论】获得3个DNA插入片段具有与已知启动子Ptrc相当的启动活性,这些片段可以用于构建谷氨酸棒杆菌表达载体。
- 刘桂明赵智张英姿王宇丁久元
- 关键词：谷氨酸棒杆菌启动子
- 一种γ-氨基丁酸转运蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种γ-氨基丁酸转运蛋白及其编码基因与应用。本发明提供了一种蛋白，名称为GabP，其编码基因为GabP，是如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表中序列2所示的氨...
- 丁久元赵智刘双江马温华
- 北京棒杆菌DAHP合成酶Ⅰ基因的克隆﹑序列分析及表达被引量：7
- 2008年
- 【目的】从北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中克隆DAHP合成酶(EC2.5.1.54,3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase,DS)Ⅰ基因,对其进行功能验证;并将DAHP合成酶Ⅰ基因在C.pekinensePD-67进行同源表达,研究该酶的比活力与生长的相关性。【方法】分别以C.pekinense野生株AS1.299和突变株PD-67的基因组为模板,用PCR方法扩增了DAHP合成酶Ⅰ的全基因序列aroⅠ和前端控制序列;通过pAK6载体提高DAHP合成酶Ⅰ基因在C.pekinensePD-67中的拷贝数实现其同源表达。【结果】核苷酸序列分析结果表明,C.pekinense野生株AS1.299与突变株PD-67相比较,DAHP合成酶Ⅰ基因序列完全一样;通过PCR方法得到的DAHP合成酶Ⅰ基因结构功能完整,能与DAHP合成酶完全缺陷的E.coli3257实现异源互补。突变株PD-67来源的DAHP合成酶Ⅰ基因在重组菌PD-67(pAD1)中进行了表达,在稳定期初期重组菌PD-67(pAD1)的DAHP合成酶Ⅰ的酶比活力比同期的对照菌株PD-67(pAK6)中的该酶酶比活力提高了约5倍。【结论】本工作首次证实了C.pekinense1.299和PD-67中存在DAHP合成酶Ⅰ基因,异源互补试验证明扩增得到的DNA片段编码DAHP合成酶Ⅰ,酶学性质研究表明DAHP合成酶Ⅰ基因在C.pekinensePD-67中的同源表达将有助于提高该菌的色氨酸积累。
- 张春花赵智张英姿王宇丁久元
- 关键词：北京棒杆菌L-色氨酸
- 钝齿棒杆菌CD945天冬氨酸激酶基因和丙酮酸羧化酶基因的表达及相关研究
- 本文采用生长谱法确定钝齿棒杆菌CD945(CorynebacteriumcrenatumCD945)是L-异亮氨酸、L-缬氨酸、L-苏氨酸、L-甲硫氨酸和L-组氨酸五种氨基酸的营养缺陷型菌株。通过调整C.crenatum...
- 赵智
- 关键词：钝齿棒杆菌合成培养基赖氨酸天冬氨酸激酶丙酮酸羧化酶基因表达
- 文献传递
