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人热休克蛋白90AB1-cDNA基因克隆及其原核表达载体的构建以及蛋白表达纯化: 本研究旨在克隆人热休克蛋白90AB1基因,构建其原核表达载体pET28a-hHsp90AB1,为研究hHsp90AB1的基因治疗奠定实验基础,表达纯化得到蛋白为后续的Hsp90AB1抑制剂体外筛选提供构效关系的模型。按I...; 刘凯胜刘忠王绍祥王蕊刘劲芸张嘉萱王一飞; 关键词：生物化学与分子生物学原核表达载体表达纯化; 文献传递

人TRAP1基因的克隆、原核表达及表达条件优化被引量：2: 2011年; 应用RT-PCR技术,从人白血病多药耐药细胞株K562/ADR中扩增出肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(tumor nec-rosis factor receptor-associated protein1,TRAP1)基因的cDNA。选择NdeⅠ和XhoⅠ分别作为上下游引物的酶切位点,将TRAP1基因克隆到带有6×His标签的pET-28a(+)的载体上。重组质粒转化大肠杆菌DH5α中,涂布于含卡那霉素的LB琼脂培养基上,经双酶切鉴定后的阳性克隆送去测序。测序成功的重组质粒pET28a(+)-TRAP1转化大肠杆菌BL21(DE3)中,在IPTG的诱导下,成功表达重组蛋白TRAP1。通过改变诱导温度、诱导时机、IPTG浓度及诱导时间,找出最佳表达条件,使重组蛋白TRAP1表达量最高。结果表明,在39℃条件下,OD600达到0.8时,经终浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导6 h,目的蛋白的表达量最高。该研究为纯化出TRAP1蛋白,进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。; 张嘉萱卢嘉欣王蕊赵振岭韩波彭鑫磊陈伟刘忠任哲王绍祥马岩岩刘凯胜王一飞; 关键词：克隆原核表达 BL21

硫氧还蛋白还原酶抑制剂MF通过Trx-ROS途径诱导HeLa细胞凋亡: 硫氧还蛋白还原酶是调节细胞内氧化还原平衡的关键分子,通过多种途径调控细胞生长和增殖,是国际上高度关注的新型抗肿瘤靶标。TrxR抑制剂MF可诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡,研究其作用机制可为寻找和开发TrxR靶点抗宫颈癌药物提...; 刘忠王蕊王绍祥刘凯胜张嘉萱刘劲芸王一飞; 关键词：硫氧还蛋白还原酶细胞凋亡抗肿瘤

Hsp90抑制剂17-AAG作用于细胞后可诱导其突变蛋白的表达: 抑制热休克蛋白Hsp90是一种非常重要的分子伴侣,它为癌症治疗提供了一个发展迅速、具有潜在优势的研发平台。人Hsp90蛋白包括四种标准亚型,分别为Hsp90α、Hsp90β、Grp94和Trap-1。我们在研究Hsp90...; 王绍祥王晓刘忠王蕊刘凯胜张嘉萱王一飞; 关键词：肿瘤 HSP90 17-AAG 突变

政企距离与企业生产率的区位租——基于市场租和政策租的双重效应: 本文在“城区-开发区-乡镇区”的三位模式下，基于区域层面分析三类企业区位租金对企业生产率的影响和作用机制。本文构建了市场租、政策租和关系租三个指标，实际测量了企业层面的区位租数值，观察其特征，并利用倾向得分匹配方法识别出...; 王蕊; 关键词：企业生产率城市群; 文献传递

热休克蛋白90抑制剂17-AAG对K562/ADR耐药细胞株生长和凋亡的影响被引量：5: 2010年; 目的研究热休克蛋白90抑制剂17-AAG对耐药白血病细胞生长的影响及其诱导的细胞凋亡作用,为白血病的治疗提供新的研究思路。方法采用MTT法检测17-AAG对细胞增殖抑制的剂量-时间-效应关系;激光共聚焦DA-PI染色法观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞凋亡、周期及P-糖蛋白(P-gp)的变化,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的变化。结果 17-AAG能够明显抑制K562/ADR细胞的生长,大量细胞的核内DNA发生断裂,细胞核边缘化,加药组细胞凋亡率与对照组相比明显增高;加药后细胞被阻滞在G1期,procaspase-3和cleaved Caspase-3表达升高。结论 17-AAG可以通过诱导耐药细胞株K562/ADR的凋亡而抑制细胞生长。P-gp和Caspase-3的表达与凋亡事件的发生具有一定的相关性。; 王蕊刘忠王绍祥张嘉萱熊盛徐石海王一飞; 关键词：K562/ADR HSP90抑制剂凋亡 17-AAG P-糖蛋白

Hsp90抑制剂在制备肿瘤多药耐药性逆转剂中的应用: 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种Hsp90抑制剂在制备肿瘤多药耐药性逆转剂中的应用。所述的Hsp90抑制剂为四氢吲唑酮，该化合物作为新型的肿瘤化疗药物增敏剂和增效剂，可以提高多药耐药性肿瘤细胞对化疗药物的敏感性，增强...; 刘忠王一飞夏敏王蕊; 文献传递

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王蕊