简正伟
- 作品数：16 被引量：27H指数：3
- 供职机构：南昌大学第四附属医院更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目江西省自然科学基金江西省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- MicroRNA与乳腺癌关系的研究进展被引量：1
- 2012年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类广泛存在于真核细胞中的长约21-22 nt的单链、非编码小RNA,具有转录后基因调控的功能,参与调控胚胎发育、细胞生长和凋亡、细胞分化、细胞能量代谢等多种生理过程以及糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等多种病理过程。近些年来研究发现,miRNAs与乳腺癌之间的关系十分密切。本文综述与乳腺癌发生、发展密切相关的miRNAs。
- 简正伟万腊根
- 关键词：MICRORNA乳腺癌
- 体外定点突变PCR法构建abl T315I突变的重组质粒标准品被引量：1
- 2013年
- 目的利用聚合酶链反应(PCR)定点突变技术构建含人类abl基因第6号外显子片段的野生型及含T315I突变型重组质粒,作为检测abl T315I基因突变的阳性对照和阴性对照标准品。方法先设计包括突变位点的两对引物,以健康人外周血基因组DNA为模板,扩增获得野生型和突变型abl基因第6号外显子片段,将其插入pSG5M-flag载体质粒中,并将所获重组质粒分别进行酶切与测序鉴定,通过紫外分光光度计检测标本的浓度和纯度。结果DNA测序表明在预期位点上发生突变,abl基因第315位氨基酸密码子由苏氨酸(Thr)残基突变为异亮氨酸(Ile)残基,所构建abl基因野生型和突变型质粒,经酶切和测序鉴定与目的片段完全一致。结论PCR技术诱导定点突变准确、高效。所构建含野生型和T315I突变的abl基因重组质粒,可为检测abl基因T315I突变提供阴性和阳性对照以及质控品,同时也为T315I突变的相关研究奠定了基础。
- 石淙张长林简正伟江梅闻芳万腊根
- 关键词：定点突变阳性对照
- Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类的比较被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Sysmex XE-2100D血细胞分析仪白细胞分类和手工分类结果的差异,以验证该仪器白细胞分类结果的准确性。方法取Sysmex XE-2100D血细胞分析仪检测后未触犯推片规则的20份病人标本,重复检测2次。对每份标本分别制作2张血涂片,由两位有经验的检验人员进行人工分类,每张涂片分类200个细胞。比较仪器分类的平均值是否在手工分类结果 99%可信区间内,在可信区间内为合格。结果Sysmex XE-2100D进行中性粒细胞(N%)、淋巴细胞(L%)、单核细胞(M%)分类时合格率均为90%;进行嗜酸性粒细胞(E%)和嗜碱性粒细胞(B%)分类时其合格率分别为95%和75%。结论Sysmex XE-2100D血细胞分析仪进行白细胞分类准确性较高,对于未触犯推片规则的分类结果可以直接发报告。
- 简正伟石淙张长林江梅万腊根
- 关键词：白细胞分类手工法
- PML/RAR融合基因不典型FISH信号模式的APL的实验与临床特征研究
- 目的探讨伴有PML/RAR不典型FISH信号模式的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验室特征。方法采用PML/RAR的DCDF-FISH技术、染色体核型分析及FLT3-ITD突变检测技术对初诊的52例急性早幼粒细胞白血病患者...
- 刘淑媛栾树清闻芳简正伟万腊根张长林
- 关键词：急性早幼粒细胞白血病复杂核型异常
- 文献传递
- 江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析
- 目的 检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系.方法 提取患者骨髓标本DNA,采用PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系....
- 简正伟石淙闻芳万腊根张长林
- 关键词：急性髓系白血病
- PCR-RFLP联合AS-PCR检测abl基因T315I突变方法的建立
- 目的：建立聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)联合等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)检测abl基因T315I点突变的方法,以提高abl基因T315I基因突变的检出率.
方法：通过构建ab...
- 万腊根石淙简正伟江梅闻芳刘淑媛杨江慧徐群飞张长林
- 关键词：慢性粒细胞白血病基因突变
- 文献传递
- 检测PML/RARα基因的双重荧光定量PCR方法的建立被引量：2
- 2012年
- 目的建立在一个反应体系中同时检测融合基因PML/RARα和内参基因ABL的双重荧光定量PCR方法。方法从DNA聚合酶含量、Mg2+浓度和引物浓度等方面进行优化,建立检测PML/RARα和ABL基因双重荧光定量PCR体系,从分析灵敏度,批内、批间精密度以及检测临床样本阳性率等方面对双重荧光定量PCR反应体系进行性能评价,并同时和北京思尔成公司荧光定量PCR试剂盒进行比较,分析两者的一致性。结果成功构建双重荧光定量PCR反应体系,检测质粒灵敏度为103copies/ml,检测NB4细胞的灵敏度为10-3,反应体系批内、批间精密度Ct值的变异系数CV都小于5%,检测20例确诊为APL病人,其检测阳性率,和北京思尔成公司的PCR反应试剂一致。结论成功开发出稳定的双重荧光定量PCR试剂盒,其操作简单,成本低,误差小,能够有效地用于APL分子生物学分型诊断、用药指导、预后观察及MRD监测。
- 江梅万腊根简正伟石淙张长林
- 关键词：荧光定量PCRPML/RARΑABL急性早幼粒细胞白血病
- 江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析被引量：2
- 2015年
- 目的检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系。方法提取患者骨髓标本DNA,采用AS-PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系。结果在187例患者中,检测出52例NPM1基因突变,突变率为27.8%;有28患者被检测出FLT3-ITD基因突变,突变率为14.97%;同时具有NPM1和FLT3-ITD基因突变的有13例,突变率为6.95%。其中NPM1基因突变在M5、M2中较为多见,而FLT3-ITD基因突变在M1、M4中较为多见。结论检测NPM1和FLT3-ITD基因突变可以给临床治疗提供指导意义。
- 简正伟石淙闻芳万腊根张长林
- 关键词：急性髓系白血病
- 一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。
- 简正伟徐芬石淙万腊根张长林
- 关键词：急性髓系白血病
- PCR-RFLP联合AS-PCR检测bcr/abl融合基因T315I突变方法的建立被引量：1
- 2013年
- 目的 建立聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）联合等位基因特异性聚合酶链反应（AS-PCR）检测bcr/abl融合基因T315I点突变的方法,以提高bcr/abl基因T315I突变检出率.方法 方法学建立.构建abl基因野生型和T315I突变型重组质粒作为检测对象,设计一对野生型和突变型abl基因序列的通用引物,分别以野生型和T315I突变型质粒作为模板,PCR扩增出目的片段,经酶切初筛检测abl基因T315I突变情况,另设计一对仅针对T315I突变的特异性引物进行AS-PCR检测.并对具有该基因突变的1例慢性粒细胞白血病患者进行检测,同时对该方法的灵敏度和特异性进行检测.结果 PCR扩增的目的片段（273 bp）经限制性内切酶Dde Ⅰ酶切后,野生型abl基因片段产生141、68、46和18 bp4条片段,而T315I突变型abl基因片段酶切后产生159、68和46 bp3条片段.PCR-RFLP方法可以检测T315I突变,检测灵敏度为6％.再以酶切产物作为模板进行AS-PCR,优化反应条件,AS-PCR所能检测到的T315I最低突变浓度为0.18％.所测临床标本结果显示,该患者发生了bcr/abl融合基因T315I突变.结论 PCR-RFLP联合AS-PCR检测方法特异性好、灵敏度高,能够给临床检测abl基因T315I突变提供一种新型的检测方法.
- 石淙简正伟江梅闻芳刘淑媛杨江慧徐群飞张长林万腊根
- 关键词：聚合酶链反应
