刘伟娜
- 作品数：6 被引量：25H指数：2
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究被引量：1
- 2015年
- 根据Gen Bank数据库中已报道的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)全基因组序列,分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物;利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因,并构建原核表达载体p ET28a-Sgraxe,经IPTG诱导表达重组Sgr Axe,Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白。结果显示,克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因axe,其序列全长1 008 bp,编码336个氨基酸。SDS-PAGE检测带有p ET28a-Sgraxe转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 k D,与理论值相符。纯化的重组Sgr Axe酶学性质表明,该酶最适反应温度为50℃,最适p H8.0,热稳定性较强,p H作用范围广;金属离子对酶均表现为抑制作用,尤其是Zn2+严重抑制酶活力;重组酶特征的分析揭示了其在工业中潜在的应用价值。
- 刘伟娜梁迪王晓宇玉王宁厚凌宇金一谢响明
- 关键词：灰色链霉菌原核表达纯化酶学性质
- 常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌筛选木聚糖酶高产菌株及其酶学性质研究被引量：19
- 2013年
- 【目的】利用常压室温等离子体快速诱变绿色糖单孢菌,筛选耐热耐碱木聚糖酶高产菌株,并对其进行酶学性质分析,确保其适用于生物制浆漂白工艺。【方法】采用刚果红平板水解圈法结合摇瓶发酵胞外酶测定法进行菌株筛选,并通过DNS木聚糖酶活性测定等方法对来源于不同突变株的木聚糖酶进行酶学性质分析对比。【结果】筛选出遗传稳定性良好的两株木聚糖酶高产菌株AT24和AT22-2,以麦草浆为诱导底物的粗酶液中,突变株AT24及AT22-2所产的木聚糖酶活性分别为512.74、552.70 U/mL,分别为原始菌株S.v的16和17倍的。来源于突变株AT22-2的木聚糖酶的最适反应pH为9.5,最适反应温度为90°C,在50°C 90°C温度范围内具有良好的热稳定性,在100°C条件下处理30 min剩余酶活仍为68%;突变株AT24所产木聚糖酶的最适反应温度为60°C,最适pH为10.0,在60°C 80°C的高温环境下,突变株AT24所产的木聚糖酶具有良好的热稳定性。【结论】突变株AT22-2所产具有耐碱耐高温性质的木聚糖酶,在应用领域尤其在纸浆造纸行业具有较大的潜在应用价值。
- 杨颖玉王宁金一刘伟娜王晓宇郑菲邢新会谢响明
- 关键词：木聚糖酶酶学性质分析
- 厚荚相思器官发生途径microRNA及其靶基因的鉴定与表达研究
- 器官发生是植物无性繁殖和遗传转化的重要途径之一，也是研究植物细胞全能性、器官分化及形态建成的理想实验体系。这一复杂而有序的过程受到了多种内外因素的影响，其中基因的表达调控是最重要和最根本的因素。迄今，植物器官发生的精确分...
- 刘伟娜
- 关键词：厚荚相思器官分化微小核糖核酸基因序列靶基因表达
- 嗜热绿色糖单孢菌木聚糖酶XyN10A基因在毕赤酵母中的分泌表达及其酶学性质研究被引量：1
- 2014年
- 木聚糖酶(Xylanase)可降解自然界中大量存在的木聚糖类半纤维素,由于其在饲料、食品、造纸等领域的广泛应用,越来越受到人们的关注。利用分子生物学技术首次成功构建了一株高效表达嗜热绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)木聚糖酶SviXyN10A的重组工程菌,建立了SviXyN10A的毕赤酵母表达体系,实现了SviXyN10A在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达,并对表达产物进行了诱导表达及纯化,以及酶学性质的研究。结果表明,重组木聚糖酶SviXyn10A用甲醇诱导2 d后酶活即达到7.53IU/mL,最适反应温度为70℃,pH7.0。pH作用范围较广(pH5.0-9.0),具有较强的热稳定性和耐碱性,几乎没有纤维素酶活性,故可以应用在很多工业领域,尤其是在纸浆造纸行业具有很大的潜在应用价值。
- 玉王宁刘伟娜郑菲厚凌宇王晓宇梁迪王伟轩张朔柳静言金一谢响明
- 关键词：木聚糖酶分泌表达毕赤酵母
- 微流控芯片在植物细胞研究中的应用进展
- 2016年
- 植物细胞的传统分析方法是将植物细胞在土壤或者琼脂平板上生长,然后在温室或植物生长室内观察植物的表型。这种方法耗时耗力,且结果分辨率比较低。微流控芯片具有微型化、体积小和高通量等特点,且可在微米水平精确控制植物细胞生长的微环境。因此,能够降低实验成本,缩短实验时间,并且可以达到单细胞水平的分析和鉴定。首先介绍了微流控芯片的加工材料和制备方法,总结了用于植物细胞研究的微流控芯片,重点阐述了近年来微流控芯片在植物根、花粉管、原生质体和细胞壁动力学等植物细胞研究中的应用进展,并展望了微流控芯片在植物细胞研究的应用前景。
- 王伟轩孙静弈刘伟娜厚凌宇玉王宁何湘伟谢响明
- 关键词：微流控芯片聚二甲基硅氧烷植物细胞
- 厚荚相思RNA提取方法的建立与优化被引量：3
- 2012年
- 针对厚荚相思叶片中单宁、酚类、色素、纤维素多糖物质含量高的特点,对Trizol法、改良的热硼酸盐法、CTAB(hexadecyl trimethy ammonium bromide)法和超声波破碎结合RNA提取试剂盒法从厚荚相思体外培养的叶片中提取总RNA进行比较研究,结果表明:在RNA提取试剂盒的基础之上,引入20 MHz的超声波,破碎2 min(puls on 5 s,puls off 5 s)为假叶RNA提取的优化方法.运用此方案获得的RNA片段较完整,其A260/A280值均在1.82～1.98之间,并成功进行了基因片段的RT-PCR(reverse transcription PCR).
- 姚冬琳刘伟娜杨明嘉郭惠红金一谢响明
- 关键词：厚荚相思RNA提取
