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江梅: 作品数：31 被引量：81H指数：6; 供职机构：南昌大学第一附属医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目江西省卫生厅科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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基于PASS技术的EGFR基因突变比例检测方法的建立与评价: 2023年; 目的近期临床研究发现EGFR-TKI并非对所有EGFR基因激活突变的NSCLC患者都有效,提示EGFR-TKI的治疗效果也可能与NSCLC患者中EGFR基因突变比例相关。本研究基于平行等位基因特异性测序(Parallel Allele-Specific Sequencing,PASS)方法,建立一个稳定可靠的EGFR突变基因比例检测平台。方法构建野生型和突变型EGFR基因重组质粒,建立EGFR基因突变比例检测的PASS平台,从灵敏度、精密度以及准确度对PASS检测平台进行性能评价。结果建立的PASS平台可用于EGFR基因点突变和缺失突变的检测,能够检测到的最小基因拷贝数为1,能够稳定检测到的最小基因拷贝数为10,在野生型基因中最低能检测出0.01%的突变基因。线性回归分析显示,检测到的突变型/野生型比例与预期的突变型/野生型比例呈良好的线性相关(R_(2)=0.9962)。结论该方法的建立能够对EGFR基因突变比例进行灵敏、准确测定,这对其在临床中的应用奠定了良好的技术基础,对于评价EGFR基因突变比例与EGFR-TKI靶向治疗NSCLC患者疗效的关系也具有重要意义。; 邓桢曾璐璐呙阳呙阳李俊明李俊明; 关键词：表皮生长因子受体

血浆miR-208可作为心肌损伤生物学标志物的研究: 目的鉴定血浆miR-208是否是心肌损伤特异性的生物学标志物,并探索其与血浆肌钙蛋白I的关联。方法随机选择2011年2月～2011年6月入本院25例因胸痛或心电图异常怀疑急性心肌梗死患者,5例慢性乙型肝炎患者,5例慢性肾...; 江梅

戈谢病GBA基因突变致血小板输注无效1例被引量：1: 2017年; 目的分析1例血小板输注无效患者及其家系戈谢病葡萄糖脑苷脂酶(GBA)基因突变特征。方法 1例贫血及血小板减少的女性患者经血小板输注无效后,对其进行骨髓细胞学、B超及基因测序检测;采用干血斑法检测其白细胞β-葡糖脑苷脂酶活性;提取该家系8个成员(包括先证者及其直系亲属)外周血基因组DNA进行基因测序。结果骨髓细胞学检查示该例患者可见戈谢细胞(6.0%),白细胞β-葡糖脑苷脂酶活性为3.78 nmol/(h·mgPro),B超结果示脾肿大;基因测序分析发现其为GBA基因c.484A>G纯合错义突变;家系调查结果表明,先证者父母、子女及妹妹5人均为GBA基因杂合突变。结论戈谢病患者可因脾功能亢进而出现血小板输注无效;GBA基因突变为该家系的主要致病因素。; 吴红江梅闻芳聂益军; 关键词：血小板输注无效戈谢病

伴ider(17)(q10)t(15;17)变异易位的急性早幼粒细胞白血病临床和实验特征被引量：1: 2013年; 目的报道一例初发的、伴有ider(17)(q10)t(15;17)(q22;q21)的罕见急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)并探讨其临床和实验特征。方法在常规核型分析的基础上,应用双色双融荧光原位杂交(dual-color and dual-fusion fluorescence in situ hybridization,DCDF-FISH)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术进一步检测该病例的细胞遗传学异常和分子生物学异常,并结合文献分析此类少见变异易位的临床特点。结果G显带染色体分析显示患者核型为46,XX,der(15)t(15;17)(q22;q21),ider(17)(q10)t(15;17)(q22;q21)/46,XX,t(15;17)(q22;q21)/46,XX,DCDF-FISH结果显示39%的间期细胞为典型的t(15;17)易位模式一红一绿两融合(1O1G2F),16%的间期细胞信号模式为一红一绿三融合(1O1G3F),RT-PCR结果显示PML-RARα(L型)阳性。结论ider(17)(q10)t(15;17)异常多发生于男性患者,常伴有外周血白细胞减低,骨髓形态表现为颗粒增粗型APL特征,但是患者对全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)联合化疗有效。; 谢龙金张长林栾素清闻芳江梅万腊根; 关键词：急性早幼粒细胞白血病荧光原位杂交

含PML/RARa与ABL双基因质粒标准品的制备及检测PML/RARa基因的双重荧光定量PCR方法的建立: 研究目的：　　 1.获得稳定，准确的含PML/RARa和ABL双基因质粒标准品。　　 2.建立检测PML/RARa和ABL基因双重荧光定量PCR方法。　　 3.开发出可应用于临床急性早幼粒白血病病人PML/RARa...; 江梅; 关键词：荧光定量PCR 急性早幼粒细胞白血病; 文献传递

两种方法设置室内质控限值时室内质控的结果分析被引量：10: 2011年; 目的探讨统计学室内质量控制时对质控限值的设置方法。方法对该科26个室内质控项目按统计学理论计算得到的S、CV,再以S的倍数(3S)设置质控限值进行室内质控,同时参考CLIA′88允许误差,按S=1/4TEa,推算得S值再以S的倍数(3S)设置的质控限值进行室内质控,统计两种方法都按I2S和I3S规则报警和失控次数后,对两者的室内质控结果进行比较。结果统计学方法计算所得出的标准差(S1)除Ca、Cl、Na、Tchol外均小于通过CLIA′88允许误差推算得出的标准差(S2),自然前者设置的质控限值(3S1)也会小于后者设置的质控限值(3S2),且有些项目的S2值或3S2值是S1值或3S1值的2倍;26个室内质控项目用上述两种方法设置室内质控限值时,其室内质控的结果按12S和13S规则判断报警和失控次数,结果前者(控统计学方法设置质控限值)报警和失控次数明显多于后者。结论在统计学室内质控过程中,如检测系统精密度好,使得标准差很小时应以1/4TEa推算出S再设置质控限,至于1/4TEa是否合理,有待检验学者进一步研究,而对于精密度差使得S过大的检测系统,应进行改进达到检验最基本的性能要求。; 万腊根张世锟胡意江梅

体外定点突变PCR法构建abl T315I突变的重组质粒标准品被引量：1: 2013年; 目的利用聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建含人类abl基因第6号外显子片段的野生型及含T315I突变型重组质粒,作为检测abl T315I基因突变的阳性对照和阴性对照标准品。方法先设计包括突变位点的两对引物,以健康人外周血基因组DNA为模板,扩增获得野生型和突变型abl基因第6号外显子片段,将其插入pSG5M-flag载体质粒中,并将所获重组质粒分别进行酶切与测序鉴定,通过紫外分光光度计检测标本的浓度和纯度。结果DNA测序表明在预期位点上发生突变,abl基因第315位氨基酸密码子由苏氨酸(Thr)残基突变为异亮氨酸(Ile)残基,所构建abl基因野生型和突变型质粒,经酶切和测序鉴定与目的片段完全一致。结论PCR技术诱导定点突变准确、高效。所构建含野生型和T315I突变的abl基因重组质粒,可为检测abl基因T315I突变提供阴性和阳性对照以及质控品,同时也为T315I突变的相关研究奠定了基础。; 石淙张长林简正伟江梅闻芳万腊根; 关键词：定点突变阳性对照

Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类的比较被引量：1: 2013年; 目的探讨Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类结果的差异,以验证该仪器白细胞分类结果的准确性。方法取Sysmex XE-2100D血细胞分析仪检测后未触犯推片规则的20份病人标本,重复检测2次。对每份标本分别制作2张血涂片,由两位有经验的检验人员进行人工分类,每张涂片分类200个细胞。比较仪器分类的平均值是否在手工分类结果 99%可信区间内,在可信区间内为合格。结果Sysmex XE-2100D进行中性粒细胞(N%)、淋巴细胞(L%)、单核细胞(M%)分类时合格率均为90%;进行嗜酸性粒细胞(E%)和嗜碱性粒细胞(B%)分类时其合格率分别为95%和75%。结论Sysmex XE-2100D血细胞分析仪进行白细胞分类准确性较高,对于未触犯推片规则的分类结果可以直接发报告。; 简正伟石淙张长林江梅万腊根; 关键词：白细胞分类手工法

检测PML/RARα基因的双重荧光定量PCR方法的建立被引量：2: 2012年; 目的建立在一个反应体系中同时检测融合基因PML/RARα和内参基因ABL的双重荧光定量PCR方法。方法从DNA聚合酶含量、Mg2+浓度和引物浓度等方面进行优化,建立检测PML/RARα和ABL基因双重荧光定量PCR体系,从分析灵敏度,批内、批间精密度以及检测临床样本阳性率等方面对双重荧光定量PCR反应体系进行性能评价,并同时和北京思尔成公司荧光定量PCR试剂盒进行比较,分析两者的一致性。结果成功构建双重荧光定量PCR反应体系,检测质粒灵敏度为103copies/ml,检测NB4细胞的灵敏度为10-3,反应体系批内、批间精密度Ct值的变异系数CV都小于5%,检测20例确诊为APL病人,其检测阳性率,和北京思尔成公司的PCR反应试剂一致。结论成功开发出稳定的双重荧光定量PCR试剂盒,其操作简单,成本低,误差小,能够有效地用于APL分子生物学分型诊断、用药指导、预后观察及MRD监测。; 江梅万腊根简正伟石淙张长林; 关键词：荧光定量PCR PML/RARΑ ABL 急性早幼粒细胞白血病

江西地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析被引量：9: 2016年; 目的探讨江西地区非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变类型、突变率及其与临床特征的关系。方法收集2014年3月至2015年6月南昌大学第一附属医院非小细胞肺癌患者石蜡包埋组织78例,采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应（ARMS-PCR）方法,对非小细胞肺癌患者肿瘤组织EGFR基因18~21外显子突变进行检测,并分析其突变类型、突变发生率及其与临床特征之间的关系。结果在78例非小细胞肺癌患者中,共有27例发生EGFR基因突变,总突变率为34.6%。其中,第18、19、20、21号外显子突变率分别2.6%（2/78）,12.8%（10/78）,3.9%（3/78）,14.1%（11/78）。一例既有21号外显子突变,又有20号外显子突变,其中,19号外显子的突变均为第746~750密码子的碱基缺失,21号外显子突变类型以L858R为主,且19号外显子的突变率与21号外显子的突变率无统计学差异（P〉0.05）,女性EGFR基因的突变率显著高于男性,不吸烟者显著高于吸烟者,腺癌患者显著高于鳞癌患者（P〈0.05）,而EGFR基因的突变率与非小细胞肺癌患者的年龄、临床分期无相关性（P〉0.05）。结论江西地区的非小细胞肺癌EGFR基因突变以19、21号外显子为主,常见于女性、不吸烟、腺癌的非小细胞肺癌患者。; 孔蕴源吕小林江梅聂益军张长林万腊根; 关键词：非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因基因突变

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