叶震敏
- 作品数：21 被引量：69H指数：6
- 供职机构：苏州大学医学部细胞与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国防科技工业技术基础科研项目无锡市社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 人白介素24重组蛋白的表达及其抗肿瘤机理的研究被引量：15
- 2005年
- 将人白细胞介素24(hIL24)的cDNA序列克隆至原核高效表达载体pET21a(+)上,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中获高效表达,经纯化、复性后的rhIL24蛋白具有抑制HeLa细胞生长,诱导HeLa细胞凋亡,刺激外周血单核细胞分泌IL6、TNFα、IFNr,抑制血管形成的功能。初探了rhIL24蛋白能通过下调抗凋亡因子bcl2表达,激活线粒体凋亡途径引起肿瘤细胞凋亡的机理。
- 叶震敏朱晔涵盛伟华缪竞诚危少华吴康杨吉成
- 关键词：HELA细胞抗肿瘤机理
- 人白介素24腺病毒载体的构建与鉴定被引量：10
- 2006年
- 目的构建人白介素24(hIL_24)的腺病毒载体,获得hIL_24重组腺病毒子,为hIL_24进行肿瘤的基因治疗奠定基础。方法以pcDNA3.0_hIL_24重组质料为模板,PCR扩增hIL_24,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack_CMVR质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack_CMV_hIL_24,与腺病毒质粒pAdEasy_1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒载体pAdEasy_1_pAdTrack_CMV_hIL_24,经Pacl线性化后转染QBI-293A包装细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT_PCR和Western_blotting鉴定。结果测序结果显示hIL_24序列正确,RT_PCR和Western_blotting检测到了hIL_24的表达。结论成功构建人白介素24的重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack_CMV_hIL_24,获得了人白介素24重组病毒子Ad_hIL_24。
- 叶震敏张颂文缪竞诚盛伟华王伟录吴晓阳杨吉成
- 关键词：人白介素24腺病毒载体
- 重组人白细胞介素24对肺癌A549细胞生长和肿瘤血管生成影响的实验研究被引量：10
- 2006年
- 朱晔涵叶震敏盛伟华蒋军红黄建安胡华成杨吉成
- 关键词：抑制肿瘤细胞生长抑制肿瘤血管生成白细胞介素24肺癌分化相关基因血管生成作用
- 人白介素24腺病毒载体的构建与鉴定
- 目的:构建人白介素24(hIL-24)的腺病毒载体,获得hIL-24重组腺病毒子,为hIL-24进行肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:以pcDNA3.0-hIL-24重组质粒为模板PCR扩增hIL-24,酶切连接到带有GFP...
- 叶震敏张颂文缪竞诚盛伟华王伟录吴晓阳杨吉成
- 关键词：人白介素24腺病毒载体
- 文献传递
- mING基因的腺病毒载体的构建与表达被引量：5
- 2006年
- 目的构建鼠ING4(肿瘤生长抑制因子4)的腺病毒载体,获得鼠ING4(mING4)重组腺病毒子,为ING4进行肿瘤的基因治疗奠定基础。方法以pcDNA3.0-mING4重组质粒为模板,PCR扩增mING4,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-mING4,与腺病毒质粒pAdeasy-1共转化BJ5183细菌,获得重组腺病毒表达载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-mING4,经PacI线性化后转染293细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT-PCR鉴定,并用MTT法检测mING4对肝癌细胞SMMC7721的作用。结果成功构建mING4的重组腺病毒表达载体pAdeasy-1-pAdTrack-CMV-mING4,获得了mING4重组病毒子。结论mING4的重组腺病毒表达载体可抑制SMMC7721细胞的生长。
- 章春花张海峰盛伟华王金志叶震敏杨吉成缪竞诚
- 关键词：腺病毒载体
- 腺病毒介导hIL-24对肝癌荷瘤裸鼠的体内实验研究
- 目的:研究hIL-24腺病毒表达载体抑制SMMC-7721肝癌细胞荷瘤裸鼠肿瘤的生长及其作用机制.方法:将本室构建的Ad-hIL-24转染QBI-293A细胞,多轮感染后获得高效价的病毒.用SMMC-7721肝癌细胞使1...
- 汪小华叶震敏盛伟华谢宇锋王金志杨吉成
- 关键词：抑瘤机制肝癌
- 文献传递
- 裂解型腺病毒Ad-E1A的构建以及体外对肝癌细胞的作用
- 2010年
- 目的构建Ad-E1A裂解型腺病毒载体,研究其对肝癌细胞的裂解作用。方法以QBI-293A细胞基因组DNA为模板,用特异性引物PCR法扩增E1A基因,酶切后连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,用PmeI酶对pAdTrack-CMV-E1A线性化后,与pAdEasy-1共转化在BJ5183大肠杆菌中进行同源重组,筛选重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-E1A;再用PacI酶切对重组腺病毒质粒线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,收获Ad-E1A腺病毒子。在QBI-293A细胞中多轮感染后获得高效价的病毒。将Ad-E1A腺病毒感染SMMC-7721,并用MTT和流式细胞仪检测Ad-E1A对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响。结果获得高滴度的重组裂解型腺病毒Ad-E1A。Ad-E1A感染SMMC-7721后,出现明显的细胞病变。Ad-E1A对人肝癌细胞SMMC-7721的生长有明显抑制,48 h后效果明显。Ad-E1A可直接诱导SMMC-7721细胞的凋亡。结论裂解型腺病毒Ad-E1A构建成功并可以显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721的生长,并在肝癌细胞中复制造成细胞裂解,诱导肝癌细胞的凋亡。
- 周忆新谢宇锋叶震敏盛伟华杨吉成
- 关键词：细胞凋亡E1ASMMC-7721肝癌细胞
- 裂解型腺病毒Ad-E1A对人脐静脉内皮细胞的影响被引量：3
- 2006年
- 以QBI-293A细胞基因组DNA为模板,PCR扩增E1A基因,酶切连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,pAdTrack-CMV-E1A经PmeI线性化后,与pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,筛选重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-E1A,经PacI线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,获得裂解型腺病毒Ad-E1A。裂解型腺病毒Ad-E1A在ECV304细胞内复制裂解,抑制细胞的生长,并可以降低VEGF的表达,探讨了Ad-E1A可能通过抑制ECV304细胞NF-κB的激活而引起细胞生长抑制的机制,说明Ad-E1A具有抑制肿瘤转移的功能。
- 叶震敏汪小华钟江缪竞诚盛伟华谢宇锋王金志杨吉成
- 腺病毒载体介导的人IL-24基因对HL-60白血病细胞体外培养的影响被引量：2
- 2008年
- 目的构建人IL-24的腺病毒载体Ad-IL24，观察Ad-IL24对HL-60细胞体外培养的影响。方法以pcDNA3.0-IL24重组质粒为模板PCR扩增IL-24基因，酶切并连接到带有绿色荧光蛋白（GFP）标记的pAdTrack-CMV质粒上，Pme I线性化重组质粒pAdTrack-CMV-IL24，并与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌，获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL24，经Pac I线性化后转染QBI-293A细胞，收获重组病毒Ad-IL24。将它感染HL-60细胞，通过激光扫描共聚焦显微镜（ISCM）、MTT和流式细胞术（FCM）法检测IL-24对HL-60细胞生长的影响，免疫细胞化学分析凋亡因子的改变，ELISA检测重组病毒对HL-60细胞分泌γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。结果成功构建重组腺病毒载体pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL24并获得高滴度的重组腺病毒Ad-IL24，各种检测方法表明IL-24基因能抑制HL-60细胞生长，诱导凋亡，IL-24还能下调HL-60细胞Bcl-2的表达并刺激它分泌二级细胞因子IFN-γ和TNF-α。结论IL-24能抑制HL-60细胞生长、诱导凋亡，它可通过下调HL-60细胞Bcl-2的表达并刺激其分泌具有抗肿瘤活性的二级细胞因子来发挥效应。
- 郁心叶震敏盛伟华杨吉成缪竞诚
- 关键词：人IL-24腺病毒载体HL-60细胞
- 腺病毒介导hIL-24抑制裸鼠肝癌荷瘤生长及其机制研究被引量：8
- 2006年
- 为了研究腺病毒hIL-24抑制SMMC-7721肝癌细胞裸鼠荷瘤的生长抑制及其作用机制,构建了重组腺病毒载体pAdeasy-1-pTrack-CMV-hIL-24(Ad-hIL-24),经PacI线性化后转染QBI-293A细胞,多轮感染后收获高效价腺病毒重组病毒子。用SMMC-7721肝癌细胞使16只裸鼠致瘤,然后随机NS分成干预组、5-Fu组、Ad组和Ad-hIL-24组,进行抗肿瘤试验。四组均使用瘤体内注射干预用药,100μL/只NS组、Ad组(107pfu)和Ad-hIL-24组(107pfu)隔日一次,共注射5次;5-Fu组20μg/kg,连续注射5d。用药前、用药后1周和2周分别测皮下瘤体的长径(L)、短径(W),计算出瘤体体积,治疗开始后第15天,将裸鼠脱颈处死,摘取瘤体称重,计算出抑瘤率。显微镜观察细胞生长形态、免疫组化法测caspase3蛋白表达、P53及P27核内抑癌基因表达、CD34染色标记测定的MVD及VEGF蛋白表达。与NS组比较,Ad-hIL-24组与5-Fu组的抑瘤率分别为68.52%(P<0.01)和65.64%(P<0.01);镜下Ad-hIL-24组肿瘤组织的caspase3蛋白表达细胞数较其它3组呈显著性升高(P<0.01),P27核内抑癌基因表达细胞数也较NS组明显增高(P<0.01),CD34染色标记测定的CD34及VEGF较NS组和Ad组明显减少(P<0.001),P53未见明显变化。结论Ad-hIL-24可以显著抑制裸鼠SMMC-7721荷瘤的生长,其机制可能通过激活caspase途径、上调P27抑癌基因表达、抑制血管形成等多途径发挥抑瘤作用。
- 汪小华叶震敏盛伟华谢宇锋王金志杨吉成
- 关键词：SMMC抑瘤
